【正文】 樣品處理是保健食品分析檢測(cè)過(guò)程的重要環(huán)節(jié)，約占分析檢測(cè)時(shí)間的60%?？偨Y(jié)與討論4種含低聚糖樣品中6種成分的含量情況糖成分的保健食品功效成分的含量測(cè)定方法，以制定該類產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。經(jīng)試驗(yàn)研究后認(rèn)為采用流動(dòng)相為乙晴水（70:30），柱溫25℃，分別精密秤取已知含量的1號(hào)，每3份1組，按高、中、低3個(gè)水平分別精密加入一定量對(duì)照品（相當(dāng)于樣品中各成分含有量的80%，100%，120%），按“”供試品溶液制備項(xiàng)下操作，結(jié)果6種成分的回收率分別為蔗糖%（%），%（%），棉子糖%（%），%（%），蔗果五糖%（%），%（%）。以信噪比10:1時(shí)的進(jìn)樣量作為定量限,測(cè)得蔗糖、蔗果三糖、棉子糖、蔗果四糖、蔗果五糖、。結(jié)果表明蔗糖在～、～、棉子～、～、～、～。mL1的溶液，作為對(duì)照品溶液。mL2色譜條件 色譜柱AgilentzorbaxNH2（mm150mm,5μm）,柱溫25℃；研究目標(biāo)1. 建立多成分同時(shí)測(cè)定低聚果糖和大豆低聚糖類成分的分析方法2. HPLCRID法3. 蔗糖、蔗果三糖、棉籽糖、蔗果四糖、蔗果五糖、水蘇糖共六種成分HPLCRID法用于6種成分的測(cè)定蔗糖蔗果三糖棉籽糖蔗果四糖蔗果五糖水蘇糖色譜條件1儀器與試劑Waters515高效液相色譜儀，2414視差折光檢測(cè)器。低聚果糖低聚果糖低聚果糖（Fructooligosaccharides，簡(jiǎn)稱FOS）是指14個(gè)果糖基以β（2→1）糖苷糖連接在蔗糖的D果糖基上而形成的蔗果三糖（GF2）、蔗果四糖（GF3）、蔗果五糖（GF4）和蔗果六糖（GF5）的混合物。低聚果糖低聚果糖(fructooligosaccharides,FOS)是以蔗糖為原料經(jīng)微生物酶作用而制得的由葡萄糖和果糖組成的雜低聚糖混合物，包括蔗果三糖(GF2)、蔗果四糖(GF3)、蔗果五糖(GF4)、蔗果六糖(GF5)等低聚糖。其中棉子糖和水蘇糖被稱為大豆低聚糖的主要功效成分。2. 需要補(bǔ)充：u 從一般膳食習(xí)慣上看,每天攝取的低聚糖往往很難達(dá)到推薦量標(biāo)準(zhǔn)。(5)促進(jìn)生成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):由于雙岐桿菌在腸道內(nèi)能自然合成微生素BBBB1煙酸和乙酸。攝取功能性低聚糖來(lái)促使腸道內(nèi)雙岐桿菌自然增殖顯得更切實(shí)可行。而攝入低聚糖可促使雙岐桿菌增殖。人體腸胃道內(nèi)沒(méi)有水解這些低聚糖(除異麥芽酮糖之外)的酶系統(tǒng)，因此它們不被消化吸收而直接進(jìn)入大腸內(nèi)優(yōu)先為雙歧桿菌所利用，是雙歧桿菌的增殖因子低聚糖概況1. 1999年我國(guó)公布的 “功能性低聚糖通用技術(shù)規(guī)則行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)”對(duì)功能性低聚糖的定義為：（1）功能性低聚糖（functionaloligosaccharide）是由2～10個(gè)相同或不同的單糖，以糖苷鍵聚合而成；（2）具有糖類某些共同的特性，可直接代替糖料作為甜食品配料，但不被人體胃酸、胃酶降解，不在小腸吸收，可到達(dá)大腸部；（3）具有促進(jìn)人體雙岐桿菌的增殖等生理功能。3. 對(duì)特定品種、特定提取物、或特定工藝產(chǎn)品的常規(guī)例行檢測(cè)有較大的優(yōu)勢(shì)。3. 標(biāo)準(zhǔn)概況：目前只控制12種成分大豆異黃酮類成分概況R 1R 2ROOH中文名稱3英文名稱R1R2R3大豆苷元DaidzeinOHHH大豆苷DaidzinOGluHH染料木素GenisteinOHHOH染料木苷GenistinOGluHOH黃豆黃素GlyciteinOHOCH3H黃豆黃苷GlycitinOGluOCH3H大豆異黃酮類成分概況1. 目前大豆異黃酮類成分常見(jiàn)的分析方法：u 紫外分光光度法u 薄層掃描法u 高效液相色譜法2. 這些方法在準(zhǔn)確性、合理性、可操作性等方面均有欠缺，大多數(shù)方法只報(bào)道了測(cè)定其中1～2個(gè)成分的含量，不能較為全面地反應(yīng)產(chǎn)品的真實(shí)質(zhì)量。標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備同“中國(guó)勁酒中淫羊藿苷的含量測(cè)定”項(xiàng)下。以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，以淫羊藿苷標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣量（181。，置25mL量瓶中加甲醇溶解并稀釋至刻度，作為對(duì)照品溶液。