【正文】 以標(biāo)記的探針直接同中期染色體進(jìn)行原位雜交。 人－鼠雜種細(xì)胞株編碼 人類 染色體號碼 A B C D E F G 1 + － － － + － － 2 － － + － － － + 3 + － + － － + － 4 － + － － － + － 5 － － － + － － + 人類基因編碼的酶 葡萄糖磷酸變位酶－1 + － － － + － － 異檸檬酸脫氫酶 － － + － － － + 肽酶 C + － － － + － － 蘋果酸氧化還原酶 － － + － － － + 磷酸葡糖酸脫氫酶 + － － － + － － 核苷磷酸化酶 － － － － － － － （三）基因劑量效應(yīng)法 ? 如果某一個基因產(chǎn)物的數(shù)量與某染色體上某一片段拷貝數(shù)有明顯的比例變化關(guān)系，則可將該基因定位在這已染色體上或染色體的某一特定區(qū)段上。（克隆分布板定位法） ? （ 3）區(qū)域定位：應(yīng)用一系列有染色體重組的特殊克隆重把特定基因定位到染色體上的某一區(qū)域。 ? （ 2）同線測定：利用人體染色體和標(biāo)記基因的蛋白質(zhì)產(chǎn)物是否同時存在于雜種細(xì)胞來定位基因。因而可用于人類染色體識別，追循染色體丟失過程 。這些分帶的位置、寬狹和濃淡等隨染色體號碼的不同而不同。 只出現(xiàn)在男性：基因定位在 Y染色體上 X連鎖基因的定位 根據(jù)伴性遺傳特點(diǎn) ： 母親的基因型是否為雙雜合體 ，而母親的 X染色體上的基因組成，可以由外祖父（母親的父親）的表型得知。 ? 70%單拷貝，只有 10%轉(zhuǎn)錄為 mRNA，約24萬個基因 ? 30%重復(fù)序列。 ? 基因定位法包括 ： ? （ 1）基因所在的染色體 （ 2）染色體圖距。開始應(yīng)用傳統(tǒng)的家系分析方法進(jìn)展緩慢，到 1969年為止，能確定的連鎖群數(shù)目只有 7個。 第三節(jié) 人類基因組的染色體作圖 ? 人類的家庭成員少，世代長，又不能按計(jì)劃進(jìn)行婚配，所以人類基因定位難度較大。（ 隨機(jī)的） 染色單體干擾 : ? 如果跟上面的比例有偏差，我們認(rèn)為有染色單體干擾。如第二個交換發(fā)生在任意兩個非姊妹染色單體間的機(jī)會是相等的。 為什么 ? 四、染色單體干涉（ chromatid interference） 一對同源染色體 4條染色單體參與多線交換機(jī)會的非隨機(jī)性。例如子囊型 4，對于 +/ ade來講是屬于 M1，但我們決定了基因順序后，得知這些子囊中發(fā)生了雙交換，可是在計(jì)算 ade— 著絲粒重組值時，卻沒有把這兩次單交換計(jì)算在內(nèi)，因而使 ade— 著絲粒重組值的估計(jì)偏低。 O ade圖距 = 判定兩基因在染色體的同臂還是異臂上： +/nic +/ade 子囊數(shù) M1 M1 M2 M2 M1 M2 M1 M2 809 90 5 96 1000 經(jīng)分析，證明nic、 ade在著絲粒同一側(cè)。 ? 計(jì)算著絲粒和兩基因間的 RF： RF（ 0nic)=(MⅡ 1/2) / (MⅠ +MⅡ ) 100%=1/2 (5+90+1+5)/1000 100%=%。 包括（ 3），（ 4），（ 7） 。 包括（ 2），（ 6） 。 包括（ 1），（ 5） 。 （ 6） 1 2 2=4。 （ 3） 2 2 2=8。 