培養(yǎng)基的制備的ppt課件(參考版)
2025-05-01 23:21本頁面
【正文】 （ 2）菌種培養(yǎng)：細菌芽孢脫落；放，霉孢子豐滿。 在抗生素工業(yè)生產(chǎn)中應用廣泛 、 效果較好 ， 可保存幾年時間 ， 但對營養(yǎng)細胞效果不佳 。 (8)保存 置 4℃ 冰箱或室溫干燥處 ， 每隔一定的時間進行檢測 。 (7)干燥 將裝有菌懸液的砂土管放入干燥器內 ， 干燥器底部盛有干燥劑 。 (5)菌懸液的制備 取生長健壯的新鮮斜面菌種 ， 加入 23ml無菌水 (每 18x180mm 的試管斜面菌種 )， 用接種環(huán)輕輕將菌苔洗下 ， 制成菌懸液 。 (3)砂土混合 處理妥當?shù)暮由芭c土壤按 3： 1的比例摻合 (或根據(jù)需要而用其他比例 ， 甚至可全部作砂或土 )均勻后 ，裝入 10x100mm的小試管或安瓿管中 ， 每管分裝 1g左右 ，塞上棉塞 ， 進行滅菌 (通常采用間歇滅菌 23次 )， 最后烘干 。 （ ２ ） 土壤處理 取非耕作層不含腐殖質的痩黃土或紅土 ， 加自來水浸泡洗滌數(shù)次 ， 直至中性 。 砂土管保藏法 （ 1）河砂處理 取河砂若干加入鹽酸 10% ，加熱煮沸 30min除去有機機質。霉菌、放線菌、芽孢菌可保藏兩年以上，酵母菌可保藏 1－ 2年，普通細菌也可保藏 1年左右。 將試管直立，置低溫或室溫下保存。 此法優(yōu)點是操作簡單、使用方便，缺點是保藏時間短、易被污染。 保藏時間依微生物的種類而定。 L干燥法則不需要低溫預凍樣品，只是使樣品維持在10－ 20C?范圍內進行真空干燥。 真空干燥法 這類方法包括冷凍真空干燥法和 L－干燥法。 此法關鍵是要克服細胞的冷凍損傷。 冷凍法 使菌種始終存放在低溫環(huán)境下的保藏方法。 懸液法 將細菌、酵母菌細胞懸浮在一定的溶液中保存。 載體法 使生長合適的微生物吸附在一定的載體上進行干燥。 思考題 ? 鏡檢時，你如何區(qū)分放線菌的基內菌絲和氣生菌絲 ? ? 你認為霉菌和放線菌菌絲的主要區(qū)別是什么？ 實驗六、菌種保藏 幾種常用的保藏方法： 傳代培養(yǎng)法 保藏的菌種通過斜面、穿刺或皰肉培養(yǎng)基（用于厭氧細菌）培養(yǎng)好后，置 4C?冰箱中存放，定期進行傳代培養(yǎng)、再存放。 ? 觀察時，宜用略暗光線；先用低倍鏡找到適當視野，更換高倍鏡觀察。 關鍵步驟及注意事項 ? 倒平板要厚一些，接種時劃線要密。 ? 觀察 培養(yǎng)后菌絲體生長在培養(yǎng)基及蓋玻片上，小心用鑷子將蓋玻片抽出，輕輕擦去生長較差的一面的菌絲體，將生長良好的菌絲體面向的載玻片，壓放于載玻片上。 ? 插片法 : 倒平板 → 插片 → 接種 → 培養(yǎng) → 鏡檢→ 記錄繪圖 ? 壓印法 : 倒平板 → 劃線接種 → 挑取菌落 → 加蓋玻片 → 鏡檢 → 記錄繪圖 ? 埋片法 : 倒瓊脂 → 切槽 → 接種 → 培養(yǎng) → 鏡檢 → 記錄繪圖 ? 倒平板 將培養(yǎng)基熔化后，倒 1012毫升左右于滅菌培養(yǎng)皿內，凝固后使用 . ? 插片 將滅菌的蓋玻片以 45度角插入培養(yǎng)皿內的培養(yǎng)基中，插入深約為 1/2或 1/3。 (1)nonseptate (2)septate 繁殖方式 ? 無性繁殖： ? 芽生孢子 ? 節(jié)孢子 ? 孢囊孢子 ? 后垣孢子 ? 分生孢子 ? 有性繁殖： ? 卵孢子 ? 接合孢子 ? 子囊孢子 Sporangiospores 孢囊孢子（ Sporangiospores are formed within a sporangium ） 節(jié)孢子 Arthrospores 分生孢子 Conidi
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