固定化木瓜蛋白酶與溶液酶性質(zhì)的比較1-wenkub.com
2024-10-03 05:44 本頁面
【正文】 固定化酶的最適反應(yīng)溫度提高了30℃，說明固定化酶的熱穩(wěn)定性好。 mL mg/ mL磷酸緩沖液( mol/ mmol/ mmol/L EDTA,現(xiàn)配現(xiàn)用),分別于30℃、40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃、100℃水浴恒溫10 min,加入相應(yīng)溫度恒溫預(yù)熱的5 mg/mL的酪蛋白溶液1 mL( mol/L ), 相應(yīng)溫度下準(zhǔn)確反應(yīng)10 min,立即加入15%三氯乙酸(TCA)溶液3 mL終止反應(yīng),對照則先加TCA終止反應(yīng),再加5 mg/mL的酪蛋白溶液1 mL,其余與測定管相同。 固定化酶溶液酶最適溫度的比較 實(shí)驗(yàn)方法木瓜蛋白酶 酪蛋白 5mg/ml三氯乙酸 15%戊二醛 5%磷酸緩沖液 （ mol/ mmol/ mmol/L EDTA,）參考相關(guān)文獻(xiàn)可知[4]，以卵清蛋白為載體固定化木瓜蛋白酶的最佳條件。 對于木瓜蛋白酶的固定，則用變性的卵清蛋白直接作為載體, 結(jié)合傳統(tǒng)的交聯(lián)固定法, 用戊二醛作交聯(lián)劑，形成共價鍵，成功地固定了木瓜蛋白酶,主要是基于經(jīng)濟(jì)效益和安全兩個方面的考慮。用卵清蛋白固定化的木瓜蛋白酶在耐熱性、熱穩(wěn)定性、耐酸堿等方面都較溶液酶有明顯提高。木瓜蛋白酶的固定化始于20世紀(jì)60年代初，但多數(shù)方法不是因?yàn)椴牧蟻碓蠢щy，就是因?yàn)樵噭┒拘暂^大而影響了其在工業(yè)上應(yīng)用。木瓜蛋白酶由212個氨基酸殘基組成，并含有3對二硫鍵，是一種含疏基(SH)肽鏈的內(nèi)切酶，具有蛋白酶和酯酶的活性，具有較廣泛的特異性[1]。關(guān)鍵詞：木瓜蛋白酶；固定化；卵清蛋白；戊二醛Comparison of the properties immobilized papain and soluble papainLiu Jing Wan ShanxiaAbstract: In this paper, the immobilized papain with the nature of a preliminary nature of the soluble papain denatured egg white protein as the support with glutaraldehyde as the crosslinker. The result showed that:pared with the soluble papain,immobilized papain increased the opti
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