【正文】 流動相：0.06M七氟丁酸－0.001M乙酸銨〔pH5.0〕。瘦肉精——克倫特羅。ir243。,2.測定(c232。)洗脫。,河豚毒素測定方法,小鼠生物試驗(yàn)法 免疫化學(xué)測定法 毛細(xì)管等速電泳電壓檢測法 熒光法 TLC/火焰(huǒy224。ng)腎上腺皮質(zhì)激素，如地塞米松，提高組織對毒素的耐受性。,治療： 盡快排除毒物：催吐、洗胃、導(dǎo)瀉。中毒病癥始發(fā)于使用后10秒，先是口腔麻木和刺痛，繼發(fā)為虛弱、麻痹、血壓降低(ji224。HPLC法由于流出物背景干擾，在檢測靈敏度和選擇性方面存在問題。,第九十四頁，共一百零二頁。 s249。但由于目前樣品前處理及色譜過程，對DSP結(jié)構(gòu)類似物不能有效別離，因此HPLC法測定DSP效果不是很理想。,腹瀉(f249。 中毒者表現(xiàn)出腸道病癥和神經(jīng)紊亂，嚴(yán)重的有短暫的記憶喪失現(xiàn)象。,第九十一頁，共一百零二頁。它是由甲藻產(chǎn)生的一類四氫嘌呤毒素的總稱。 我國浙江、福建、廣東等地曾屢次發(fā)生貝類中毒，導(dǎo)致中毒的貝類有蚶子、花蛤、香螺、織紋螺等常食用的貝類。由于這些(zh232。 HPLC條件 色譜(s232。 衍生化的方法一般有柱前和柱后兩類，柱前衍生一般使用三氟乙酸，柱后衍生有碘液、過溴化吡啶溴以及電化學(xué)等方法。,HPLC法測定黃曲霉毒素，一般使用靈敏度和選擇性較好的熒光檢測器。 s249。,第八十六頁，共一百零二頁。ng d,第八十五頁，共一百零二頁。 s249。 最先被別離純化的真菌毒素是麥角生物堿〔Ergot Alkaloid, 1875)和青霉酸〔Penicillic Acid, 1913)。,第八十三頁，共一百零二頁。,7.3 毒素(dd242。測定之前需衍生(yǎn shēnɡ)化。,第八十頁，共一百零二頁。經(jīng)液液分配初步(chūb249。,提?。簶悠分新让顾氐奶崛。ǔ２捎脜⒓尤軇┖缶|(zhì)的方法。 美國和加拿大不允許(yǔnxǔ)氯霉素用于最終為人類食用的動物身上，僅批準(zhǔn)用于寵養(yǎng)動物疾病的治療。nq它的抗菌作用是通過在生物體內(nèi)將硝基復(fù)原成亞硝基，而后亞硝基不可逆地同線粒體細(xì)胞結(jié)合，抑制了細(xì)菌細(xì)胞形成所必需的蛋白質(zhì)的合成。 pǔ fēn xī)造成負(fù)面影響，因此在HPLC分析中，經(jīng)常用磷酸鹽等緩沖溶液控制酸度，但由于這類緩沖溶液具有較強(qiáng)的離子抑制作用，不適合HPLCMS法。同時用相同琥珀酸提取組織樣品中四環(huán)素殘留物，經(jīng)螯合柱富集濃縮后，用EDTA/琥珀酸溶液洗脫(xǐ tuō)，洗脫(xǐ tuō)液再經(jīng)XAD2柱進(jìn)行離子交換型吸附，用甲醇洗脫(xǐ tuō)，經(jīng)蒸除溶劑，溶解殘?jiān)炔襟E制得分析樣品，用HPLC/UV檢測。 四環(huán)素類有天然品四環(huán)素、土霉素及半合成品多西環(huán)素、米諾環(huán)素。,7.2.2.2 四環(huán)族抗生素,四環(huán)族抗生素屬快效抑菌劑。 色譜條件：YMC ODSAQ色譜柱，流動相為水和乙腈，以不同的配比進(jìn)行梯度洗脫。