【正文】 45 / 45。 填寫取樣記錄表。 清潔完成后按擦拭取樣位置圖的指示取表面殘留物樣和表面微生物樣，應(yīng)先取微生物樣，后在鄰近位置取殘留物樣。在清洗進(jìn)行到最終淋洗將結(jié)束時(shí)按取樣位置圖的指示用普通取樣瓶取兩瓶各500mi 淋洗水，用無(wú)菌取樣瓶取兩瓶各500ml 淋洗水。九、取樣位置(圖)略。八、取樣和檢驗(yàn)方法按 SOP進(jìn)行。六、取樣溶劑注射用水。(3)表面微生物限度 不超過(guò)1CFU／25cm。根據(jù)公式計(jì)算普通表面殘留物限度，取安全因子F 為10L＝10B／(SA2．表面擦拭取樣(1) 表面殘留物限度 10μg／cm2。(一) 參照產(chǎn)品氨基酸產(chǎn)品中胱氨酸的溶解度最小，選定12％氨基酸注射液為參照產(chǎn)品。三、驗(yàn)證人員略。二、清潔規(guī)程略。驗(yàn)證失敗意味著清潔規(guī)程存在缺陷，應(yīng)當(dāng)根據(jù)化驗(yàn)結(jié)果提供的線索修改清潔規(guī)程，隨后開展新一輪的驗(yàn)證試驗(yàn)。否則應(yīng)判驗(yàn)證失敗。如果出現(xiàn)個(gè)別化驗(yàn)結(jié) 果超標(biāo)的情況，必須詳細(xì)調(diào)查原因。重復(fù)上述過(guò)程3 次。清潔驗(yàn)證試驗(yàn)至少進(jìn)行3 次。根據(jù)設(shè)備的情況、已確定的清潔劑和殘留限度，設(shè)計(jì)清洗方法。從表中可見，產(chǎn)品丙、丁、乙、戊，可用水溶性清潔劑清潔，應(yīng)選最難溶的產(chǎn)品丙為參照產(chǎn)品，清潔劑為l％NaOH 熱水溶液，允許殘留限度定為1μg/cm。⑧ 將表中允許殘留限度最小的數(shù)值確定為驗(yàn)證方案的允許殘留物限度標(biāo)準(zhǔn)。⑥ 將表格按照溶解度由小到大排序，選擇溶解度最小的產(chǎn)品作為參照產(chǎn)品。⑤ 計(jì)算各產(chǎn)品的最大允許殘留限度。如將溶解度分為l／2／3／4 級(jí)，依次表示難溶／微溶／可溶／易溶。② 確定產(chǎn)品的若干物理、化學(xué)性質(zhì)為評(píng)價(jià)項(xiàng)目：如主要活性成分的溶解度，黏度，吸附性等，其中最主要的性質(zhì)為溶解度。參照產(chǎn)品的選擇原則如下。當(dāng)然，從環(huán)保和節(jié)約費(fèi)用的角度考慮，如果實(shí)踐證明該清潔程序?qū)Υ蠖鄶?shù)產(chǎn)品而言過(guò)于浪費(fèi)，也可再選擇一個(gè)典型的產(chǎn)品進(jìn)行上述規(guī)程制定和驗(yàn)證工作。比較可行的方法是在所有涉及的產(chǎn)品中，選擇最難清潔的產(chǎn)品為參照產(chǎn)品，以所有產(chǎn)品／原料中允許殘留量最低的限度為標(biāo)準(zhǔn)(最差條件)，優(yōu)化設(shè)計(jì)足以清除該產(chǎn)品／原料以達(dá)到殘留量限度的清潔程序。有時(shí)各種產(chǎn)品的物理、化學(xué)性質(zhì)有很大差異。④ 清潔規(guī)程有定期再驗(yàn)證的要求。② 增加生產(chǎn)相對(duì)更難清潔的產(chǎn)品。在發(fā)生下列情形之一時(shí)，須進(jìn)行清潔規(guī)程的再驗(yàn)證。