微生物與免疫ppt課件(2)(參考版)
2025-01-17 17:14本頁面
【正文】 ?干擾素 ?白細(xì)胞介素 ?集落刺激因子 ?腫瘤壞死因子和淋巴毒素 ?促生長因子 ?趨化因子 思考題 1. 如何制備類毒素和抗毒素？ 2. 簡述外毒素、類毒素和抗毒素三者的關(guān)系？ 3. 名詞： 外毒素，內(nèi)毒素，類毒素 抗原（完全抗原，半抗原，免疫原性，免疫反應(yīng)性）， 抗原決定簇，抗體，單克隆抗體，干擾素 凝聚反應(yīng)，沉淀反應(yīng) 酶聯(lián)免疫吸附測定（ ELISA） 。 1. 生物制品 凡是 人工免疫用 的 抗原和抗體制品 以及 診斷用 的抗原和抗體制品統(tǒng)稱為生物制品。待測樣品經(jīng)SDSPAGE電泳分離后，轉(zhuǎn)移到固相介質(zhì)如醋酸纖維膜上，然后用標(biāo)記抗體揭示特異抗原的存在。 ? 免疫印跡（ immunoblot或 westernblot） – 免疫印跡是在用于 DNA分析的 DNA印跡（ southern blot）技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的蛋白質(zhì)檢測技術(shù)。放射免疫技術(shù)靈敏度極高，能測得毫微克至微微克（ 109~1012g）的含量，廣泛用于激素、核酸、病毒抗原、腫瘤抗原等微量物質(zhì)測定。 直接法 間接法 （檢測抗體） 雙抗體夾心法 （檢測抗原） ? 放射免疫測定（ radioimmunoassay， RIA） – 放射免疫測定是一種以放射性同位素作為標(biāo)記物，將同位素分析的靈敏性和抗原抗體反應(yīng)的特異性這兩大特點(diǎn)結(jié)合起來的測定技術(shù)。 雙抗體夾心法 （檢測抗原） ： 先用一種未標(biāo)記的抗體包被酶標(biāo)板，然后每孔加入待測抗原，洗滌除去未結(jié)合抗原。 常用的酶： ? 辣根過氧化物酶 （底物：鄰苯二胺） ? 堿性磷酸酶 （底物：對硝基酚磷酸鹽） 直接法： 用酶包被的抗原或抗體直接檢測包被在酶標(biāo)板上的抗體或抗原 ， 被檢抗原或抗體的量與產(chǎn)物顏色成正比。 酶與抗原或抗體結(jié)合后，不改變抗原或抗體的免疫學(xué)反應(yīng)特異性，也不影響酶本身的活性。 2. 酶聯(lián)免疫吸附測定 （ enzyme linked immunosorbent assay, ELISA） 將可溶性抗體或抗原吸附到 聚苯乙烯 等固相載體上進(jìn)行免疫酶反應(yīng)的定性定量方法。 優(yōu)點(diǎn)： 特異性強(qiáng)，靈敏度高， 反應(yīng)速度快，容易觀察。 應(yīng)用： ?用免疫血清（已知抗體）檢測未知抗原 （如菌種鑒定）； ?用已知抗原檢測待測血清（未知抗體）； 2. 抗原抗體反應(yīng)的一般規(guī)律 ? 特異性 ? 可逆性 （物理結(jié)合） ? 定比性 ? 階段性 （兩個(gè)階段） ? 條件依賴性 （ pH6~8, 37~45℃ ,生理鹽水） 3. 主要的抗原抗體反應(yīng) 1）凝集反應(yīng)： 顆粒性 Ag + Ab 凝集團(tuán) （細(xì)菌，紅細(xì)胞） （稀釋 Ab ） 方法 玻片法 試管法 2）沉淀反應(yīng) 可溶性 Ag + Ab 沉淀物 （蛋白質(zhì)，多糖， 血清，細(xì)菌抽提液） （ 稀釋 Ag） 3）補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)： 兩個(gè)系統(tǒng) 5種組分： ： 待檢系統(tǒng) 已知的抗原（或抗體） 待檢的抗體（或抗原） 指示系統(tǒng) 綿羊紅細(xì)胞 溶血素（綿羊紅細(xì)胞的特異抗體） 補(bǔ)體（取
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