細(xì)菌耐藥表型的檢測方法(參考版)
2024-10-21 19:05本頁面
【正文】 ：購買丁酸酯酶檢測紙片 (梅里埃公司生產(chǎn) )，涂細(xì)菌于紙片上，如幾分鐘內(nèi)出現(xiàn)綠色為陽性。 （ 3） 35℃ 孵育 1824h，如克林霉素出現(xiàn)扁平或凹陷的抑菌環(huán)為陽性。 （ 1）改良 Hodge試驗(yàn)陽性菌株 : 肺克 ATCC BAA1705 （ 2） 改良 Hodge試驗(yàn)陰性菌株：肺克 ATCC BAA1706 六、 DTest試驗(yàn) （ 1）將待檢菌按常規(guī)藥敏紙片 KB法操作均勻涂布于 MH平板上。 Hodge試驗(yàn)：檢測碳青霉烯酶活性的表型試驗(yàn)，在檢測 KPC方面有 90％的敏感性 /特異性，檢測其他碳青霉烯酶時(shí)敏感性 /特異性不定（如：低水平的金屬酶）。 （ 4） 35℃ 培養(yǎng)過夜后，觀察結(jié)果。 （ 2）用棉簽滿涂布于 MH平板上，就像紙片擴(kuò)散法藥敏試驗(yàn)一樣，在中心加一張厄他培南或美洛培南（最好）紙片。 ? 注：頭孢比肟對于碳青霉烯酶產(chǎn)生株的結(jié)果是不穩(wěn)定的。因?yàn)檫@些菌屬會產(chǎn) 生非碳青霉烯酶導(dǎo)致的亞胺培南 MIC升高。 五、腸桿菌科碳青霉烯霉篩選和確證 （ 2021年 CLSI:） “ I”或“ R”沒必要再去檢驗(yàn)該酶，（醫(yī)生通常不會選用“ I”或“ R”的藥物），但主要以感染控制為目的檢驗(yàn)該酶。 （ 2）在 MH平板上貼一片亞胺培南 (10ug/片 ) 紙片，在距亞胺培南紙片中心 ，將 EDTA 10ul 均勻浸注于空白紙片上， 35℃ 孵育 1824h。 （ 3）結(jié)果觀察：若加有 2巰基乙酸的頭孢他啶紙片抑菌圈大于單個(gè)頭孢他啶的抑菌圈（ ≧ 4mm），則為陽性，即產(chǎn)金屬 β內(nèi)酰胺酶。 四、金屬 β內(nèi)酰胺酶的表型檢測方法
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