應(yīng)有專門人員如驗(yàn)證工程師、生產(chǎn)經(jīng)理、QA 經(jīng)理等審核變更申請(qǐng)后決定是否需要進(jìn)行再驗(yàn)證。通過(guò)對(duì)日常監(jiān)控?cái)?shù)據(jù)的回顧，以確定是否需要再驗(yàn)證或確定再驗(yàn)證的周期。如果日常樣品的TOC 值低且波動(dòng)較小，則證明清潔效果滿意，清潔規(guī)程得到了良好的遵守。美國(guó)藥典、歐洲藥典已將TOC 指標(biāo)確立為注射用水和純水的法定項(xiàng)目，以反映水中有機(jī)物的污染情況。監(jiān)控的方法一般為肉眼觀察是否有可見殘留物，必要時(shí)可定期取淋洗水或擦拭取樣進(jìn)行化驗(yàn)。驗(yàn)證過(guò)程中進(jìn)行的試驗(yàn)往往是有限的，它包括不了實(shí)際生產(chǎn)中各種可能的特殊情況，監(jiān)控則正好彌補(bǔ)這方面的不足。同藥品生產(chǎn)工藝過(guò)程一樣，經(jīng)驗(yàn)證后，清潔方法即進(jìn)人了監(jiān)控與再驗(yàn)證階段，應(yīng)當(dāng)以實(shí)際生產(chǎn)運(yùn)行的結(jié)果進(jìn)一步考核清潔規(guī)程的科學(xué)性和合理性。(4) 驗(yàn)證結(jié)論。(2) 檢驗(yàn)結(jié)果及其評(píng)價(jià)，附檢驗(yàn)原始記錄和化驗(yàn)報(bào)告。驗(yàn)證報(bào)告至少包括以下內(nèi)容。驗(yàn)證結(jié)論應(yīng)在審核了所有清潔作業(yè)記錄、檢驗(yàn)原始記錄、化驗(yàn)報(bào)告、偏差記錄后方能做出。一般如檢驗(yàn)結(jié)果超出限度，并經(jīng)證明并非化驗(yàn)誤差所致時(shí)，該偏差應(yīng)作為關(guān)鍵偏差。檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的化驗(yàn)報(bào)告及其原始記錄應(yīng)作為驗(yàn)證報(bào)告的內(nèi)容或附件。檢驗(yàn)應(yīng)按照預(yù)先開發(fā)并驗(yàn)證的方法進(jìn)行。當(dāng)然，有關(guān)技術(shù)人員可在旁觀察規(guī)程的執(zhí)行情況，以便及．時(shí)發(fā)現(xiàn)偏差并予以糾正。應(yīng)及時(shí)、準(zhǔn)確地填寫清潔規(guī)程執(zhí)行記錄，保證清潔過(guò)程完全按照規(guī)程進(jìn)行。本階段的關(guān)鍵在于清潔規(guī)程的執(zhí)行和數(shù)據(jù)的采集：取樣與化驗(yàn)。第四節(jié) 驗(yàn)證的實(shí)施當(dāng)驗(yàn)證方案獲得批準(zhǔn)，所有準(zhǔn)備工作進(jìn)行完畢后，即進(jìn)入了驗(yàn)證實(shí)施階段。(7) 可靠性判斷標(biāo)準(zhǔn) 在本部分，應(yīng)規(guī)定為證明待驗(yàn)證清潔規(guī)程的可靠性，驗(yàn)證試驗(yàn)須重復(fù)的次數(shù)。(6) 取樣要求 用示意圖、文字等指明取樣點(diǎn)的具體位置和取樣計(jì)劃，明確規(guī)定何時(shí)、何地、取多少樣品，如何給各樣品標(biāo)記。