細胞培養(yǎng)常見問題及回答(參考版)
2025-06-10 22:12本頁面
【正文】 為了避免這一問題，加入一些蛋白酶抑制劑或加入少量的血清（少于1％），讓血清給蛋白酶提供作用底物。在加有血清的培養(yǎng)基中，這些蛋白酶將作用到血清中的蛋白，從而使目的蛋白產(chǎn)品保持完好。LIPOFECTAMlNE 2000的操作步驟允許在一個很小的體積下混合DNA和脂質(zhì)體，接下來可以不需要換培養(yǎng)基的情況下直接加入。（注意以上是35mm培養(yǎng)皿使用體積）。確保復合物在沒有血清的情況下形成?；旌蟽煞N溶液在室溫下孵育15分鐘。 lipidDNA的方法會影響轉(zhuǎn)染效率嗎？ 是的。建議胰蛋白酶處理細胞前，用EDTA清洗細胞，以消除來自培養(yǎng)基中所有的二價離子。 Certified 胎牛血清有什么差別?Certified 胎牛血清包括了Qualified 胎牛血清執(zhí)行的所有的標準檢驗程序，而且除了這些標準檢測，Certified胎牛血清還有如下一些附加的檢測：EndPoint Determination of Endotoxin Content噬菌體檢驗生物化學檢測 激素的檢測血紅蛋白檢測Sf9 細胞生長促進及方法學檢測？使用胰蛋白酶時加入EDTA的目的是什么？ 二價離子的確抑制胰蛋白酶活性。如果僅僅是清洗將要在細胞培養(yǎng)基中儲存的組織，用Hanks液就可以了。Eagles液在空氣水平的CO2 中，溶液會變堿，Hanks液在CO2培養(yǎng)箱中會變酸。原因是什么？Hank’s 平衡鹽溶液（HBS）和Earle’s平衡鹽溶液（EBS）有什么本質(zhì)的功能差別？ HBS和 EBS 的主要差別在于碳酸氫鈉的水平，碳酸氫鈉的含量在Eagles ()中比在Hanks () 中高。這應該不會影響血清的質(zhì)量。？ 丙酮酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源。7 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4－6代，確定污染是否以已被消除。5 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞一代。3 每天觀測細胞毒性指標，如脫落，出現(xiàn)空泡，匯合度下降和變圓。在一個濃度梯度范圍內(nèi)，把選擇抗生素加入到每一個孔中。1 在無抗生素的培養(yǎng)基中消化、計數(shù)和稀釋細胞，稀釋到常規(guī)細胞傳代的濃度。這點在使用抗生素如兩性霉素B和抗霉菌素如泰樂菌素時尤其重要。首先，確定污染物是細菌、真菌、支原體或酵母，把污染細胞與其它細胞系隔離開，用實驗室
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