子囊型 （ 1） （ 2） （ 3） （ 4） （ 5） （ 6） （ 7） 基因型次序 + ade + ade nic + nic + 2 + + + + nic ade nic ade 2 + + + ade nic + nic ade 8 + ade nic ade + + nic + 8 + ade nic + + ade nic + 4 + + nic ade + + nic ade 4 + + nic ade + ade nic + 8 7種基本子囊 中，每一種必包函的排列種類 ? （ 1） 2 1 1=2。 因?yàn)槲覀兏信d趣的只是第一、二次減數(shù)分裂的分離及基因之間的重組，而與分離的方向無關(guān)。因此，交換值（重組率 RF）的計(jì)算公式為： RF 0lys = (9+5+10+16) 1/2 / (105+129+ 9+5+10+16) 100% =% ? 即著絲粒與 lys 間的距離為 三、鏈飽霉的連鎖 ? 兩對基因的重組： ? 利用兩個不同交配型進(jìn)行雜交 ? nic ＋ ＋ ade ? nic（ nicotinic acid）為菸（煙）酸依賴型， ? ade（ adenine）腺嘌呤依賴型。 ? 著絲粒與基因位點(diǎn)間發(fā)生非姊妹染色單體交換，因此這四種子囊均為 交換型子囊 。 ? 著絲粒和 lys基因位點(diǎn)間不發(fā)生非姊妹染色單體交換，因此這兩種子囊類型就是 非交換型子囊 。 ? 用 不同接合型 的 lys+和lys雜交，可預(yù)期八個孢子中 lys+和 lys呈 4:4的比例，事實(shí)也是如此。下 圖 ? 若發(fā)生了交換，稱第二次分裂分離 （ seconddivision segregation)或稱 M2模式分離。 二、著絲粒作圖（ centromere mapping） 利用四分子分析法，測定基因與著絲粒間的距離。 ? （ 3）可以檢驗(yàn)染色單體的交換是否有干涉現(xiàn)象，還可利用它來進(jìn)行基因轉(zhuǎn)變的研究。 ? 優(yōu)點(diǎn)： （ 1）可以把著絲粒作為一個座位（ locus）計(jì)算某個基因與著絲粒的重組率，即著絲粒作圖。 （ 2）減數(shù)分裂的 4個產(chǎn)物，呈現(xiàn)有規(guī)律的排列。 一、鏈孢霉的生活史 ? 無性世代 ：菌絲體 → 分生孢子 — 菌絲體。 第六節(jié) 真菌類的遺傳學(xué)分析 ? 粗糙鏈孢霉屬于真菌類中的子囊菌，它是遺傳分析的好材料，它既有高等生物減數(shù)分裂的特點(diǎn)，又有低等生物的特點(diǎn)： ? 易于繁殖、培養(yǎng)、管理； ? 可直接觀察基因表現(xiàn)，無需測交； ? 可獲得、分析單次減數(shù)分裂的結(jié)果；等。 ? （ 2）把某種生物每個連鎖群基因之間的連鎖關(guān)系研究清楚了，同時又把不同的連鎖群落實(shí)到具體的染色體上，就可以繪出這一生物的遺傳學(xué)圖（通過染色體突變的研究可以把不同的連鎖群落實(shí)到具體的染色體上）。有 24個連鎖群。 ? 1）一定生物所具有的連鎖群數(shù)應(yīng)該等于它的單倍體數(shù)。 ? 在此函數(shù)中，假設(shè)沒有干涉，這只是對較大的染色體圖距是有效的。（ 隨機(jī)的） 三、利用作圖函數(shù)計(jì)算大圖距 ? 重組值和實(shí)際圖距的關(guān)系反應(yīng)了重組值和交換值之間的關(guān)系。如第二個交換發(fā)生在任意兩個非姊妹染色單體間的機(jī)會是相等的。 染色單體干涉 （ chromatid interference） ? 是指一對同源染色體的 4條染色單體參與多線交換機(jī)會的非隨機(jī)性。 ? 并發(fā)系數(shù)經(jīng)常變動在01之間。 ? 為了度量兩次交換間相互影響的程度，提出了 并發(fā)系數(shù) 的概念。 ? 這種現(xiàn)象稱為 干擾(interference)