【正文】 。根據(jù) 220nm與 2倍 275nm吸光度之差 (A2202A275)對(duì)濃度做圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。其濃度分別為 、 、 、 、 硝酸鹽氮。于 220nm及 275nm用 1cm石英比色皿，以空白管調(diào)零，測(cè)定吸光度。 ?沉淀步驟： ? 1. 水樣預(yù)處理 量取 50ml比色管中，加（ 1+11）鹽酸溶液 1ml，酸化。 ?7． 8g/L氨基磺酸溶液 避光保存于冰箱中。 ?5． (1+11)鹽酸溶液。 ?3．甲醇。 ?【 試劑 】 ?1．無(wú)硝酸鹽水 本實(shí)驗(yàn)用水均為無(wú)硝酸鹽水，其制備方法同無(wú)亞硝酸鹽水的制備，見(jiàn)亞硝酸鹽氮的測(cè)定。而定量測(cè)定硝酸鹽氮。若同時(shí)含亞硝酸鹽氮、氨氮，表示未達(dá)到自靜。 ? ? ? ? VmLmgNNO ??? ?? 12 /?第六節(jié) 硝酸鹽氮 ?水中硝酸鹽氮的來(lái)源：含氮有機(jī)物在有氧條件下無(wú)機(jī)化作用的最終產(chǎn)物。 ? 3．生成的偶氮染料可在空氣中氧化，使顏色加深，故樣品管和標(biāo)準(zhǔn)管應(yīng)同時(shí)配制。 ?【 注意事項(xiàng) 】 ? 1．為防止亞硝酸鹽氧化或還原而損失，采樣后應(yīng)立即測(cè)定。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，查出水樣中亞硝酸鹽氮的含量。 向上述各比色管中分別加入 2mL鹽酸萘乙二胺顯色劑，混勻， 20min后。 （ 2） 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制及樣品測(cè)定 取 50mL比色管 7支，分別加入亞硝酸鹽氮 1ug/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液 、 、 、 、 、 ，用無(wú)氨水稀釋到刻度。溶液無(wú)色，貯存于棕色瓶中，在冰箱中保存可穩(wěn)定一個(gè)月。使用前應(yīng)振蕩均勻。在不斷攪拌下慢慢加入 55mL氨水，放置約 1h后，用水反復(fù)洗滌沉淀到洗出液中不含氨、氯化物、硝酸鹽和亞硝酸鹽為止。溶解 125g硫酸鋁鉀[AlK(SO4)2 （ 5）高錳酸鉀溶液（ 1/5KMnO4， ）：溶解 ，煮沸 ～ 1h，使體積減少至 1000mL左右，放置過(guò)夜，用 G3號(hào)熔結(jié)玻璃漏斗過(guò)濾后，濾液貯存于棕色試劑瓶中，用上述草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定其準(zhǔn)確濃度。 245/11 ???? VC K M nO －＝亞硝酸鹽氮（ 3）亞硝酸鹽使用液：臨用時(shí)將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋為。再以 溶液滴定過(guò)量的草酸鈉，至溶液呈微紅色，記錄高錳酸鉀溶液的用量 (V1)。由于亞硝酸鹽氮在潮濕環(huán)境中易被氧化，所以儲(chǔ)備液在測(cè)定時(shí)需標(biāo)定。 （ 2）亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。在蒸餾水中加入少許高錳酸鉀晶體，再加氫氧化鈣或氫氧化鋇，使之呈堿性。②三價(jià)鐵、鉛、汞、銀、二價(jià)銅等加 EDTA配合消除；③有三氯胺產(chǎn)生紅色干擾，可改變加入試劑的順序而消除。 NH2SO2C6H4NH2 亞硝酸鹽與人體血液作用 ， 形成高鐵血紅蛋白 ， 從而使血液失去攜氧功能 ， 另外可與二級(jí)胺類(lèi)形成致癌物亞硝胺 。 環(huán)境水體中硝酸鹽的污染來(lái)源除硝酸鹽類(lèi)化肥使用和生活污水 、 生活垃圾 、 生產(chǎn)含氮廢棄物與人畜糞便等的自然降解過(guò)程外 ， 空氣中氧化氮污染物經(jīng)降水淋溶后形成的硝酸鹽也是重要的污染來(lái)源 。 ? 該方法測(cè)定濃度范圍為 ~1mg/L。 ?空白實(shí)驗(yàn)：以無(wú)氨水代替水樣，做全程序空白測(cè)定。 ?分取適量經(jīng)蒸餾預(yù)處理后的餾出液，加入50mL比色管中，加一定量的 1mol/L氫氧化鈉溶液以中和硼酸，稀釋至標(biāo)線，加 納氏試劑，混勻。 ? 由測(cè)得的吸光度，減去零濃度空白管的吸光度后，得到校正吸光度，繪制以氨氮含量（ mg）對(duì)校正吸光度的標(biāo)準(zhǔn)曲線。