東北師范大學20xx年基因工程試卷b卷(參考版)
2024-10-28 05:00本頁面
【正文】 到達平臺期 (Plateau)所需循環(huán)次數(shù)取決于樣品中模板的拷貝。 PCR 由變性 退火 延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：①模板 DNA 的變性：模板 DNA 經(jīng)加 熱至93℃左右一定時間后，使模板 DNA 雙鏈或經(jīng) PCR 擴增形成的雙鏈 DNA 解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準備；②模板 DNA 與引 物的退火 (復(fù)性 )：模板 DNA 經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至 55℃左右，引物與模板 DNA 單鏈的互補序列配對結(jié)合；③引物的延伸： DNA 模板 引物結(jié)合 物在 TaqDNA 聚合酶的作用下，以 dNTP 為反應(yīng)原料 ，靶序列為模板，按堿基配對與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板 DNA 鏈互補的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性 退火 延伸三過程，就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。 b、具有熱穩(wěn)定性的酶如： TagDNA 聚合酶。 理論上的三大發(fā)現(xiàn)： ①證 實了 DNA 是遺傳物質(zhì) ②揭示了 DNA 分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)模型和半保留復(fù)制機理 ③遺傳密碼的破譯和遺傳信息傳遞方式的確定 技術(shù)上的三大發(fā)明： ①限制核酸內(nèi)切酶的發(fā)現(xiàn)與 DNA 切割 ② DNA 連接酶的發(fā)現(xiàn)與 DNA 片段的連接 ③基因工程載體的研究與應(yīng)用 論述題 1 題 1. PCR 反應(yīng)的體系、基本原理、基本操作過程。 3. 列舉基因工程操作過程中用到的工具酶及其功能 1〕剪切酶類； 功能 剪切核酸
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