【正文】 近年來(lái)，這種方法得到很廣泛的應(yīng)用。mol－ 1由于膠束與顯色產(chǎn)物的相互作用，結(jié)合成膠束化合物，增大了顯色分子的有效吸光截面，增強(qiáng)其吸光截面，增強(qiáng)其吸光能力，使 ε增大，提高顯色反應(yīng)的靈敏度，稱為膠束的增敏效應(yīng)。體系由真溶液轉(zhuǎn)變?yōu)槟z束溶液時(shí)，表面活性劑的濃度稱為臨界膠束濃度，常用 cmc表示。膠束強(qiáng)度分光光度法是利用表面活性劑的增強(qiáng)、增敏、增穩(wěn)、褪色、析向等作用，以提高顯色反應(yīng)的靈敏度、對(duì)比度或選擇性，改善顯色反應(yīng)條件，并在水向中直接進(jìn)行光度測(cè)量的分光光度法。膠束增溶分光光度法 測(cè)定 Cc的方法常有 :① .固定時(shí)間法； ② .固定濃度法； ③ .斜率法三種。由反應(yīng)速度方程式及吸收定律方程式可以推導(dǎo)出動(dòng)力學(xué)分光光度法的基本關(guān)系為 根據(jù)催化劑的存在與否，動(dòng)力學(xué)分光光度法可分為非催化和催化分光光度法。一般的分光光度法是在溶液中發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)達(dá)到平衡后測(cè)量吸光度，然后根據(jù)吸收定律算出待測(cè)物資的含量。其它分析方法：簡(jiǎn)單介紹動(dòng)力學(xué)分光光度法及膠束分光光度法動(dòng)力學(xué)分光光度法 導(dǎo)數(shù)分光光度法對(duì)痕量分析、稀土元素、藥物、氨基酸、蛋白質(zhì)的測(cè)定，以及廢氣或空氣中污染氣體的測(cè)定非常有用。導(dǎo)數(shù)分光光度法對(duì)吸收強(qiáng)度隨波長(zhǎng)的變化非常敏感，靈敏度高。峰零法測(cè)量峰至基線的垂直距離 z?；€法又稱切線法 ,在相鄰兩峰的極大或極小處畫(huà)一公切線，在由峰谷引一條平行于縱坐標(biāo)的直線相交于 a點(diǎn)，然后測(cè)量距離他 t的大小的。在一定條件下，導(dǎo)數(shù)信號(hào)與被測(cè)組分的濃度成比例。 測(cè)定波長(zhǎng)選擇在吸收峰處，其曲率 d2ε/dλ2最大，靈敏度就高。 如圖 對(duì)波長(zhǎng) λ求導(dǎo) :將 不同的實(shí)驗(yàn)方法包括雙波長(zhǎng)法、電子微分法和數(shù)值微分法。導(dǎo)數(shù)分光光度法、調(diào)節(jié)放大器，使之滿足得到系數(shù)倍率 K為 ?差示信號(hào) S與待測(cè)組分 B的濃度 CB成正比，與干擾組分 A無(wú)關(guān)，即消除了 A的干擾。、 、 情況下，可采用系數(shù)倍率法測(cè)定 B組分，并采用雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)來(lái)完成。② .系數(shù)倍率法當(dāng)干擾組分 A的吸收光譜曲線不呈峰狀，僅是陡坡?tīng)顣r(shí)，不存在兩個(gè)波長(zhǎng)處的等吸收點(diǎn)時(shí)，如圖所示。它可以進(jìn)行一組分在其它組分干擾下，測(cè)定該組分的含量，也可以同時(shí)測(cè)定兩組分的含量。雙波長(zhǎng)分光光度法用計(jì)算機(jī)處理測(cè)定結(jié)果將使運(yùn)算大為方便。顯然，如果有 n個(gè)組分的光譜互相干擾，就必須在 n個(gè)波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸光度的加和值，然后解 n元一次方程以求出各組分的濃度。然后列出聯(lián)立方程 :、 、 和 ③ .(c)情況表明兩組分彼此互相干擾，此時(shí)，在 λ λ2處分別測(cè)定溶液的吸光度 和 ① ． (a)情況表明兩 組 分互不干 擾 ，可以用 測(cè) 定 單組 分的方法分 別 在 λ λ 2測(cè) 定 A、 B兩 組 分；② ． (b)情況表明 A組 分 對(duì) B組 分的 測(cè) 定有干 擾 ，而 B組 分對(duì) A組 分的 測(cè) 定無(wú)干 擾 ， 則 可以在 λ 1處單 獨(dú) 測(cè) 量 A組 分，求得 A組 分的 濃 度 CA。假設(shè)要測(cè)定試樣中的兩個(gè)組分 A、 B，如果分別繪制 A、 B兩純物資的吸收光譜，繪出三種情況，如圖 。2.在相同條件下測(cè)定試樣溶液的吸光度，從校正曲線上找出與之對(duì)應(yīng)的未知組分的濃度。② ．標(biāo)準(zhǔn)曲線法這是實(shí)際分析工作中最常用的一種方法。一般有標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法和標(biāo)準(zhǔn)曲線法兩種。紫外－可見(jiàn)分光光度法定量分析的方法常見(jiàn)到的有如下幾種： 飽和或雙鍵不共軛 〈210nm；兩個(gè)共軛雙鍵： ~220nm；三個(gè)共軛雙鍵： ~270nm；四個(gè)共軛雙鍵： ~310nm。如果測(cè)的樣品溶液的 lgε〈 ，則說(shuō)明含有雜質(zhì)。