一般可將相關(guān)設(shè)備列表，計(jì)算總表面積，特殊表面面積；將相關(guān)產(chǎn)品列表，列入主要活性成分及其相關(guān)物理化學(xué)性質(zhì)，MTDD 值等，確定參照物質(zhì)，計(jì)算限度標(biāo)準(zhǔn)。(2) 清潔規(guī)程 待驗(yàn)證的清潔方法的SOP 即清潔規(guī)程應(yīng)當(dāng)在驗(yàn)證開始前確定下來(lái)，在驗(yàn)證方案中列出清潔規(guī)程以表明清潔規(guī)程已經(jīng)制定。一般而言應(yīng)當(dāng)包含的內(nèi)容有。取樣員可根據(jù)擦拭棒彎曲的程度估算加在擦拭表面的壓力。取樣員的取樣方式是產(chǎn)生較大RSD 的主要原因。⑧ 將擦拭棒分別放人試管中，蓋上試管蓋，加入預(yù)定溶劑10ml，加塞，輕搖試管，并放置10min，使物質(zhì)溶出。⑥ 自然干燥或用電吹風(fēng)溫和地吹干不銹鋼板。④ 將約10ml 溶液盡量均勻地噴在400mm400mm 的區(qū)域內(nèi)。 ② 在鋼板上用鋼錐劃出400mm400mm 的區(qū)域，每隔l00mm 劃線，形成16 塊100mm100mm 的方塊。① 準(zhǔn)備一塊與設(shè)備表面材質(zhì)相同的500mm500mm 的板材。取樣過(guò)程的驗(yàn)證實(shí)際上是對(duì)藥簽、溶劑的選擇、取樣人員操作、殘留物轉(zhuǎn)移到藥簽、樣品溶出(萃取)過(guò)程的全面考察。通過(guò)回收率試驗(yàn)驗(yàn)證取樣過(guò)程的回收率和重現(xiàn)性。方法的回收率可與取樣的回收率結(jié)合進(jìn)行。一般要求線性范圍應(yīng)達(dá)到殘留物限度的50％～150％。方法驗(yàn)證還包括檢測(cè)限度，精密度，線性范圍，回收率試驗(yàn)。(五) 檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)方法應(yīng)經(jīng)過(guò)驗(yàn)證。擦拭取樣也用于設(shè)備表面微生物的取樣。將該樣品與其他樣品一起送至試驗(yàn)室。但與前次擦拭移動(dòng)方向垂直，見圖3—3 ④ 擦拭完成后，將藥簽放人試管，并用螺旋蓋旋緊密封。擦拭過(guò)程應(yīng)覆蓋整個(gè)表面。③ 將藥簽頭按在取樣表面上，用力使其稍彎曲，平穩(wěn)而緩慢地擦拭取樣表面。通?？扇?5cm 或100cm。(四) 擦拭取樣操作規(guī)程① 計(jì)算所要擦拭表面的面積。選擇溶劑的原則：① 溶劑不得在設(shè)備上遺留有毒物質(zhì)；② 應(yīng)使擦拭取樣有較高的回收率；③ 不得對(duì)隨后的檢測(cè)產(chǎn)生干擾。用于擦拭和萃取的溶劑可以相同也可不同。棉簽容易脫落纖維，故在使用前應(yīng)用取樣用溶劑預(yù)先清洗，以免纖維遺留在取樣表面。常用的擦拭工具為藥簽，在一定長(zhǎng)度的尼龍或塑料棒的一端纏有不掉纖維的織物。 擦拭取樣的缺點(diǎn)是很多情況下須拆卸設(shè)備后方能接觸到取樣部位，對(duì)取樣工具、溶劑、取樣人員的操作等都有一定的要求，總的來(lái)說(shuō)比較復(fù)雜。通過(guò)選擇適當(dāng)?shù)牟潦萌軇?、擦拭工具和擦拭方法，可將清洗過(guò)程中未溶解的，已“干結(jié)”在設(shè)備表面或溶解度很小的物質(zhì)擦拭下來(lái)，能有效彌補(bǔ)淋洗取樣的缺點(diǎn)。