濃度：）、置100mL錐形瓶中，揮干溶劑，取本品(批號(hào):QLS050107)，共9份，按樣品溶液制備方法制備供試液，按給定色譜條件測(cè)定，計(jì)算回收率測(cè)得量樣品中含量回收率%=100%對(duì)照品加入量回收率試驗(yàn)結(jié)果樣品中含量(mg)對(duì)照品加入量(mg)測(cè)得量 (mg)回收率%平均值總平均%RSD%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%標(biāo)準(zhǔn)起草說(shuō)明和方法學(xué)驗(yàn)證9專屬性，按樣品溶液制備方法制備。標(biāo)準(zhǔn)起草說(shuō)明和方法學(xué)驗(yàn)證淫羊藿苷檢測(cè)限色譜圖標(biāo)準(zhǔn)起草說(shuō)明和方法學(xué)驗(yàn)證（濃度為），置10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。（見(jiàn)附圖1）標(biāo)準(zhǔn)起草說(shuō)明和方法學(xué)驗(yàn)證1200000010000000800000060000004000000200000000 1 2 3 4 5 6淫羊藿苷進(jìn)樣量（μg）淫羊藿苷標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)樣量（μg）峰面積積分值216452428011850451120729921414143235671538747911020132峰面積標(biāo)準(zhǔn)起草說(shuō)明和方法學(xué)驗(yàn)證5檢測(cè)限和定量限（濃度為），置100mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。精密量取標(biāo)準(zhǔn)品溶液1mL，2mL，3mL，5mL，10mL，分別置10mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。濾過(guò)，取續(xù)濾液。：深圳市寶和堂保健品有限公司出品。技術(shù)參數(shù)%～%之間。L，以峰面積對(duì)進(jìn)樣量（181。L。 紫外檢測(cè)器：檢測(cè)波長(zhǎng)270nm。高效液相色譜法測(cè)定保健食品中的淫羊藿苷HPLCdeterminationofIcariineinhealthfood分析步驟試樣處理：固體試樣：取20粒以上膠囊、10g以上丸劑試樣進(jìn)行粉碎，混勻，根據(jù)樣品含量，～（），精密加入50mL稀乙醇，稱重，超聲提取60分鐘，取出，放冷至室溫，用稀乙醇補(bǔ)重，過(guò)濾，取續(xù)濾液。試劑除非另有說(shuō)明，在分析中僅使用重蒸水。耐用性在測(cè)定條件有小的變動(dòng)是，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度。最佳測(cè)定范圍（optimumconcentrationrange），在限定誤差能滿足要求的前提下，特定方法的測(cè)定下限至測(cè)定上限之間的濃度范圍。通常取SN=10Nu對(duì)于消除了系統(tǒng)誤差的特定方法來(lái)說(shuō)，精密度要求越高，則定量下限高出檢測(cè)限越多。S=3NS——最小響應(yīng)值（峰高或峰面積）N——噪音信號(hào)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的量S最低檢出量= ————————————標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的響應(yīng)值注：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的量盡量接近最低檢出量，較為準(zhǔn)確。A=kc+a檢測(cè)限（limitofdetection,LOD）信水平內(nèi)可以從樣品中檢測(cè)到待測(cè)物質(zhì)的最小濃度或最小量。4. 樣品中某些組分對(duì)被測(cè)成分產(chǎn)生的干擾（正、負(fù)），有時(shí)很難靠回收率實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)。準(zhǔn)確度的評(píng)價(jià)方法回收率X1X0P（%）= ————100MP ——加入的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的回收率M——加入標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的量X1——加入標(biāo)準(zhǔn)樣品的測(cè)定值X0——未知樣品的測(cè)定值用回收率評(píng)價(jià)準(zhǔn)確度需注意事項(xiàng)1. 不同濃度水平，加入量與樣品濃度相近（80%、100%、120%），不能超過(guò)方法的線性范圍，加標(biāo)量不得超過(guò)待測(cè)物含量的3倍。