培養(yǎng)基配方及配制方法(參考版)
2025-04-11 22:25本頁面
【正文】 注：在此培養(yǎng)基內(nèi)，大部分乳糖遲緩發(fā)酵的細菌可于1天內(nèi)發(fā)酵。 5％乳糖發(fā)酵管成分：蛋白胨：，氯化鈉：，乳糖：5g，2%溴麝香草酚藍水溶液：，蒸餾水：100ml。實驗方法：從瓊脂斜面上挑取小量培養(yǎng)物接種，于36℃177。其他各種糖發(fā)酵管可按上述成分配好后，分裝每瓶100ml，121℃滅菌15min，另將各種糖類配好10%溶液，一同滅菌，將5ml糖溶液加入到100ml液體培養(yǎng)基中，以無菌操作分裝小試管。 糖發(fā)酵管成分：牛肉膏：5g，蛋白胨：10g，氯化鈉：3g，十二水磷酸氫二鈉：2g，%溴麝香草酚藍溶液：12ml，蒸餾水：1000ml。1℃下培養(yǎng)1~2天，必要時可培養(yǎng)4~5天，輕搖試管，陽性者試劑層呈深紅色，或加入歐波試劑，沿管壁流下，覆蓋于培養(yǎng)液表面，陽性者接觸面上呈玫瑰紅色。歐波試劑：將1g對二氨基苯甲醛溶于90ml95%的乙醇內(nèi)，然后慢慢加入濃鹽酸20ml。 蛋白胨水（靛基質(zhì)試驗用）成分：蛋白胨或胰蛋白胨：20g，氯化鈉：5g，蒸餾水：1000ml，制法：將上述成飛混合均勻，分裝小管，121℃滅菌15min。1℃下培養(yǎng)18~24h，觀察結(jié)果，氨基酸脫羧酶陽性者由于產(chǎn)堿，培養(yǎng)基應呈紫色。115℃高壓滅菌10min。對照培養(yǎng)基不加氨基酸。制法：除氨基酸以外的所有成分加熱溶解后，分裝每瓶100ml，分別加入各種氨基酸：賴氨酸、精氨酸和鳥氨酸。夏天分裝培養(yǎng)基應在冰箱內(nèi)進行，實驗失敗的主要原因是封口不嚴，氰化鉀逐漸分解，變成氫氰酸氣體逸出，以致藥物濃度降低，細菌生長，造成假陽性現(xiàn)象。1℃下培養(yǎng)1~2天，觀察結(jié)果，如有細菌生長，則為陽性，經(jīng)2天后不生長則為陰性。制法：將除氰化鉀以外的成分配好分裝，121℃滅菌15min，放在冰箱內(nèi)使其充分冷卻，%（最后濃度為1:10000），分裝于12mm100mm滅菌試管，每管約4ml，立刻用橡皮塞塞緊，
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