細(xì)胞工程-動物細(xì)胞工程-wenkub.com
2025-08-12 20:38 本頁面
【正文】 該實(shí)驗(yàn)方案的目的是 __________ A是從小鼠的脾臟中取得_______,該細(xì)胞能夠產(chǎn)生 ______ C過程指細(xì)胞培養(yǎng)，該過程包括_____培養(yǎng)和 _____培養(yǎng)兩個階段，其中 _____代以內(nèi)的的細(xì)胞屬于細(xì)胞株。請回答： （ 1）試管中除融合的雜種細(xì)胞外，還有 種融合細(xì)胞。 (4)單克隆抗體注入體內(nèi)后可以自動追蹤抗原 (病原體或癌變細(xì)胞等 )并與之結(jié)合，而絕不攻擊任何正常細(xì)胞，故稱為 “ 生物導(dǎo)彈 ” 這是利用了 _____________ 。 單克隆抗體的應(yīng)用 一種誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法 一種新細(xì)胞 滅活病毒 雜交瘤細(xì)胞 一個優(yōu)勢 單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢 例題 1： 1975年，英國劍橋大學(xué)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的科勒和米爾斯坦，把小鼠的淋巴細(xì)胞（脾細(xì)胞）和小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合起來，成為雜交瘤細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)在體外大量生產(chǎn)抗體的目的。 ? 生物導(dǎo)彈： 抗癌細(xì)胞的單克隆抗體 +放射性同位素 +化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素 。 第 1次篩選得到雜交瘤細(xì)胞（多種）。 “克隆化培養(yǎng)” 每個雜交瘤細(xì)胞，并進(jìn)行 “單一抗體檢測”，“檢測陽性”的孔內(nèi)即是所需要的雜交瘤細(xì)胞。GG） 4. 第一次篩選：在“ 選擇培養(yǎng)基培養(yǎng) ”上培養(yǎng)篩選 雜交瘤細(xì)胞（只有 BG雜交瘤細(xì)胞存活。 如何篩選出能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞？ 1. 動物特異性免疫 2. 分離 B淋巴細(xì)胞（ B）；找到骨髓瘤細(xì)胞（ G）。 加入氨基喋呤后，使 D合成途徑阻斷，僅有 D合成途徑的 及其彼此融合的細(xì)胞不能增殖。 ◆ 利用 技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞。 B淋巴細(xì)胞？ B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞放在一起，有幾種融合方式？ ? ? ？ 制備過程提示 : 制備單克隆抗體 ◆ 每一個 只分泌一種特異性抗體。 二：動物細(xì)胞融合的成功應(yīng)用 —— 單克隆抗體的制備 思考 抗原 吞噬細(xì)胞攝取處理 T細(xì)胞 暴露、呈遞 B細(xì)胞 直接刺激 漿細(xì)胞 增殖、分化 抗體 產(chǎn)生 從動物血清中分離 淋巴因子 獲取抗體的傳統(tǒng)方法 該方法的缺點(diǎn)是？ 傳統(tǒng)獲得抗體方法的缺點(diǎn)： 產(chǎn)量低，純度低，特異性差 如何獲得大量的、特異性強(qiáng)的抗體？ 利用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 克隆單一的經(jīng)免疫的 B細(xì)胞 這就是 “ 單克隆抗體 ” 單克隆抗體的制備 — 極富創(chuàng)造性的方案 將能夠產(chǎn)生特定抗體的 B淋巴細(xì)胞 和具有無限增殖能力的 骨髓瘤細(xì)胞 融合在一起，形成雜交瘤細(xì)胞。 動物細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用 ? 細(xì)胞融合技術(shù)突破了 有性雜交 的局限，使遠(yuǎn)緣雜交 成為可能。 細(xì)胞融合是正常的生命活動 兩個細(xì)胞正在融合 受精作用 動物細(xì)胞融合 誘導(dǎo)融合的因素 ? 生物法： 滅活的病毒 誘導(dǎo)融合 .(利用 滅活仙臺病毒 是動物細(xì)胞融合所特有的。 一、動物細(xì)胞融合 ◆ 雜交細(xì)胞： 融合后形成的具有原來 兩個或多個細(xì)胞遺傳信息 的 單核細(xì)胞 成為雜交細(xì)胞 。 將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞 顯微操作去除卵母細(xì)胞中的核 受體卵母細(xì)胞的采集與體外培養(yǎng) 胚胎移植入代孕母牛體內(nèi) 妊娠分娩與供體遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)相同的犢牛。 若黑面綿羊的基因型為 AA,白面綿羊的基因型為 aa，則克隆羊的基因型為 核移植 胚胎移植 白色 多利全部的核基因都來自白面綿羊 aa ◆ 取供體細(xì)胞傳代培養(yǎng) 10代以內(nèi)的細(xì)胞 .為什么？ ◆ 用的是去核的減數(shù)第二次分裂中期細(xì)胞（ MⅡ 中期 ）為什么？ ◆ 激活方法： ◆ 激活目的： ◆ 促融方法：電刺激 ◆ 胚胎移植至代孕受體內(nèi) 妊娠、分娩 2）核移植流程 供體：優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)奶牛 受體：普通奶牛（卵母細(xì)胞的采集與培養(yǎng)） ，易操作。 二、生物的性狀不僅與遺傳物質(zhì)有關(guān)，還受環(huán)境的影響。 動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用 : 蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn) 如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體 應(yīng)用于基因工程 主要用于作為受體細(xì)胞 檢測有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性
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