加 ，混勻。 ：取 200mL水樣，加硫酸鋅溶液（ 100g/L） ，混勻，加氫氧化鈉溶液（ 240 g/L） ，使 pH為 ，靜置數(shù)分鐘，傾出上清液測(cè)定。加熱蒸餾，至流出液達(dá) 200mL時(shí)，停止蒸餾。 ?操作步驟： ? ?①取 250mL水樣（如氨氮含量較高，可取適量并加水至250mL，使氨氮含量不超過(guò)），移入凱氏燒瓶中，加數(shù)滴溴百里酚藍(lán)指示液（ ），用氫氧化鈉溶液或鹽酸溶液調(diào)節(jié)至 pH7左右。水樣作適當(dāng)?shù)念A(yù)處理后，本法可適用于地面水、地下水、工業(yè)廢水和生活污水。 2K2[HgI4]+3KOH+NH3 NH2Hg2IO+7KI+2H2O ?最低檢出濃度為 （光度法），測(cè)定上限為 2 mg/L。 無(wú)機(jī)化過(guò)程：蛋白質(zhì) 胨 肽 氨基酸 氨 亞硝酸鹽 硝酸鹽。 當(dāng) pH值偏高時(shí)，游離氨的比例較高；反之，則銨鹽的比例高。 ?F1=V稀釋水 /(V水樣 +V稀釋水 ） ?F1=V水樣 /(V水樣 +V稀釋水 ） 第四節(jié) 氨氮 ?定 義： 水中的氨氮是指以游離氨（或稱(chēng)非離子氨， NH3）和離子氨（ NH4＋ ）形式存在的氮。若不在此范圍，說(shuō)明試驗(yàn)有誤，應(yīng)檢查接種水、稀釋水、操作步驟等。 ?：將葡萄糖 谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，以 2％稀釋后測(cè)定 BOD5,值為 200 177。 ?：檢查各瓶編號(hào)，從空白及每個(gè)稀釋倍數(shù)的水樣瓶各取一瓶立即放入 20℃ 177。測(cè)定每天溶解氧和培養(yǎng) 5天后的溶解氧量。攪拌時(shí)勿使攪棒的膠板露出水面，防止產(chǎn)生氣泡。 ?計(jì)算 ： BOD5（ mg/L） =P1P2 ? ? ①確定稀釋倍數(shù) 耗氧量值除以 1～ 3，得到的商即為水樣的稀釋倍數(shù)。將另一瓶放入培養(yǎng)箱中，在 20177。以同樣的操作使兩個(gè)溶解氧瓶充滿水樣，加塞水封。 ? ④從水溫較低的水域中采集的水樣，可遇到含有過(guò)飽和溶解氧，此時(shí)應(yīng)將水樣迅速升溫至 20℃ 左右，充分振搖，以趕出過(guò)飽和的溶解氧。加入量用碘量法測(cè)定。 ? ②含有少量游離氯的水樣，一般放置 12h，游離氯即可消失。 ? 谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：各取 105g用水釋至1000mL. 其它試劑的配制見(jiàn) P67 ?操作步驟： ?水樣的預(yù)處理 ?①水樣的 pH若超出 ，可用鹽酸或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)至近于 7，但用量不要超過(guò)水樣體積的 %。 ? 接種稀釋水的 pH值應(yīng)為 ，其 BOD5值宜在 mg/L之間為宜。 ? 接種稀釋水：取適量接種液，加于稀釋水中，混勻。當(dāng)水中出現(xiàn)大量絮狀物，或檢查其化學(xué)需氧量的降低值出現(xiàn)突變時(shí)，表明適用的微生物已進(jìn)行繁殖，可用作接種液。 ? 當(dāng)分析含有難于降解的廢水時(shí)，在排污口下游 38km處取水樣作為廢水的馴化接種液。 ? 用含城市污水的河水或湖水。 ? 城市污水，一般采用生活污水，在在室溫下放至一晝夜，取上層清液使用。 ? 稀釋水的 PH值應(yīng)為 ，其 BOD5應(yīng)小于 mg/L。瓶口蓋以兩層經(jīng)洗滌晾干的紗布，置于 20℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)放置數(shù)小時(shí)，使水中的溶解氧量達(dá)到 8mg/L。 ?試劑： ：在 520L玻璃瓶?jī)?nèi)裝入一定量的水，控制水溫在 20℃ 左右。通常要曝氣 8小時(shí)；對(duì)于不含或少含微生物的工業(yè)廢水，在測(cè)定 BOD5時(shí)應(yīng)進(jìn)行接種，以引入能分解廢水中有機(jī)物的微生物。 ? 稀釋培養(yǎng)法：污染的水樣。 1℃ 培養(yǎng)五天后的溶解氧含量，二者之差即為五日生化過(guò)程中所消耗的溶解氧量（ BOD5）。 第三節(jié) 生化需氧量 ?