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正文內(nèi)容

常見培養(yǎng)基配方(參考版)

2025-06-28 19:42本頁面
  

【正文】 用途:鑒定假絲酵母及霉菌。104 玉米粉瓊脂成分:  玉米粉            60g  瓊脂             15~18g  蒸餾水            1000mL制法:將玉米粉加入蒸餾水中,攪勻,文火煮沸1h,紗布過濾,加瓊脂后加熱溶化,補(bǔ)足水量至1000mL。另用少量乙醇溶解氯霉素,加入培養(yǎng)基中,分裝后,121℃滅菌20min。103 孟加拉紅培養(yǎng)基成分:  蛋白胨            5g  葡萄糖            10g  磷酸二氫鉀          1g  硫酸鎂(MgSO4102 馬鈴薯瓊脂成分:  馬鈴薯(去皮切塊)       200g  瓊脂             20g  蒸餾水            1000mL制法:同馬鈴薯葡萄糖瓊脂。加入葡萄糖和瓊脂,加熱溶化,分裝,121℃高壓滅菌20min。 101 馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA) 成分:  馬鈴薯(去皮切塊)       300g  葡萄糖            20g  瓊脂             20g  蒸餾水            1000mL制法:將馬鈴薯去皮切塊,加1000mL蒸餾水,煮沸10~20min。必要時(shí),可酌量增加瓊脂。100 高鹽察氏培養(yǎng)基成分:  硝酸鈉            2g  磷酸二氫鉀          1g  硫酸鎂(MgSO47H2O)        氯化鉀              硫酸亞鐵             蔗糖             30g  瓊脂             20g  蒸餾水            1000mL制法:加熱溶解,分裝后121℃滅菌20min。分裝試管,121℃滅菌15min,備用。 再加鹽酸(化學(xué)純,)10mL,經(jīng)充分混合后,置56℃溫箱中消化24h(每小時(shí)攪拌1~2次),消化完畢后,加熱,用濾紙過濾,備用?! ∽ⅲ旱鞍纂艘旱闹苽洌喝⌒迈r豬胃,去脂絞碎。然后裝瓶,每瓶500mL?! ? 繼續(xù)煮沸10min,用濾紙過濾?! ? 加15%氫氧化鈉溶液約20mL。96 血清肉湯  在肉浸液肉湯()中按10∶1以無菌操作加馬(或羊、兔)血清即為血清肉湯。95 動(dòng)力-硝酸鹽培養(yǎng)基(B法) 成分:  蛋白胨            5g  牛肉膏            3g  銷酸鉀            5g  磷酸氫二鈉            半乳糖            5g  甘油             5g  瓊脂             3g  蒸餾水            1000mL  制法:將以上各成分混合,加熱溶解,校正pH。94 動(dòng)力硝酸鹽培養(yǎng)基(A法)成分:  蛋白胨            5g  牛肉膏            3g  硝酸鉀            1g  瓊脂             3g  蒸餾水            1000mL  制法:加熱溶解,校正pH。分裝試管,每管10mL,121℃高壓滅菌15min。臨用前隔水煮沸10min,以驅(qū)除培養(yǎng)基中溶解的氧氣,迅速冷卻。按比例加入后3種溶液,搖勻,傾注平板。分裝每瓶100mL,121C高壓滅菌15min。臨用時(shí)加熱溶化瓊脂,冷至50℃,每瓶內(nèi)加入50%葡萄糖水溶液2mL和50%卵黃鹽水懸液10~15mL,搖勻,傾注平板。制法:制備基礎(chǔ)培養(yǎng)基,分裝每瓶100mL。90 卵黃瓊脂培養(yǎng)基成分:  1 基礎(chǔ)培養(yǎng)基  肉浸液        1000mL  蛋白胨        15g  氯化鈉        5g  瓊脂         25~30g    2 50%葡萄糖水溶液?!! ? 碎肉渣經(jīng)水洗后晾至半干,分裝15mm150mm試管約2~3cm高,~。89 庖肉培養(yǎng)基成分:  牛肉浸液       1000mL  蛋白胨        30g  酵母膏        5g  磷酸二氫鈉      5g  葡萄糖        3g  可溶性淀粉      2g  碎肉渣適量  制法:  1 稱取新鮮除脂肪和筋膜的碎牛肉500g,加蒸餾水1000mL和1mol/L氫氧化鈉溶液25mL,攪拌煮沸15min,充分冷卻,除去表層脂肪,澄清,過濾,加水補(bǔ)足至1000mL。