第十六章基因工程和蛋白質(zhì)工程簡(jiǎn)介-wenkub.com
2025-07-29 13:26 本頁(yè)面
【正文】 陣列檢測(cè)可以大大提高檢測(cè)效率，減少工作量，增加可比性，所以芯片技術(shù)也是傳感器技術(shù)的發(fā)展。 （ 2） PCR的應(yīng)用 （ 1） PCR的原理 PCR技術(shù) 原理 示意圖 靶序列 變性和引物復(fù)姓 循環(huán) 1 循環(huán) 2 循環(huán) 3 變性和引物復(fù)姓 鏈延伸 Tag酶 鏈延伸 PCR技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用 ?用于合成特異探針； ?用于 DNA的測(cè)序； ? 將逆轉(zhuǎn)錄與 PCR相偶聯(lián) （ RTPCR）； ?用于基因定位誘變； ?末知序列的 PCR擴(kuò)增； ?基因組序列的比較研究； ?用于臨床診斷。重復(fù)此過(guò)程， DNA以指數(shù)方式擴(kuò)增。 RNA病毒的基因組是 RNA，也必須將RNA先轉(zhuǎn)錄成 cDNA，再建立文庫(kù)。 cDNA文庫(kù) 真核細(xì)胞基因是斷裂的，在基因最后產(chǎn)物中表達(dá)的編碼序列（外顯子）被非編碼序列（內(nèi)含子）分隔開，需經(jīng) RNA轉(zhuǎn)錄后加工過(guò)程才使編碼序列拼接在一起。 三．基因文庫(kù)與 cDNA文庫(kù) 1． 基因文庫(kù) （ genomic library） cDNA文庫(kù) （ plemental DNA library） 2 . 文庫(kù)的構(gòu)建 基因文庫(kù) 基因文庫(kù)是指整套由基因組 DNA片段插入克隆載體獲得的分子克隆之總和。 DNA的測(cè)序儀示意圖 puter analysis 凝膠中 DNA移動(dòng)方向 樣品槽 激光器 輸入光學(xué)系統(tǒng) 成象透鏡 聚焦透鏡 高靈敏度相機(jī) 旋光鏡 /棱鏡組件 DNA的化學(xué)測(cè)序示意圖 反應(yīng)試劑 G反應(yīng)：硫酸二甲酯 G+A反應(yīng)：甲酸 T+C反應(yīng)：肼 C反應(yīng)： NaCl+肼 測(cè)序技術(shù)進(jìn)展 同位素標(biāo)記到熒光標(biāo)記 ,平板電泳到毛細(xì)管電泳 多色熒光標(biāo)記 毛細(xì)管電泳 單色熒光標(biāo)記 平板電泳 同位素標(biāo)記 平板電泳 A C G T A C G T 測(cè)序圖譜 T A TTG CAT TG TC TGCATTG T C T 引物標(biāo)記法測(cè)序 (Dye Primer) 一個(gè)樣本， 4個(gè)反應(yīng)。 放射性標(biāo)記的引物 TGTT A C T G ddG ddG ddG ddG GACTGAAGCTGTT 3180。 TCAACGATGG 5180。 GG 5180。 生物酶工程示意圖 酶的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)功能 新酶分子藍(lán)圖 選擇性修飾方案 突變酶 新酶 克隆酶 產(chǎn)品 效用 發(fā)展 酶基因 遺傳設(shè)計(jì) 遺傳修飾 DNA重組技術(shù) DNA重組技術(shù) 蛋白質(zhì)技術(shù)和核酸技術(shù)的相互增強(qiáng) 插入表達(dá)載體 轉(zhuǎn)化寄主細(xì)胞 推導(dǎo)出AA順序 制備合成肽 制備對(duì)所編碼蛋白 專一的抗體 基因或cDNA 蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì) 測(cè)定出AA順序 合成 cDNA探針 制備專一的抗體 沉淀核糖體分離 mRNA 用 South
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