,HPLC/MS法測定牛奶中青霉素類方法： 牛奶在34℃，13800r/min高速離心30min，去除蛋白。 目前對于一些常見的青霉素類抗生素殘留最常用、最便捷的檢測方法是ELISA，但化學(xué)檢測方法作為最終評判越來越受到重視，如采用(cǎiy242。)搶救；肌肉或靜脈注射腎上腺素，同時采取其他措施，如吸氧、輸液、人工呼吸、氣管切開等。,第六十九頁，共一百零二頁。青霉素與青霉素結(jié)合蛋白〔PBPs〕結(jié)合后，青霉素的β內(nèi)酰胺環(huán)抑制PBPs中轉(zhuǎn)肽酶的交叉聯(lián)結(jié)反響，阻礙細(xì)胞壁粘肽生成，使細(xì)胞壁缺損；另外青霉素還可激活細(xì)菌的自溶酶，從而使細(xì)菌體破裂死亡。 藥動學(xué)：青霉素G在室溫下粉劑穩(wěn)定，水溶液不穩(wěn)定。)它們對細(xì)菌的選擇性作用強(qiáng)，而對人幾乎沒有毒性，所以是一類高效低毒的抗生素。 第一個被發(fā)現(xiàn)的是青霉素G。,第六十五頁，共一百零二頁。)分析,第六十四頁，共一百零二頁。 但其大批量測定時費(fèi)用高于現(xiàn)有的酶標(biāo)記法。,金標(biāo)免疫分析技術(shù)采用膠體金標(biāo)記，實(shí)質(zhì)上是蛋白質(zhì)等高分子被吸附到膠體金顆粒外表的包被過程。)樣品等優(yōu)點(diǎn)。,放射免疫,第六十一頁，共一百零二頁。,免疫分析(fēnxī)技術(shù)(IA),酶免疫(miǎny236。)分析技術(shù)(IA),免疫(miǎny236。ngpǐn)前處理，操作簡單，適合基層防疫工作者初選CLB殘留的方法。)技術(shù),第五十七頁，共一百零二頁。 但是，電化學(xué)系統(tǒng)儀器和毛細(xì)管電泳儀均不是一般實(shí)驗(yàn)室常備檢測儀器，不利于大量(d224。 pǔ)檢測技術(shù),毛細(xì)管區(qū)帶電泳法(CE),高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法(HPLCMS),氣相色譜傅立葉紅外聯(lián)用法(GC FTIR),薄層色譜法(TLC),第五十五頁，共一百零二頁。,一般含鹽酸克倫特羅的豬肉色特別鮮紅，脂肪非常薄，肉皮緊貼著瘦肉，瘦肉纖維比較疏松，肉皮與瘦肉之間幾乎無肥肉( 肥膘厚度不到1.5cm) 一般健康肉淡紅色肉質(zhì)彈性好 通過這種感官(gǎnguān)識別方法就可以快速簡單定性對動物性食品中有無CLB作出初步判定。n)現(xiàn)狀,第五十一頁，共一百零二頁。,但當(dāng)前瘦肉精卻屢禁不止，原因之一就是國內(nèi)外檢測CLB的方法手段還不夠完善(w225。u)理化指標(biāo),第四十九頁，共一百零二頁。,動物性食品中毒(zh242。pǐn)中毒案例一,第四十七頁，共一百零二頁。,與糖皮質(zhì)激素合用可引起低血鉀，從而導(dǎo)致心律失常。ngzh224。,對人的危害(wēih224。殘留藥物通過食物進(jìn)入人體，大量積蓄使人中毒。它用量大、使用的時間長、代謝(d224。ng)機(jī)理,它的主要作用機(jī)理是作為一種強(qiáng)效沖動劑，選擇性的作用于腎上腺素β2受體上，激活(jī hu243。