dna的生物合成ppt課件(參考版)
2025-05-04 23:16本頁(yè)面
【正文】 9. 如何保持 DNA復(fù)制的高保真？ 。 復(fù)習(xí)思考題： 1. 概念 （ 1）中心法則 （ 2）復(fù)制 （ 3）復(fù)制子 （ 4） DNA的半保留復(fù)制 （ 5）半不連續(xù)性復(fù)制 （ 6）岡崎片段 （ 7）端粒酶 （ 8）逆轉(zhuǎn)錄 （ 9）突變 2. 如何用實(shí)驗(yàn)證明 DNA的半保留復(fù)制？ 3. 參與 DNA復(fù)制的酶類有哪些？各有何作用？ 4. 原核生物和真核生物的 DNA聚合酶有何區(qū) 別？ 5. 簡(jiǎn)述 DNA復(fù)制的體系。 通過(guò) SOS修復(fù) ， 復(fù)制如能繼續(xù) ， 細(xì)胞是可存活的 。 ?在 E. coli， 各種與修復(fù)有關(guān)的基因 ， 組成一個(gè)稱為調(diào)節(jié)子 (regulon)的網(wǎng)絡(luò)式調(diào)控系統(tǒng) 。 ? 錯(cuò)配修復(fù) (mismatch repair) ? 直接修復(fù) (direct repair) ? 光修復(fù) (light repairing) ? 切除修復(fù) (excision repairing) ? 重組修復(fù) (rebination repairing) ? SOS修復(fù) ? 修復(fù)的主要類型： 一、光修復(fù) 光修復(fù)酶(photolyase) 嘧啶二聚體 TT UvrA UvrB UvrC OH P DNA聚合酶 Ⅰ OH P （二）切除修復(fù) 是細(xì)胞內(nèi)最重要和有效的修復(fù)機(jī)制，主要由 DNApolⅠ 和連接酶完成。 ?缺失或插入都可導(dǎo)致 框移突變 。 1. 轉(zhuǎn)換 發(fā)生在異型堿基之間，即嘌呤變嘧啶或嘧啶變嘌呤。 DNA突變（ DNA損傷， DNA Damage）： 具體指 dNMP殘基以至 DNA片段在構(gòu)成、復(fù)制或者表型功能的異常變化。 ?? 5? 3? 3? 5? dNTP DNApol γ ? D環(huán)復(fù)制 (Dloop replication) 是線粒體 DNA (mitochondrial DNA， mtDNA)的復(fù)制形式。 3?OH 5?P 5? 5? 5? 3? 3? 3? 3? 539。 ?對(duì)逆轉(zhuǎn)錄病毒的研究 (前病毒整合 )，拓寬了 20世紀(jì)初已注意到的病毒致癌理論。 試管內(nèi)合成 cDNA cDNA ?plementary DNA? 二、逆轉(zhuǎn)錄研究的意義 ?逆轉(zhuǎn)錄酶和逆轉(zhuǎn)錄現(xiàn)象，是分子生物學(xué)研究中的重大發(fā)現(xiàn)， 發(fā)展了中心法則 。 逆轉(zhuǎn)錄 和其他復(fù)制方式 Reverse Transcription and Other DNA Replication Ways 第四節(jié) 逆轉(zhuǎn)錄 酶 一、逆轉(zhuǎn)錄病毒和逆轉(zhuǎn)錄酶 逆轉(zhuǎn)錄 (reverse transcription)概念： 以 RNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化 下，合成 DNA的過(guò)程 ?逆轉(zhuǎn)錄酶 (reverse transcriptase) RNA 模板 逆轉(zhuǎn)錄酶 DNARNA 雜化雙鏈 逆轉(zhuǎn)錄酶 單鏈 DNA 逆轉(zhuǎn)錄酶 雙鏈 DNA 逆轉(zhuǎn)錄病毒細(xì)胞內(nèi)的逆轉(zhuǎn)錄現(xiàn)象 逆轉(zhuǎn)錄酶功能： 以 RNA為模板合成 DNA 核糖核酸酶 以 DNA為模板合成 DNA 逆轉(zhuǎn)錄酶 A AA A T T T T AAAA SI核酸酶 DNA聚合酶 Ⅰ 堿水解 T T T T 分子生物學(xué)研究可應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄酶作為獲取基因工程目的基因的重要方法之一，此法稱為 cDNA法。原因可能是人體端粒酶的活性低。 3. 老年人的端粒 DNA長(zhǎng)度明顯短于年輕人。 2. 細(xì)胞每分裂一次，端粒 DNA序列丟失約 50bp～200bp，說(shuō)明端粒 DNA序列的縮短與細(xì)胞增殖有關(guān)。 ?末端 DNA序列是多次重復(fù)的富含 G、 C堿基的短序列。 ? 切除引物的兩種機(jī)制 端粒 (telomere) 指真核生物染色體線性 DNA分子末端的結(jié)構(gòu)。 ? 復(fù)制中岡崎片段的連接，復(fù)制子之間的連接。 然后由 PCNA協(xié)同 ， pol δ臵換pol α， 繼續(xù)合成 DNA子鏈 。 在復(fù)制叉及引物生成后 ， DNApol δ通過(guò)PCNA的協(xié)同作用 ， 逐步取代 pol α， 在 RNA引物的 3?OH基礎(chǔ)上連續(xù)合成領(lǐng)頭鏈 。 還需拓?fù)涿负蛷?fù)制因子 (replication factor, RF)。 復(fù)制有時(shí)序性 ， 即復(fù)制子以分組方式激活而不是 同步起動(dòng) 。 ? 蛋白激酶通過(guò)磷酸化激活或抑制各種復(fù)制因子而實(shí)施調(diào)控作用。 ori ter 82 32 ori ter SV40 50 0 （三）復(fù)制的終止： 1. 引物 RNA的切除 2. 空缺的填補(bǔ) 3. 切口連接： DNA大分子的形成 5? 5? 5? DNApol Ⅰ OH P 5? DNApol Ⅰ dNTP 5? 5? P ATP ADP+Pi 5? 5? DNA連接酶 ? 隨從鏈上不連續(xù)性片段的連接 哺乳動(dòng)物的細(xì)胞周期 DNA合成期 G1 G2 S M 二、真核生物的 DNA生物合成 ? 細(xì)胞能否分裂，決定于進(jìn)入 S期及 M期這兩個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)。
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