cr技術(shù)培訓(xùn)講座ppt課件(參考版)
2025-01-13 14:16本頁(yè)面
【正文】 。 ? 國(guó)家衛(wèi)生部頒布的衛(wèi)醫(yī)發(fā) [2022]10號(hào)件，允許臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)在二級(jí)以上醫(yī)院，這意味著目前能夠使用 PCR檢測(cè)技術(shù)的醫(yī)院將從目前的 600多家三級(jí)以上醫(yī)院擴(kuò)充至 15,000多家的二級(jí)以上醫(yī)院。 ? 根據(jù) 2022年的國(guó)外著名雜志 《 自然 》 和《 科學(xué) 》 刊登的文章和國(guó)際權(quán)威技術(shù)評(píng)估機(jī)構(gòu)對(duì)基因診斷市場(chǎng)預(yù)測(cè)：全球基因診斷市場(chǎng)在今后 10年內(nèi)將以每年 30%的速度增長(zhǎng)，而其它傳統(tǒng)診斷技術(shù)市場(chǎng)年增長(zhǎng)率僅 24%。這項(xiàng)調(diào)查綜合了全球 28位知名專(zhuān)家的看法，歷時(shí) 5個(gè)月完成。 美國(guó)商務(wù)部把基因診斷作為 21世紀(jì)對(duì)美國(guó)最具有戰(zhàn)略意義的 5個(gè)競(jìng)爭(zhēng)性行業(yè)之一。生物技術(shù)是影響國(guó)民經(jīng)濟(jì)的四大科學(xué)支柱之一，被認(rèn)為是 21世紀(jì)科學(xué)技術(shù)的核心。 15％。 15％。解決辦法：系列稀釋待測(cè)模板，或在一定PCR反應(yīng)周期后間隔測(cè)定 PCR終產(chǎn)物的濃度。解決辦法就是設(shè)內(nèi)對(duì)照，使參照基因在同一反應(yīng)管內(nèi)進(jìn)行 PCR擴(kuò)增，起到校正作用，這樣，任何影響擴(kuò)增效率的因素同樣會(huì)影響兩種模板。 ? 首次制作質(zhì)控圖時(shí)（新批號(hào)開(kāi)始時(shí)），采用 “ 即刻法 ” 質(zhì)控方法，具體步驟如下： ? 將連續(xù)的質(zhì)控測(cè)定值從小到大排列，即 X1， X2， …… XN ? 計(jì)算均值 (X)和標(biāo)準(zhǔn)差 (S) ? 按下述公式計(jì)算 SI上限和 SI下限 ? SI上限 =(X最大值 X均值 )/2 ? SI下限 =(X均值 X最小值 )/2 PCR定量為何要設(shè)內(nèi)參照？ 影響 PCR定量的主要原因有 反應(yīng)效率的差異：可能為反應(yīng)體系和 PCR擴(kuò)增儀的工作狀態(tài)所致。 ? 編完化驗(yàn)單號(hào)后，在對(duì)血標(biāo)本進(jìn)行編號(hào)時(shí)要仔細(xì)核對(duì)化驗(yàn)單的病人姓名與標(biāo)本管上的姓名，不得有誤。 ? 試劑的特異性：取臨床標(biāo)本 10份（包括：低拷貝、高拷貝、陰性、高黃疸的標(biāo)本各 2份），用新試劑檢測(cè)，用于考察試劑的特異性。 ? 試劑的重復(fù)性：取從衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心購(gòu)買(mǎi)的已知拷貝數(shù)的血清 1份，用新試劑稀釋平行檢測(cè) 10次，計(jì)算出 SD， CV%。 ? 內(nèi)包裝：試劑是否漏液，真空包裝是否破損，試劑是否齊全以及是否有使用說(shuō)明書(shū)等。因此，只要獲得未知樣品的 Ct值，就可從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上算出該樣品的起始拷貝數(shù)。個(gè)模板的 Ct值與該模板的起始拷貝數(shù)的對(duì)數(shù)存在線(xiàn)性關(guān)系， Ct值越小，起始拷貝數(shù)越多，反之亦然。 菌種 即時(shí)熒光 PCR檢測(cè) 百日咳菌 — 大腸桿菌 — 布氏桿菌 — 肺炎球菌 — 堪薩斯分支桿菌 — 海分支桿菌 — 猿猴分支桿菌 — 鳥(niǎo)分支桿菌 — 胞內(nèi)分支桿菌 — 草分支桿菌 — 戈登氏分支桿菌 — 母牛分支桿菌 — 偶發(fā)分支桿菌 — 恥垢分支桿菌 — 龜膿腫分支桿菌 — 龜膿腫亞分支桿菌 — 結(jié)核桿菌 + 結(jié)核桿菌的特異性檢測(cè) Ct值 在熒光定量 PCR技術(shù)中，有一個(gè)很重要的概念 —Ct值。可直接用臨
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