,瘦肉精用于養(yǎng)殖(yǎngzh237。,上世紀(jì)80年代初，美國脂胺公司研究人員意外地發(fā)現(xiàn)，將一定量的鹽酸克倫特羅參加飼料中，能夠改變營養(yǎng)物質(zhì)的代謝途徑，促進(jìn)動物肌肉特別是骨胳肌蛋白質(zhì)的合成，同時抑制(y236。n suān)克倫特羅；鹽酸(y225。 免疫分析法 放射免疫分析法、酶免疫分析法 優(yōu)點(diǎn)：一次可處理(chǔlǐ)多個樣品、有商品化試劑盒供給，檢測靈敏度高 薄層色譜法 HPLC/MS GC/FTIR,第四十一頁，共一百零二頁。nl237。i)還有碳酰氯〔COCl2〕、甲基硼酸〔MBA〕、五氟一丙酐。,衍生化 GC/MS、GC/FTIR確證前，采用衍生化技術(shù)以提高檢測靈敏度。h233。 凈化 最常用的凈化手段是固相萃取法〔SPE〕，也有人采用免疫親和色譜法、液液凈化法。 β興奮劑檢測進(jìn)行酸解、酶解的必要性：因?yàn)棣屡d奮劑在樣品中往往會與其它成分形成結(jié)合物，如在葡糖苷酸酶、硫酸(li所以，在上述樣品中，檢測是否違法使用β興奮劑作為生長促進(jìn)劑的適宜樣品是肝臟。,第三十五頁，共一百零二頁。i)基的苯胺型〔如克倫特羅〕和苯酚型〔如沙丁胺醇〕兩大類。,7.2.1 β興奮劑的殘留(c225。)快速測試盒〔對指定藥物的篩查〕。,7.2 獸藥,在食用動物飼養(yǎng)過程中廣泛使用藥物，會造成藥物殘留在可食用產(chǎn)品中。,2. 儀器條件 GC/MSMS條件 離子阱溫度(wēnd249。將濃縮液轉(zhuǎn)到儲藏管中，通氮?dú)鈱悠吠迫隕nviCarb柱中。轉(zhuǎn)移40ml上層有機(jī)相于200ml離心瓶中，參加15g無水硫酸鈉充分振蕩，高速離心5min。 例：茶葉中多雜環(huán)類農(nóng)藥殘留測定 用GC/ECD檢測疑心含有的有機(jī)氯農(nóng)藥殘留，再以GC/MSMS進(jìn)行確認(rèn)及定量分析。n) 色譜柱：HP5MS石英毛細(xì)管柱 氮?dú)猓?ml/min 柱溫：60℃〔保持0.5min〕，以10℃/min，至280℃〔保持20min〕 進(jìn)樣口溫度：260℃ 檢測器ECD溫度：280℃ 進(jìn)樣方式：不分流,第三十頁，共一百零二頁。將濃縮液倒入柱內(nèi)，以二氯甲烷淋洗層析柱，收集洗脫液，濃縮至干，再以正己烷定容，供氣相色譜測定。流出液合并后濃縮至1ml。,水果、蔬菜中擬除蟲菊酯殘留量測定 1.前處理 稱取約20g試樣，至于錐形瓶中，參加適量丙酮，振蕩40min，過濾。zh236。 檢測儀器一般用氣相色譜帶電子捕獲檢測器，但也有用HPLC/UV的報(bào)道。也有用索氏提取器用乙醚(yǐ m237。 擬除蟲菊酯在化學(xué)結(jié)構(gòu)上具有共同的特點(diǎn)之一是分子結(jié)構(gòu)中含有數(shù)個不對稱碳原子，因而包含多個光學(xué)和立體異構(gòu)體。,7.1.5 擬除蟲菊酯的殘留(c225。 進(jìn)樣口溫度：250℃。,色譜條件(ti225。xīn)，取上清液。 靈敏度、重復(fù)性和回收率相對較差。,酶抑制法是利用有機(jī)磷殺蟲劑的毒理性質(zhì)建立的一種快速檢測方法。 可以利用GC借助