如生產(chǎn)有澄明度與不溶性微粒要求的制劑，通常要求淋洗水符合相關(guān)劑型不溶性微粒和澄明度的標(biāo)準(zhǔn)。如在驗(yàn)證試驗(yàn)中采用后一方法，其結(jié)果的可靠性要好一些，這是可以預(yù)見的。分別按照微生物檢驗(yàn)樣品和化學(xué)檢驗(yàn)樣品的取樣規(guī)程收集清潔程序最后一步淋洗即將結(jié)束時(shí)的水樣。淋洗水樣品的缺點(diǎn)是如上節(jié)討論的溶解與流體力學(xué)原理，當(dāng)溶劑不能在設(shè)備表面形成湍流進(jìn)而有效溶解殘留物時(shí)，或者殘留物不溶于水或干結(jié)在設(shè)備表面時(shí)，淋洗水就難以反映真實(shí)的情況。六、取樣與檢驗(yàn)方法學(xué)(一) 最終淋洗水取樣為大面積取樣方法，其優(yōu)點(diǎn)是取樣面大，對(duì)不便拆卸或不宜經(jīng)常拆卸的設(shè)備也能取樣。設(shè)備清洗后存放的時(shí)間越長(zhǎng)，被微生物污染的幾率越大。微生物的特點(diǎn)是在一定環(huán)境條件下會(huì)迅速繁殖，數(shù)量急劇增加。發(fā)達(dá)國(guó)家GMP 一般明確要求控制生產(chǎn)各步的微生物污染水平，尤其對(duì)無(wú)菌制劑，產(chǎn)品最終滅菌或除菌過(guò)濾前的微生物污染水平必須嚴(yán)格控制。在無(wú)法避免時(shí)，三級(jí)溶劑可作為清潔劑，其在下批生產(chǎn)中允許的溶劑殘留濃度不應(yīng)超過(guò)初始溶劑濃度的0．5％。其名稱列于表3—48。在藥品生產(chǎn)中這類溶劑的控制標(biāo)準(zhǔn)如表3—47。如果確實(shí)無(wú)法替代，其濃度限度見表3—46。人用藥品注冊(cè)技術(shù)要求國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)協(xié)調(diào)會(huì)(ICH)在“殘留溶劑指南”將溶劑分為3 個(gè)級(jí)別。因此，如果制定限度標(biāo)準(zhǔn)僅以MTDD 為依據(jù)，就會(huì)在實(shí)際生產(chǎn)中遇到很大的質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)。統(tǒng)計(jì)過(guò)去生產(chǎn)的多批產(chǎn)品中游離不楊酸的化驗(yàn)結(jié)果可確定來(lái)自原料和生產(chǎn)過(guò)程產(chǎn)生的水楊酸的平均水平。則按MTDD 計(jì)算的乙酰水楊酸的表面殘留物限度為：Ld=MTDD／10001000B／Uwl／Ddl／SA1000(μｇ／cm2)=900／10001000100／0．51／15l／50 0001000=240μｇ／cm2如從限制每片游離水楊酸的角度考慮，則應(yīng)以最小片重產(chǎn)品中允許的游離水楊酸為基準(zhǔn)，再乘以最小批量的片數(shù)，即得批產(chǎn)品中允許的游離水楊酸總量，再除以設(shè)備總面積即得單位面積游離水楊酸的限度。以下就以生產(chǎn)阿司匹林片為例，具體分析如何確定殘留物限度。這種情況下，制定殘留物的限度必須考慮這類雜質(zhì)對(duì)下批產(chǎn)品帶來(lái)的不利影響。