88 木糖-明膠培養(yǎng)基成分:  胰胨            10g  酵母膏           10g  木糖            10g  磷酸氫二鈉         5g  明膠            120g  蒸餾水           1000mL  %酚紅溶液        25mL  制法:將除酚紅以外的各成分混合,加熱溶解,校正pH。臨用時(shí)加熱溶化瓊脂,冷至50℃,傾注平板。87 酪蛋白瓊脂成分:  酪蛋白            10g  牛肉膏            3g  磷酸氫二鈉          2g  氯化鈉            5g  瓊脂             15g  蒸餾水            1000mL  %溴麝香草酚藍(lán)溶液       制法:將除指示劑外的各成分混合,加熱溶解(但酪蛋白不溶解),校正pH。86 %檸檬酸鈉溶液成分:  檸檬酸鈉           蒸餾水          100mL制法:,加蒸餾水到100mL,溶解后過濾,裝瓶,121℃高壓滅菌15min。分裝燒瓶,每瓶100mL,121℃高壓滅菌15min。84 匹克氏肉湯成分:  含1%胰蛋白胨的牛心浸液  200mL  1:25000結(jié)晶紫鹽水溶液  10mL  1:800三氮化鈉溶液    10mL  脫纖維兔血(或羊血)    10mL制法:將上述已滅菌的各種成分,用無菌手續(xù)依次混合,分裝于無菌試管內(nèi),每管約2mL,保存于冰箱內(nèi)備用。使用前在冰箱儲(chǔ)存不得超過48h。臨用時(shí)加熱溶化瓊脂,冷至50℃,每95mL加入預(yù)熱至50℃的卵黃亞蹄酸鉀增菌劑5mL,搖勻后傾注平板。冷至25℃,校正pH。6H2O)                5g  瓊脂                       20g  蒸餾水                      950mL  增菌劑的配法:30%卵黃鹽水50mL與除菌過濾的1%亞蹄酸鉀溶液10mL混合,保存于冰箱內(nèi)。81 胰酪胨大豆肉湯成分:  胰酪胨(或胰蛋白胨)                17g  植物蛋白胨(或大豆蛋白胨)             3g  氯化鈉                      100g  磷酸氫二鉀                      葡萄糖                        蒸餾水                      1000mL制法:將上述成分混合,加熱并輕輕攪拌并溶解,分裝后,121℃高壓滅菌15min,177。分裝試管,每管10mL,于4℃可保存10個(gè)月。80 氯化鎂孔雀綠肉湯成分:  1%胰胨水(高壓滅菌)                  156mL  1/15mo1/L磷酸氫二鈉(Na2HPO4)溶液(高壓滅菌)      40mL  40%(m/V)氯化鎂(MgCl2H2O)                    氯化鈉(NaCl)                          蒸餾水                             山梨醇                             膽鹽                             制法:將磷酸鹽及氯化鈉溶于蒸餾水中,再加入山梨醇及膽鹽,溶解后,分裝試管。在培養(yǎng)基表面出現(xiàn)云霧狀現(xiàn)象為陽性,胎兒彎曲菌空腸亞種為陽性結(jié)果。分裝13mm100mm試管,每支約4mL左右,121℃高壓滅菌15min,備用。  稱取維生素K11g和純乙醇99mL混合,或用維生素K1針劑?! ?%氯化血紅素溶液和1%維生素K1溶液配法:稱取氯化血紅素1g和1mol/L氫氧化鈉5mL混合?! ? 說明  將可疑空腸彎曲菌接種于平板上,在微氧環(huán)境下,于43℃培養(yǎng)48h。121℃高壓滅菌15min,備用。L-胱氨酸先用少量氫氧化鈉溶解后加入,然后加入預(yù)先配成的氯化血紅素和維生素K1,充分搖勻。77 TTC瓊脂成分:  胰蛋白胨(tryptone)            大豆胨                  葡萄糖                  氯化鈉                  硫乙醇酸鈉                瓊脂                   L-胱氨酸-鹽酸(L-Cys   多粘菌素B:僅限于對(duì)革蘭氏陰性菌,如對(duì)產(chǎn)氣桿菌、流感桿菌、痢疾桿菌等。 