精密度反映了隨機(jī)誤差的大小。 分析方法的選擇不溶性固形物物。 對(duì)于每日攝入量需嚴(yán)格控制的化合物，如褪黑素等，其指標(biāo)范圍上限折算成每日攝入量不得大于允許攝入量216。 一般性功效成分（或標(biāo)志性成分）按≥指標(biāo)值標(biāo)示，如總氨基酸、粗多糖、膳食纖維等216。 無(wú)相關(guān)檢測(cè)方法的，申請(qǐng)人應(yīng)提供詳細(xì)的檢測(cè)方法和方法學(xué)研究及驗(yàn)證結(jié)果。檢驗(yàn)要求1. 功效成分或指標(biāo)性成分、含量及其檢驗(yàn)方法u 根據(jù)產(chǎn)品及原料確定，應(yīng)與申報(bào)的功能有一定的關(guān)系u 功效成分或指標(biāo)性成分、含量及其檢驗(yàn)方法應(yīng)分別列出u 依據(jù)以下二方面確定產(chǎn)品的功效成分（或標(biāo)志性成分）并說(shuō)明理由216。藥檢系統(tǒng)檢驗(yàn)要求報(bào)的保健功能相適應(yīng)的功效成分或特征成分，申報(bào)時(shí)須檢測(cè)配方中主要原料所含的功效成分或特征成分。保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范（2003年版）216。衛(wèi)生部健康相關(guān)產(chǎn)品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)認(rèn)定與管理辦法（衛(wèi)法監(jiān)發(fā)［1999］第76號(hào)）216。保健食品功效成分檢測(cè)技術(shù)與方法提綱一．保健食品的檢驗(yàn)有關(guān)要求二．保健食品理化檢驗(yàn)及常用的分析方法介紹三．保健食品功效成分的檢測(cè)四．保健食品功效成分檢測(cè)其它有關(guān)問(wèn)題一、保健食品的檢驗(yàn)有關(guān)要求檢驗(yàn)依據(jù)檢驗(yàn)要求主要檢驗(yàn)依據(jù)216。衛(wèi)生部發(fā)布的與保健食品相關(guān)的文件216。食品國(guó)標(biāo)GB/T5009——2003216。檢驗(yàn)要求1. 保健食品評(píng)審專家委員會(huì)可根據(jù)產(chǎn)品的具體配方、工藝等相關(guān)資料，要求申報(bào)單位檢測(cè)指定的項(xiàng)目。 與申報(bào)保健功能有關(guān)的功效成分216。研究及驗(yàn)證結(jié)果包括檢驗(yàn)方法、線性范圍、精密度、準(zhǔn)確度和至少5批加樣回收率等內(nèi)容及驗(yàn)證報(bào)告檢驗(yàn)要求功效成分、特征成分、營(yíng)養(yǎng)成分及衛(wèi)生學(xué)指標(biāo)的檢測(cè)方法應(yīng)根據(jù)其產(chǎn)品適用的方法學(xué)范圍選擇以下進(jìn)行測(cè)定：國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)衛(wèi)生部部頒標(biāo)準(zhǔn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)國(guó)際上權(quán)威分析方法檢驗(yàn)要求，企業(yè)應(yīng)建立自己的企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。 功效成分（或標(biāo)志性成分）需要限定范圍的，可按指標(biāo)值177。 ，礦物質(zhì)u 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)編制說(shuō)明中應(yīng)詳細(xì)提供功效成分（或標(biāo)志性成分）指標(biāo)值的確定依據(jù)及理由二、保健食品理化檢驗(yàn)及常用的分析方法介紹保健食品常見(jiàn)的檢驗(yàn)項(xiàng)目保健食品檢驗(yàn)常用的分析方法保健食品常見(jiàn)的檢驗(yàn)項(xiàng)目1. 感官指標(biāo)（性狀）2. 水分3. 灰分4. 凈含量與負(fù)偏差5. 崩解時(shí)限6. 微生物限度7. 重金屬（Pb、As、Hg）8. 農(nóng)藥殘留量（六六六、滴滴涕）9. 功效成分10. 其它保健食品檢驗(yàn)常用的分析方法1. 感官檢查法2. 物理檢查法3. 化學(xué)分析法4. 物理化學(xué)分析法感官檢查法，即視覺(jué)、嗅覺(jué)、味覺(jué)等來(lái)鑒定被檢物質(zhì)的外觀、顏色、氣味和滋味等?；瘜W(xué)分析法u化學(xué)反應(yīng)的顏色、沉淀u重量分析216。 分析方法學(xué)驗(yàn)證的內(nèi)容常用標(biāo)準(zhǔn)差（S）或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）表示。2. 用回收率評(píng)價(jià)準(zhǔn)確度并非完全可靠。5. 如果可能，用不同方法比較。即分析方法所能識(shí)別的極限