醫(yī)學分子生物學-基因組(參考版)
2025-01-16 12:13本頁面
【正文】 思考題 ? 試述病毒、原核生物和真核生物基因組結構的不同之處 ? 試說明真核生物的基因組很龐大，但所含基因總數(shù)卻很少的原因？并且分析真核生物基因編碼和調(diào)控的復雜性。最主要的方法是通過基因的表達產(chǎn)物 mRNA反追到染色體的位置。 ④用適當方法 填補缺口 。 ②高效、大規(guī)模的兩 末端測序 。 （ 4）進行 次級克隆 ， 序列分析 。 （ 2）利用高頻分布、易于檢索的 DNA標志或者 DNA指紋圖譜建立克隆之間的聯(lián)系，組成有序排列的 連續(xù)克隆系 ，最常使用的 DNA標志有 STS和表達的序列標簽（ expressed sequence tag， EST）。 既包括可轉(zhuǎn)錄序列 ， 也包括非轉(zhuǎn)錄序列 ， 是轉(zhuǎn)錄序列 、 調(diào)節(jié)序列和功能未知序列的總和 。 ?序列標簽位點 (sequence tagged sites, STSs): 在染色體上定位明確，而且可用 PCR擴增的單拷貝序列，通常為200500bp。通過識別、定位技術和統(tǒng)計學分析，可計算人 DNA標志的連鎖關系及其在染色體上的排列。 輻射雜交細胞圖（ radiation hybrid map， RH）：利用 X射線照射人細胞，使染色體隨機斷裂，然后與嚙齒動物細胞雜交克隆，人的染色體片段便被整合到嚙齒動物染色體上。 限制性圖譜 (restriction map): 用于對小區(qū)域 ,如 kb量級做精細結構制圖 ? 限制性酶切圖：選用合適的限制性核酸內(nèi)切酶對基因組 DNA或部分基因組 DNA進行酶切，獲得以酶切位點為標記的物理圖。 染色體顯帶技術： 通過各種染色法，以染色體上顯示的深淺不同的帶型確定DNA序列分布和位置，可區(qū)分 107bp范圍。 ?物理圖譜 反映的是 DNA序列上兩點之間的實際距離，而 遺傳圖譜 則反映這兩點之間的連鎖關系。 2個無關個體間有 300萬 SNPs. 單核苷酸多態(tài)標記（ SNP） 物理圖譜 指 DNA序列上各遺傳標志間的實際距離，是把遺傳圖譜中克隆群上的 DNA片段按實際的物理位置進行排序所構建的圖譜。平均每 500～ 1000bp出現(xiàn)一個堿基差異 ,如果一個堿基位置發(fā)生的變異在 1%以上的人群中存在，這個位點就被定義為 SNP位點?？勺鳛槲锢韴D譜的標志，促進了遺傳圖譜與物理圖譜的整合。由于 DNA酶切位點的變異所造成的 “ 能切 ” 與“ 不能切 ” 兩種狀況，可產(chǎn)生不同長度的片段 (等位片段 ),可用凝膠電泳顯示多態(tài)性。 遺傳圖譜的建立為基因識別和完成基因定位創(chuàng)造了條件。 基因組作圖 遺傳圖譜 (geic map) /連鎖圖譜 (linkage map) 指基因或 DNA標志在染色體上的相對位置與遺傳距離。 基因組學 (genomics)概念及分類 ?遺傳信息在染色體上，但染色體不能直接用來測序，必須將基因組這一巨大的研究對象進行分解，使之成為較易操作的小的結構區(qū)域，這個過程就是 基因作圖 。 ：結構基因組
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