例 3．檢查菲的純度。二硫化碳在 318nm處有吸收峰。苯在 256nm處有 B吸收帶，而甲醇或乙醇在此波長(zhǎng)附近幾乎沒(méi)有吸收。純度檢查1．如果一個(gè)化合物在紫外區(qū)沒(méi)有吸收峰，而其中的雜質(zhì)有較強(qiáng)的吸收，就可方便的檢該化合物中是否含有微量的雜質(zhì)。而像乙烷這樣的非極性溶劑中，由于形成分子內(nèi)的氫鍵，且形成共軛體系，使能量降低以達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)，所以烯醇式異構(gòu)體比率上升 :此外，紫外－可見(jiàn)分光光度法還可以判斷某些化合物的構(gòu)象 (如取代基是平伏鍵還是直立鍵 )及旋光異構(gòu)體等?？赡芘c H2O形成氫鍵而降低能量以達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)，所以酮式異構(gòu)體占優(yōu)勢(shì) :在像水這樣的極性溶劑中，由于 例如乙酰乙酸乙酯就是和烯醇式兩種互變異構(gòu)體：它們的吸收特性不同：酮式異構(gòu)體： π－ π*躍遷： λmax=204nm， εmax小；烯醇式異構(gòu)體（雙鍵共軛）： π－ π*躍遷： λmax=245nm，εmax=18000。某些有機(jī)化合物在溶液中可能有兩種以上的互變異構(gòu)體處于動(dòng)態(tài)平衡中，這種異構(gòu)體的互變過(guò)程常伴隨有雙鍵的移動(dòng)及共軛體系的變化，因此也產(chǎn)生吸收光譜的變化。② .互變異構(gòu)體的判斷一般來(lái)說(shuō)，異環(huán)二烯的吸收帶強(qiáng)度總是比同環(huán)二烯來(lái)的大。εmax大 εmax=10500（ 空間位 阻 ，影響共平面 ）反式： λmax=295又如， 1,2二苯乙烯順式： λmax=280nm； λ max＝ 280nm ， ε max =13500因此反式都大于 順 式異構(gòu)體。 ① .順 反異構(gòu)體的判斷生色 團(tuán) 和助色 團(tuán)處 在同一平面上 時(shí) ，才 產(chǎn) 生最大的共 軛 效 應(yīng) 。2. 異構(gòu)體的判斷包括 順 反異構(gòu)及互 變 異構(gòu)兩種情況的判斷。nmd．若 270~350c．若 260～ 350nm區(qū)域有很強(qiáng)的吸收帶，則可能有3~5個(gè)雙鍵的共軛體系，如癸五烯有五個(gè)共軛雙鍵，λmax為 335nm， εmax為 118,000。nm）； a,β不飽和醛酮： K帶 ~230104），表明可能含有兩個(gè)雙鍵的共軛體系（ K帶）。b．如果在 210~250推測(cè)化合物所含的官能團(tuán)有機(jī)物的不少基團(tuán) (生色團(tuán) )，如羰基、苯環(huán)、硝基、共軛體系等，都有其特征的紫外或可見(jiàn)吸收帶，紫外－可見(jiàn)分光光度法在判別這些基團(tuán)時(shí)，有時(shí)是十分有用的。 計(jì)算時(shí)，先從未知物的母體對(duì)照表得到一個(gè)最大吸收的基數(shù)，然后對(duì)連接在母體中 π電子體系 (即共軛體系 )上的各種取代基以及其他結(jié)構(gòu)因素按上所列的數(shù)值加以修正，得到該化合物的最大吸收波長(zhǎng) λmax。它是計(jì)算共軛二烯、多烯烴及共軛烯酮類化合物 π—π* 躍遷最大吸收波長(zhǎng)的經(jīng)驗(yàn)規(guī)則， 參閱參考書(shū) [1]~[當(dāng)采用其它物理或化學(xué)方法推測(cè)未知化合物有幾種可能結(jié)構(gòu)后，可用經(jīng)驗(yàn)規(guī)則計(jì)算它們最大吸收波長(zhǎng)，然后再與實(shí)測(cè)值進(jìn)行比較，以確認(rèn)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)。 計(jì)算不飽和有機(jī)化合物最大吸收波長(zhǎng)的經(jīng)驗(yàn)規(guī)則Data”。Electronic[4]Compounds.”,NewofSpectraVisibleUltravioletHirayama： “Handbook[3]本書(shū)收集了 597種芳香化合物的紫外光譜。York,AromaticSpectraVisible,“Ultraviolet薩特勒標(biāo)準(zhǔn)圖譜庫(kù)，共收集了 46000種化合物的紫外光譜。Standard常用的標(biāo)準(zhǔn)譜圖有以下表中的四種：[1]② . 這樣 如果未知物與 標(biāo) 準(zhǔn)物的 濃 度不同， 則 曲 線 只是沿 lgA軸 平移，而不是象 A~λ 曲 線那 樣 以 εb 的比例移 動(dòng) ，更便于比 較 分析。 為 了能使分析更準(zhǔn)確可靠，要注意如下幾點(diǎn)： 譜 的精 細(xì)結(jié) 構(gòu)。比較法有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)比較法和標(biāo)準(zhǔn)譜圖比較