【正文】 構(gòu)建物理圖譜所用的標(biāo)志為RFLP、順序標(biāo)簽位點（ sequence tag site,STS）或表達(dá)序列標(biāo)簽位點（ expressed sequence tags, ESTs）。 遺傳多態(tài)性標(biāo)志已由第一代的限制性片段長度多態(tài)性（ RFLP）、數(shù)目可變的串聯(lián)重復(fù)序列（ VNTR），第二代的簡單串聯(lián)重復(fù)序列（ STR）發(fā)展到第三代的單核苷酸多態(tài)性（ SNP），分辨率達(dá) 。常用的染色方法如： Gimsa染色等。 2. 85℃ 變性 32P標(biāo)記或熒光標(biāo)記的探針雜交 ，確定雜交與染色體的關(guān)系 2022/5/28 安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 84 熒光原位分子雜交 2022/5/28 安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 85 分子標(biāo)記 （如抗病與感?。╇s交的后代群體， F F BC BC2 的 DNA ，找到與抗病聯(lián)系的分子標(biāo)記 定該基因的位置。檢測某基因 細(xì)胞克隆 1 2 3 4 5 6 7 8 A + + + + B + + + + C + + + + 可由此表確定該基因在哪一條染色體。 通過外祖父法，可以確定母親雙重雜合體是哪一種類型。 母親是雙重雜合體時，有兩種類型； 順式相（ cis phase） ——突變基因和野生型基因分別在兩條 X染色體上。 如果某性狀呈 “ 男 男 ”式傳遞，可確定該基因與 X染色體連鎖。 2022/5/28 安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 77 人類基因組的染色體作圖 家系分析法 細(xì)胞學(xué)與劑量效應(yīng)法 體細(xì)胞雜交法 原位分子雜交 分子標(biāo)記 2022/5/28 安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 78 家系分析法 根據(jù)甲臏綜合征與 ABO血型的平行關(guān)系確定與ABO的連鎖，簡單計算重組率。 著絲粒與 lys基因間的重組值： 重組孢子數(shù) 交換型子囊數(shù) 8 1/2 總數(shù) （交換型 +非交換型） 8 去掉 %后作為著絲粒與基因間的圖距 100% 2022/5/28 安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 74 粗糙鏈孢霉的連鎖 粗糙鏈孢霉 nic+和 +ade雜交 將產(chǎn)生 36種子囊型，根據(jù)基因型和兩對基因各自分開的時間分為 7種基本子囊型。 2022/5/28 安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 67 粗糙鏈孢霉的 減數(shù)分裂 2022/5/28 安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 68 著絲粒作圖 centromere mapping 利用四分子分析法，測定基因與著絲粒間的距離稱為 著絲粒作圖 。用“厘摩”表示， cM 作圖原則：以不存在雙交換的一對基因的重組值作圖，再向兩邊找另外的基因。 基因定位 gene mapping:根據(jù)重組值確定不同基因在染色體上相對位置和排列順序的過程。 2022/5/28 安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 62 并發(fā)率與干涉 當(dāng) 0 ＜ C ＜ 1 0 ＜ I ＜ 1 正干涉 C = 0 I = 1 完全干涉 C＞ 1 I ＜ 0 負(fù)干涉 C = 1 I = 0 無干涉 交換促進(jìn)交換 2022/5/28 安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 63 遺傳學(xué)圖 Geic map 遺傳學(xué)圖 ： 根據(jù)基因直線排列定律，把位于同一連鎖群上的基因按相對位置作成連鎖圖。 親組合型： ab+， + + c 雙交換型： abc ， + + + c 位于中間 a—c—b 2022/5/28 安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 61 并發(fā)率和干涉 干涉 interference：每發(fā)生一次單交換時，其鄰近也發(fā)生一次交換的機會要減少一些的現(xiàn)象。 三點試驗測交的 8種后代中，個體數(shù)最少的 2種是雙交換的產(chǎn)物，數(shù)目最多的是親本型。 a b c + + + 2022/5/28 安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 57 三點測交的實例 果蠅， a、 b、 c為 X連鎖基因。 ③ 得到雙交換的資料 2022/5/28 安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 55 ABC/ABC abc/abc ABC/abc abc/ abc ABC/ abc ABc/ abc abc/abc AbC/ abc aBC/ abc Abc/ abc abC/ abc aBc/ abc AB重組率 = (AbC+Abc+aBC+aBc)/ all BC重組率 = (BcA+BcA+cBA+cBa)/ all AC重組率 = (AcB+Acb+aCB+aCb)/ all 2022/5/28 安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 56 雙交換 兩個基因間發(fā)生兩次交換。 ： ①一次試驗等于三次兩點試驗。 2022/5/28 安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 53 三點測交 threepoint test cross 1911年， Mon 提出： 重組值可能是由基因在染色體上的位置決定的。只要我們在染色體上發(fā)現(xiàn)的突變愈多，由交換而產(chǎn)生的重組類型的數(shù)量也愈大。 2022/5/28 安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 52 三大遺傳定律的關(guān)系 1. 分離定律是自由組合定律和連鎖交換定律的基礎(chǔ)； 2. 自由組合定律和連鎖交換定律是生物體遺傳性狀發(fā)生變異的主要機制； 3. 自由組合與連鎖交換的區(qū)別在于：自由組合是染色體間重組 (interchromosomal rebination)，而交換則是染色體內(nèi)重組 (intrachromosomal rebiation)。 Man等在 1914年就發(fā)現(xiàn)果蠅有 4個連鎖群，到 1967年測定了至少 1000個基因都分別屬于這 4個連鎖群。 果蠅：♂黑體紅眼 ♀ 灰體紫眼 bbRR BBrr 測交① ♂ Br/bR ♀ br/br Brbr bRbr（ 1： 1） 測交② ♀ Br/bR br/br ♂ Brbr bRbr BRbr brbr 19 19 1 1 2022/5/28 安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 49 對果蠅和家蠶而言