2 TMP、抗生素的作用  TMP(甲氧芐氨嘧啶,又稱磺胺增效劑或抗菌增效劑): 為廣譜抗菌劑,其抗菌譜與磺胺嘧啶相似,但對(duì)鏈球菌及大多數(shù)革蘭氏陰性菌的抗菌作用較磺胺嘧啶強(qiáng),與抗生素合用有協(xié)同作用,能增加殺菌和抑菌作用。說明:  1 TMP、抗生素混合液配法:先配成乳酸TMP溶液,以乳酸62mg(約1~2滴)混合于100mL滅菌蒸餾水中,然后再加入TMP溶液。每100mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,加入凍溶兩次的馬血7mL及TMP、搖勻,傾注無菌平板。此即血瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基。裝瓶100mL。 注:在該采樣管中的標(biāo)本,只能保存72h。121℃高壓滅菌15min。冷至50℃,加入氯化鈣溶液?! ∶?00mL滅菌溶化的DTA培養(yǎng)基加1mL(MG)染料液,%。用等體積氯仿作5~7次抽提,直到氯仿層無色為止。74 DNA酶甲基綠瓊脂(DTA)成分:  DNA            植物蛋白胨         胰蛋白胨          氯化鈉           瓊脂(%)         蒸餾水         1000mL          制法:稱取各成分后,加水徐徐加熱,避免形成餅溶性絲狀物,121℃ 15min高壓。上述B、C、D溶液均新鮮配制,用除菌濾膜過濾。73 快速硫化氫(H2S)試驗(yàn)瓊脂制法:  A液:布氏桿菌肉湯    970mL  無水磷酸氫二鈉       無水磷酸二氫鉀       瓊脂          2g  加熱溶解,高壓滅菌,121℃ 15min。分裝試管,裝量宜多些,以便得到比較高的底層。72 改良克氏雙糖成分:    蛋白胨        20g  牛肉膏        3g  酵母膏        3g  山梨醇        20g  葡萄糖        1g  氯化鈉        5g  檸檬酸鐵銨        硫代硫酸鈉        瓊脂         12g  酚紅           蒸餾水        1000mL  制法:將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中,校正pH。71 改良Y培養(yǎng)基成分:    蛋白胨           氯化鈉           乳糖            草酸鈉           去氧膽酸鈉         三號(hào)膽鹽          丙酮酸鈉          孟加拉紅        40mg  水解酪蛋白         瓊脂            蒸餾水         1000mL制法:將上述成分:混合,于121℃高壓滅菌15min,待冷至45℃左右時(shí),傾注平皿。待溶解后分裝試管。70 嗜鹽性試驗(yàn)培養(yǎng)基 成分:  蛋白胨       2g  氯化鈉       按不同量加  蒸餾水       100mL  制法:配制2%蛋白胨水,校正pH,共配制5瓶,每瓶100mL。 Irgasan   以95%的乙醇作溶劑,溶解二苯醚,%的溶液,待基礎(chǔ)液冷至80℃時(shí),加入1mL混勻。7H2O)               瓊脂                       蒸餾水                    950mL  177。H2O)         氯化鈉(NaCl)               三號(hào)膽鹽                 山梨醇                20g制法:將磷酸鹽及氯化鈉溶于蒸餾水中,再加入三號(hào)膽鹽及山梨醇,分裝試管,于121℃高壓滅菌15min,備用。%。66 氯化鈉血瓊脂成分:  酵母膏           3g  蛋白胨           10g  氯化鈉           70g  磷酸氫二鈉         5g  甘露醇           10g  結(jié)晶紫             瓊脂            15g  蒸餾水           1000mL制法:(不必高壓),待冷至45℃左右時(shí),加入新鮮人或兔血(5%~10%)混合均勻,傾注平皿。65 %氯化鈉三糖鐵瓊脂成分:  三糖鐵瓊脂         1000mL  氯化鈉           30g制法:按前面三糖鐵瓊脂,再加入氯化鈉30g,分裝試管,121℃高壓滅菌15min。加入瓊脂,加熱溶解。臨用前在100mL培養(yǎng)基內(nèi)加入蔗糖1g,加熱溶化并冷至50℃,傾注平板。加入指示劑,分裝燒瓶100m
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