而清洗過(guò)程中和清洗結(jié)束后殘留物充分暴露在水分、氧氣和通常較高的溫度下(如需高溫清洗和滅菌)，因此不難設(shè)想如果活性成分的化學(xué)性質(zhì)不很穩(wěn)定，或者在清潔和隨后的儲(chǔ)存條件下不穩(wěn)定，生成了其他物質(zhì)，就可能使為檢測(cè)微量活性物質(zhì)而建立的檢驗(yàn)方法無(wú)法真實(shí)地反映實(shí)際的情況。(四) 特殊情況下限度的制定上述各種限度制定方法的注意力都集中在產(chǎn)品中的活性成分或最難清潔的物質(zhì)上，其共同的特點(diǎn)是都要求其殘留量低于規(guī)定的限度，而對(duì)活性成分的化學(xué)穩(wěn)定性未加考慮。雖然這是非常經(jīng)驗(yàn)化的數(shù)據(jù)，與個(gè)人的視力、照明、設(shè)備的尺寸形狀和觀察的角度等許多因素有關(guān)，不可能作為定量、半定量的依據(jù)，也無(wú)法驗(yàn)證，但目檢最簡(jiǎn)單，且能直觀、定性地評(píng)估清潔的程度，有助于發(fā)現(xiàn)已驗(yàn)證的清潔程序在執(zhí)行過(guò)程中發(fā)生的偏差，對(duì)于日常監(jiān)控是有價(jià)值的。但由于最低生物活性量數(shù)據(jù)不易獲取，也缺乏法定依據(jù)，使用起來(lái)不如MTDD 方便可靠。Ld＝MTDD／10001／Ddl／SSA1000(μｇ／cm2)＝MTDD／Ddl／SSA(μｇ／cm2)同 樣，可根據(jù)具體情況決定是否再除以安全因子以確保安全。(7) 計(jì)算一般表面殘留物限度LdLd＝允許殘留物總量／總表面積允許殘留物總量＝MTDD／1000Ul／Dd＝MTDD／10001000B／Uwl／Dd 則 Ld＝MTDD／10001000B／Uwl／Ddl／SA1000(μｇ／cm2)＝MTDDB／Uwl／Ddl／SAl000(μｇ／cm2)可根據(jù)具體情況決定是否再除以安全因子以確保安全。(5) 取上述4 中對(duì)應(yīng)產(chǎn)品的單位制劑質(zhì)量Uw 和日最大使用成品(制劑數(shù))Dd 為計(jì)算參數(shù)。(3) 確定特殊部位面積SSA(cm2)。(1) 將相關(guān)設(shè)備生產(chǎn)的所有產(chǎn)品列表，在表中相應(yīng)位置填寫MTDD(mg)，最小生產(chǎn)批量B(kg)，單個(gè)制劑的質(zhì)量Uw(g)和每日最多使用制劑數(shù)Dd。最低日治療劑量數(shù)據(jù)來(lái)自藥品標(biāo)簽和使用說(shuō)明書上的有關(guān)數(shù)據(jù)計(jì)算：MTDD＝每次給藥片(粒)數(shù)每片有效成分含量每日最少給藥次數(shù)藥品標(biāo)簽和使用說(shuō)明書基于藥品研發(fā)過(guò)程進(jìn)行的動(dòng)物試驗(yàn)與各期臨床的統(tǒng)計(jì)資料，并經(jīng)過(guò)政府主管部門批準(zhǔn)，是生產(chǎn)企業(yè)必備的資料，因而MTDD 的應(yīng)用非常方便。清潔的目的是保證在使用產(chǎn)品B 時(shí)，不出現(xiàn)A 產(chǎn)品的生理作用。這樣就符合了GMP足夠安全的理念。不同藥物，不同人群的個(gè)體差異是不同的。在該劑量范圍的下限(即最低日治療劑量)以下，也還會(huì)產(chǎn)生一些生理活性。從確保安全的角度出發(fā)，一般取最低日治療劑量的l／1000 為殘留物限度的計(jì)算出發(fā)點(diǎn)(表3—44)。制定特殊表面限度的依據(jù)就是