生物化學(xué)核酸ppt課件(2)(參考版)
2025-05-04 13:29本頁面
【正文】 ? 核酸的雜交在分子生物學(xué)和遺傳學(xué)的研究中具有重要意義。 退火溫度＝ Tm－ 25℃ ? 復(fù)性影響因素 片段濃度 /片段大小 /片段復(fù)雜性（重復(fù)序列數(shù)目） / 溶液離子強度 ? DNA單鏈與在某些區(qū)域有互補序列的異源 DNA單鏈或 RNA鏈形成雙螺旋結(jié)構(gòu)的過程。 ? 將熱變性的 DNA驟然冷卻至低溫時， DNA不可能復(fù)性。因而測定 Tm值，可反映 DNA分子中 G, C含量，可通過經(jīng)驗公式計算：（ G+C)%=() 2. 熱變性和 Tm 3. 核酸的復(fù)性 ? 變性核酸的互補鏈在適當(dāng)?shù)臈l件下，重新締合成為雙螺旋結(jié)構(gòu)的過程稱為 復(fù)性 。 DNA的 Tm值與分子中的 G和 C的含量有關(guān)。因此，通常將紫外吸收的增加量達(dá)最大量一半時的溫度稱熔解溫度，用 Tm表示。核酸的的一級結(jié)構(gòu) (堿基順序 )保持不變?？辜羟辛Σ睿? ?可用電泳或離子交換（色譜）進行分離 ?室溫條件下， DNA在堿中變性，但不水解， RNA水解 ?加熱條件下， D－核糖＋濃鹽酸＋苔黑酚 綠色 D－ 2－脫氧核糖＋酸＋二苯胺 藍(lán)紫色 二、核酸的紫外吸收特性 ? 在核酸分子中，由于嘌呤堿和嘧啶堿具有共軛雙鍵體系，因而具有獨特的紫外線吸收光譜，一般在 260nm左右有最大吸收峰，可以作為核酸及其組份定性和定量測定的依據(jù)。 tRNA的三級結(jié)構(gòu) 三、 rRNA 占 RNA總量的 80％ 原核生物 真核生物 核糖體 rRNA 核糖體 rRNA 30s 70s 50s 16s 5s 、 23s 40s 80s 50s 18s 5s、 、 28s 四、 mRNA和 hnRNA 占細(xì)胞總 RNA的 3％～ 5％ ? 真核細(xì)胞 mRNA的 3‘ 末端有一段長達(dá) 200個核苷酸左右的聚腺苷酸 (polyA)， 稱為 “ 尾結(jié)構(gòu) ” ， 5’ 末端有一個甲基化的鳥苷酸，稱為 ” 帽結(jié)構(gòu) “ 。 ?339。 雙螺旋穩(wěn)定的力 氫鍵 堿基堆積力（疏水相互作用及范德華力） 離子鍵等 則 DNA變性劑（熱、 pH、脲 /酰胺、有機溶劑） DNA的存在形式 二、 DNA的三級結(jié)構(gòu) ? DNA雙螺旋的進一步扭曲構(gòu)成三級結(jié)構(gòu)， 負(fù)超螺旋 原核 雙鏈環(huán)狀 DNA（ dcDNA） 病毒 單鏈環(huán)狀 DNA（ scDNA） 單鏈線性 DNA（ ssDNA） 真核 雙鏈線性 DNA（ dsDNA） 第四節(jié) RNA的結(jié)構(gòu)與功能 一、結(jié)構(gòu)特點 1. 堿基組成 A、 G、 C、 U （ A＝ U/G≡C） 稀有堿基較多，穩(wěn)定性較差，易水解 2. 多為單鏈結(jié)構(gòu)，少數(shù)局部形成螺旋 3. 分子較小 4. 分類 ? mRNA（ hnRNA 核不均一 RNA） ? tRNA
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1