植物組織培養(yǎng)的一些注意事項-wenkub.com
2025-06-27 05:38 本頁面
【正文】 嫁接 有些試管苗試管內(nèi)難生根或生根苗不能在生產(chǎn)上應(yīng)用，必須進行嫁接，以解決生根和異砧結(jié)合問題。多效唑處理后的小苗?高度降低，從而使其矮壯?發(fā)根快，根數(shù)多，從而大大增加了根系吸收養(yǎng)料的能力?葉色濃綠，葉綠素含量增加，從而加強了其移栽后的自養(yǎng)能力。(4) 、試管苗葉光合作用能力極低：試管苗生活在含糖培養(yǎng)基中，光和氣體交換受阻，因此光合作用能力弱。 生理功能方面 (1) 、根無吸收功能或極低：試管苗根系吸收功能極低，僅為沙培苗的1/18，溫室苗的1/39，低濕度下葉片大量失水，而根系又不能有效地吸收補充，故極易萎蔫、干枯。（二）、試管苗的移栽A、試管苗移栽后易于死亡的原因試管苗一般在高濕、弱光、恒溫下異氧條件下培養(yǎng)，出瓶后若不保濕極易失水而萎蔫死亡。 試管外生根有些植物種類在試管內(nèi)難以生根，或有根但與莖維管束不相通，或根與莖聯(lián)系差，或有根無根毛，或吸收功能極弱不易成活，此時可采用試管外生根的方法，把生根和馴化過程聯(lián)系起來，即可大幅度降低成本，又可提高移栽成活率。（8） 、pH值 ~。（5） 、其他物質(zhì) 間苯三酚、脯氨酸、核黃素、活性炭等等?？梢娚囵B(yǎng)多數(shù)使用生長素，大多以IAA、IBA、NAA單獨用或配合使用，或與低濃度激動素配合使用。（3） 植物生長調(diào)節(jié)劑 據(jù)報道單用一種生長素的占51..5%，%。（2） 、基本培養(yǎng)基 大多數(shù)使用低濃度的MS培養(yǎng)基，其中不少使用1/2MS或1/3MS培養(yǎng)基。根源基的形成和生長素有關(guān)，根源基的伸長可以在沒有外源生長素下實現(xiàn)。 試管苗的生根與移栽（1） 試管苗的生根 試管內(nèi)生根1） 、根發(fā)生過程 植物離體培養(yǎng)根的發(fā)生都來自不定根。3） 、繼代培養(yǎng)時間長短 關(guān)于繼代培養(yǎng)次數(shù)對繁殖率的影響的報道不一。第 也可能是細胞染色體出現(xiàn)畸變，數(shù)目增加或丟失。 保持試管苗的繼代培養(yǎng) 試管苗的繼代方法1） 、液體培養(yǎng)2） 、固體培養(yǎng) 影響試管苗繼代培養(yǎng)的因素及解決措施1） 、馴化現(xiàn)象：有些植物在開始的繼代培養(yǎng)中需要添加生長調(diào)節(jié)物質(zhì), 其后加入少量或不必加入生長調(diào)節(jié)物質(zhì)就可以生長, 此現(xiàn)象就叫做“ 馴化”?，F(xiàn)在胚狀體發(fā)生還不普遍或產(chǎn)生的胚狀體難以成株或成株率太低, 以及遺傳性尚不穩(wěn)定, 故僅在有限植物中應(yīng)用。促進外植體形成不定芽, 要使用一定量的細胞分裂素和生長素, 一般濃度不能過高。在實際操作中高濃度細胞分裂素和低濃度生長素的配比，既能提高腋芽的增殖速度，也能保證腋芽健壯生長。~，~。1）、改進培養(yǎng)基：?、不同的植物材料需要使用不同類型的培養(yǎng)基。不過實際值遠比理論值為低。 試管苗的增殖與繼代培養(yǎng)（一）、加快試管苗的繁殖速度試管苗繁殖類型試管繁殖類型共有五種：微型扦插型、叢生芽增殖型、器官發(fā)生型、胚狀體發(fā)生型、原球莖發(fā)生型，一定要注意其遺傳穩(wěn)定性, 前三種途徑一般能保持遺傳穩(wěn)定性。2） 、褐變的防止選擇適當(dāng)?shù)耐庵搀w和培養(yǎng)條件： 選擇適當(dāng)?shù)耐庵搀w和培養(yǎng)條件是克服褐變的最主要的手段。在外植體最適宜的脫分化條件下, 分生能力強的細胞大量增殖, 酚類的氧化會受到抑制。培養(yǎng)基成分過高的無機鹽濃度會引起棕櫚科植物外植體酚的氧化。在枝條上取芽的時期及所取部位不同也有區(qū)別, 如歐洲栗取1 月后半月的芽培養(yǎng)則醌的形成少, 而在5 月～6 月取芽培養(yǎng)則醌類物質(zhì)發(fā)生嚴重。褐變的影響因素是復(fù)雜的, 隨植物種類、基因型、外植體的部位及生理狀況等的不同而危害的程度也有區(qū)別。它可隨培養(yǎng)材料、用具等傳播。在工作中特別要注意避免交叉感染, 雙手必須清潔, 工具則用一次即需消毒一次。如將切好的外植體放入1 . 3%次氯酸鹽溶液中(商品漂白粉25%的溶液)消毒30min , 然后用無菌水沖洗3 次, 再放在無菌條件下,次日用2 . 6%次氯酸鈉滅菌30min , 然后用無菌水沖洗3 次。用莖尖作外植體時, 應(yīng)在室內(nèi)或無菌條件下對枝條進行預(yù)培養(yǎng)。 老的材料比幼嫩的材料帶菌多。 其次,一定要選擇合適的培養(yǎng)基, 激素及其他添加物。第一號實驗是光照時間10h/ d、光照強度1000lx、pH 值5 . BA 濃度2 . 0、NAA 濃度0 . 蔗糖濃度4% , 其他實驗依次類推。字母L 右下角號碼8 表示它有8 個實驗要做, 括號內(nèi)的指數(shù)7 表示這張表所安排的實驗最多可考察7 個因素(也可安排2 個～6 個, 超過7 個要選擇其他正交表) , 底數(shù)2 表示被考察的因素只要求兩個水平。正交設(shè)計是多因素分析的有力工具, 它可以很方便的從眾多因素中選出主要影響因素及最佳水平, 因為它可以用較少的實驗次數(shù)得到較多的信息。將瓶口靠近酒精燈火焰, 瓶口傾斜, 以免空氣中的微生物落入瓶中,將瓶口外部在燈焰上燎數(shù)秒鐘, 將灰塵雜物等固定在原處, 然后用鑷子將外植體送入瓶中, 材料在培養(yǎng)容器內(nèi)的分布要均勻, 以保證必要的營養(yǎng)面積和光照條件。工作人員的呼吸所產(chǎn)生的污染, 主要是在接種時談話或咳嗽所引起的, 因此, 在操作時應(yīng)禁止談話并應(yīng)戴上口罩。污染的主要來源是空氣中的細菌和真菌孢子, 因此, 每次接種前應(yīng)進行地面的清潔衛(wèi)生工作, 并用70%酒精噴霧使空氣的灰塵沉降, 并用紫外線燈照射20min。最初所使用的消毒劑種類, 濃度及消毒時間的長短都要進行摸索, 以達到最佳的消毒效果。材料的滅菌：一般是組織越大越易污染, 夏季比冬季帶菌多，甚至不同年
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