定義 ：生化需氧量是指在規(guī)定的條件下，微生物分解存在于水中的某些可氧化物質(zhì)，主要是有機(jī)物質(zhì)所進(jìn)行的生物化學(xué)過(guò)程中消耗溶解氧的量。 ?在堿性溶液中，過(guò)量的 KMnO4氧化水中的還原性物質(zhì)，氧化作用完成后，將溶液酸化，再加 Na2C2O4還原，過(guò)量的 Na2C2O4以KMnO4標(biāo)液回滴。 計(jì)算及注意事項(xiàng)見(jiàn) P64~65 ?當(dāng)水樣中 [Clˉ] ＞ 300mg/L時(shí)，產(chǎn)生正誤差。 ?4KMnO4+5C+6H2SO4 2K2SO4+4MnSO4+5CO2 +6H2O ?24KMnO4+5Na2C2O4+8H2SO4 ? K2SO4+2MnSO4+10CO2 +8H2O+Na2SO4 ?操作步驟： +5mlH2SO4 (1+3)+ KMnO4 沸水浴 30min，趁熱 +鈉（ Na2C2O4，過(guò)量） KMnO4 V1微紅色+ Na2C2O4 KMnO4 V2微紅色。過(guò)量的草酸鈉再以 KMn04標(biāo)準(zhǔn)溶液回滴。一般來(lái)說(shuō)，重鉻酸鉀法的氧化率可達(dá) 90%，而高錳酸鉀法的氧化率為 50%左右，兩者均未完全氧化，因而都只是一個(gè)相對(duì)參考數(shù)據(jù)。 ?耗氧量與水質(zhì)的關(guān)系：耗氧量高，污染嚴(yán)重，致色 .臭 .味；致病；由于消毒后余氯降低，微生物生長(zhǎng)；致突變（主要是有機(jī)物）。稱(chēng)高錳酸鹽指數(shù)。但水樣中藻類(lèi)、硫化物、硫酸鹽，油等物質(zhì)時(shí)，會(huì)使薄膜堵塞或損壞，應(yīng)及時(shí)更換薄膜。 ?所產(chǎn)生的微弱電流與氧的濃度成線性關(guān)系，在儀器上可直接顯示氧含量。 ?（ 3） 高錳酸鉀修正法 ? 只適用于含亞鐵離子，不含其他還原劑及有機(jī)物質(zhì)的水樣 Fe2+ Fe3+ 水樣 + KMnO4 過(guò)量 KMnO4 + Na2C2O4除去 ?（ 4）膜電極法（氧電極法） ? 在電極外殼端部使用溶解氧透過(guò)本身的透氣薄膜（聚四氟乙烯）將正、負(fù)兩極和內(nèi)充電解液封入殼內(nèi)（電解液為 KCl等）。繼續(xù)用Na2S2O3標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至藍(lán)色變成無(wú)色為止 ?記下消耗 Na2S2O3標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積 V. ?（四）計(jì)算 Ρ（ O3）＝ C V 8 1000/V 式 中： Ρ（ O3） — 水中溶解氧的質(zhì)量濃度（ mg／ L） C— 標(biāo)準(zhǔn) Na2S2O3溶液， mol/L V— 標(biāo)準(zhǔn) Na2S2O3溶液的消耗量 ,mL 8— 【 Na2S2O3】 =以 mg為單位的溶解氧質(zhì)量， mg/mmol 若【 Na2S2O3】 =，則 Ρ（ O3）＝ 2V ?注意事項(xiàng)見(jiàn) P59 （ 2）疊氮化鈉修正法 ? 加入疊氮化鈉（ NaN3）去除亞硝酸鹽干擾（后者與 KI作用生成 I2，產(chǎn)生正干擾，使結(jié)果偏高） 2I+2NO2+4H+ I2+2H2O+2NO 2 NaN3+H2SO 4 2HN3+Na2SO4 HNO2+ HN3 N2O+N2+H2O 消除干擾后，再用碘量法測(cè)定。用標(biāo)準(zhǔn) Na2S2O3溶液滴定至淺黃色。此時(shí)，溶液中有 I2產(chǎn)生，將瓶在陰暗處放 5分鐘，使 I2全部析出來(lái)。將固定了溶解氧的水樣帶回實(shí)驗(yàn)室備用。 ,按上述操作往水樣中加入 2ml堿性碘化鉀溶液 ,蓋緊瓶塞，將瓶顛倒振搖使之充分搖勻。 ?實(shí)驗(yàn)方法 （一）水樣的采集與固定 ?用溶解氧瓶取水面下 2050cm的水、使水樣充滿 250ml的磨口瓶中，用尖嘴塞慢慢蓋上，不留氣泡。 我 國(guó)規(guī) 定 ⅲ 類(lèi) 地面水域不低于 5 mg/L. 檢測(cè)方法 ?碘量法 修正碘量法 氧電極法 ?（ 1）碘量法 ?原理：在水樣中加硫酸錳和堿性碘化鉀，硫酸錳與氫氧化鈉反應(yīng)成氫氧化錳，溶解氧能將 Mn2+氧化生成高價(jià)態(tài) Mn4+ ?MnSO4+2NaOH=Na2SO4+Mn(OH)2↓ ?2Mn(OH)2+O2=2H2MnO3↓+H2O ?H2MnO3+Mn(OH)2=Mn MnO3↓ 棕色沉淀 ?加入濃硫