人衛(wèi)8版-核酸的結(jié)構(gòu)與功能-wenkub.com
2024-08-23 01:40 本頁面
【正文】 ?體外重組 DNA技術(shù)中的重要工具酶 。 核酸酶 是指所有可以水解核酸的酶?！? 180。 RNA酶 (ribonuclease, RNase)： 專一降解 RNA。 ? 核酸分子雜交 (hybridization) ? 核酸分子復(fù)性和雜交 ?研究 DNA分子中某一種基因的位置 。 ?熱變性的 DNA經(jīng)緩慢冷卻后即可復(fù)性 ， 這一過程稱為 退火 (annealing) 。 解鏈過程中 ， 紫外吸光度的變化達到最大變化值的一半時所對應(yīng)的溫度 。 一、核酸分子具有強烈的紫外吸收 ? 堿基的紫外吸收光譜 ?DNA或 RNA的定量 A260 = 相當于 50μg/ml 雙鏈 DNA(dsDNA) 40μg/ml 單鏈 DNA (ssDNA or RNA) 20μg/ml 寡核苷酸 ?確定樣品中核酸的純度 純 DNA: A260/A280 = 純 RNA: A260/A280 = ? 紫外吸收的應(yīng)用 二、 DNA變性是雙鏈解離為單鏈的過程 某些理化因素導(dǎo)致 DNA雙鏈互補堿基對之間的氫鍵發(fā)生斷裂， DNA雙鏈解離為單鏈 的過程。miRNAs主要是通過結(jié)合 mRNA而選擇性調(diào)控基因的表達。 是細胞內(nèi)具有催化功能的一類小分子 RNA， 具有催化特定 RNA降解的活性 ， 在 RNA的剪接修飾中具有重要作用 。 snRNA有 5種，分別稱為 U U U U U6，它們與多種蛋白形成復(fù)合體，參與真核細胞 hnRNA的內(nèi)含子加工剪接（第十六章）。許多已知的 lncRNAs由 RNA聚合酶 Ⅱ 轉(zhuǎn)錄并經(jīng)可變剪切形成，通常被多聚腺苷酸化。 3 ′5 ′反 密 碼 子密 碼 子m R N A酪 氨 酸U A CGUAACC3 ′5 ′4. tRNA的反密碼子識別 mRNA的密碼子 目錄 ?核糖體 RNA(ribosomal RNA， rRNA)是細胞內(nèi)含量最多的 RNA(80％ )。 ? 3?末 端的 A與氨基酸以酯鍵相連 生成氨基酰 tRNA 。 ?由 74～ 95核苷酸組成； ?占細胞總 RNA的 15%； ?具有很好的穩(wěn)定性 。 mRNA核內(nèi)向胞質(zhì)的轉(zhuǎn)位 mRNA的穩(wěn)定性維系 翻譯起始的調(diào)控 ? 帽子結(jié)構(gòu)和 多聚 A尾的功能 目錄 3. mRNA堿基序列決定蛋白質(zhì)的氨基酸序列 ?從 mRNA分子 5?末端起的第一個 AUG開始 ，每 3個核苷酸為一組稱為 密碼子 (codon) 。5 39。 非 翻 譯 區(qū)5 39。 ? 5?末端的帽子 (cap)結(jié)構(gòu)和 3?末端的多聚 A尾 (polyA tail)結(jié)構(gòu) 。 ?生物體內(nèi) mRNA的 豐度最小 、 種類最多 、 大小也各不相同 、 壽命最短 。 ? RNA通常以單鏈的形式存在 ， 但有復(fù)雜的局部二級結(jié)構(gòu)或三級結(jié)構(gòu) 。 ? 基因 是攜帶遺傳信息的 DNA片段 ， 它們的序列信息意義及其在 DNA整個分子上的排布特點將在第十三章詳述 。 ?著絲粒（ centromere） :兩個染色單體的連接位點，富含 A、 T序列。 ?染色質(zhì)的基本單位是核小體 (nucleosome)。 （一）原核生物 DNA的環(huán)狀超螺旋結(jié)構(gòu) 原核生物 DNA多為環(huán)狀 的雙螺旋分子 ，以負超螺旋的形式存在，平均每 200堿基就有一個超螺旋形成。 GGTTTTTTGT GTTG5 39。 4. 堿基對的疏水作用力和氫鍵共同維持著 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定 目錄 ? 堿基堆積作用力 目錄 （三） DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的多樣性 目錄 （四） DNA的多鏈結(jié)構(gòu) ?在酸性的溶液中 ， 胞嘧啶的 N3原子被質(zhì)子化 ，可與鳥嘌呤的 N7原子形成氫鍵；同時 ， 胞嘧啶的 N4的氫原子也可與鳥嘌呤的 O6形成氫鍵 ， 這種氫鍵被稱為 Hoogsteen氫鍵 。 ? DNA 的 兩 條 鏈 則 互 為 互 補 鏈(plementary strand)。 ?雙螺旋結(jié)構(gòu)的直徑為 ， 螺距為 。 ?提出了 DNA分子雙螺旋結(jié)構(gòu) (double helix)模型 。 自然界中的 DNA和 RNA的長度可以高達幾十萬個堿基 。 ?定義 核酸中核苷酸的排列順序 。 羥 基O POO OOHOHHHHC H2POO OOHOHHHC H2HPOO OOHHHHHC H2OPOO OOHO HHHHHC H2堿 基核 酸 方 向交替的 磷酸 基團 和戊糖 構(gòu) 成 了 DNA 的骨架 (backbone)。末 端 C G A 磷酸二酯鍵 磷酸二酯鍵 目錄 5 180。 煙酰胺腺嘌呤二核苷酸， nicotinamide adenine dinucleotide, NAD+）， 目錄 ? 構(gòu)成 RNA的堿基、核苷以及核苷酸 堿基 核苷 核苷酸 A 腺苷adenosine 腺苷一磷酸 adenosine monophosphate, AMP G 鳥苷guanosine 鳥苷一磷酸 guanosine monophosphate, GMP C 胞苷cytidine 胞苷一磷酸 cytidine monophosphate, CMP U 尿苷 uridine 尿苷一磷酸 uridine monophosphate, UMP 目錄 ? 構(gòu)成 DNA的堿基、核苷、核苷酸 堿基 脫氧核苷 脫氧核苷酸 A 脫氧腺苷 deoxyadenosine 脫氧腺苷一磷酸 deoxyadenosine monophosphate, dAMP G 脫氧鳥苷deoxyguanosine 脫氧鳥苷一磷酸 deoxyguanosine monophosphate, dGMP C 脫氧胞苷deoxycytidine 脫氧胞苷一磷酸
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