【正文】 ( √ )，不管它是否被翻譯。( √ )16．亞硝酸做為一種有效誘變劑，是因?yàn)樗苯幼饔糜贒NA，使堿基中的氨基氧化生成羰 (酮)基，造成堿基配對(duì)錯(cuò)誤。( )12．岡崎片段的合成需要RNA引物。( √ )8．依賴DNA的RNA聚合酶由緊密結(jié)合的α2ββ’σ亞基組成，其中σ因子具有識(shí)別起始部位和催化RNA合成的功能。( )4．以一條親代DNA(3’→ 5’)為模板時(shí)，子代鏈合成方向5’→ 3’，以另一條親代DNA鏈 5’→ 3’)為模板時(shí)，子代鏈合成方向3’→ 5’。③校正tRNA的作用④核糖體對(duì)mRNA的校正 ③高度重復(fù)順序①需RNA引物 ②以3’→ 5’方向DNA為模板 ③兩條模板鏈同時(shí)合成④新鏈生成方向5’→3’ ⑤形成3’,5’ 磷酸二酯鍵24．DNA的切除修復(fù)需要以下哪幾種酶參與( ②③④ )①光裂合酶 ②核酸內(nèi)切酶 ③DNA聚合酶I ④DNA連接酶 ⑤RNA聚合酶25．目的基因的制備方法有( ③④⑤ )①DNA復(fù)制 ②RNA轉(zhuǎn)錄 ③mRNA逆轉(zhuǎn)錄 ④化學(xué)合成法 ⑤限制性內(nèi)切酶切取26．真核細(xì)胞mRNA的加工修飾包括以下內(nèi)容( ①②④⑤ )。①DNA復(fù)制 ②RNA復(fù)制 ③轉(zhuǎn)錄 ④逆轉(zhuǎn)錄 ⑤翻譯20．DNA生物合成中需要以下哪些酶參與( ①②③④⑤ )?！?539。 ①它是一個(gè)金屬酶 ②它能從3’OH端逐步水解單股DNA鏈 ③它在雙螺旋區(qū)有5’→ 3’核酸酶活性 ④它需要DNA模板上的游離5’OH ；14．試將下列DNA復(fù)制的有關(guān)步驟按正確的順序排列( ②→①→③→⑤→④ )。 ①引起堿基置換 ②形成嘧啶二聚體 ③導(dǎo)致堿基缺失 ④發(fā)生堿基插入 l0．有關(guān)轉(zhuǎn)錄的錯(cuò)誤描述是( ③ )。 ①合成酶類 ②轉(zhuǎn)移酶類 ③裂解酶類 ④氧化還原酶類 6．催化真核生物mRNA生物合成的RNA聚合酶Ⅱ?qū)Ζ六Z膏蕈堿( ③ )。 ③RNA鏈的延長(zhǎng)方向是5’→ 3’。其產(chǎn)物分子的放射性情況如何( ① )。它是一種___環(huán)____狀雙鏈 DNA，在基因工程中，它做為___基因載體____。21．DNA復(fù)制中，___前導(dǎo)__鏈的合成是___連續(xù)__的，合成的方向和復(fù)制叉移動(dòng)方向相同；_后隨_鏈的合成是___不連續(xù)____的，合成的方向與復(fù)制叉方向相反。18．真核生物RNA聚合酶共三種___ RNA聚合酶I ___、___ RNA聚合酶Ⅱ___、__ RNA聚合酶Ⅲ____，它們分別催化__ rRNA _____、__ mRNA _____和 ___ tRNA 5SrRNA ____的生物合成。14．RNA生物合成中，RNA聚合酶的活性需要__ DNA _____模板，原料是__ ATP _____、__ GTP _____、__ UTP _____、___ CTP ____。10．DNA生物合成的方向是__ 5’→3’_____，岡奇片段合成方向是__ 5’→3’_____。6．在DNA復(fù)制過程中，改變DNA螺旋程度的酶叫___拓?fù)洚悩?gòu)酶____。DNA聚合酶Ⅱ主要負(fù)責(zé)DNA的___修復(fù)____作用。原核生物：操縱子 RNA聚合酶 核心酶加σ因子 不需加工與翻譯相偶聯(lián) 類核真核生物：?jiǎn)位? RNA聚合酶Ⅱ 聚合酶加轉(zhuǎn)錄因子 需加工故與翻譯相分離 核內(nèi)(三)填空題1．MeselsonStahl的DNA半保留復(fù)制證實(shí)試驗(yàn)中，區(qū)別不同DNA用__同位素示蹤_____方法。，σ因子表達(dá)發(fā)生變化，細(xì)胞大量表達(dá)σ32，而σ32與σ70識(shí)別啟動(dòng)子序列不同，因而RNA pol選擇轉(zhuǎn)錄的基因發(fā)生變化，主要是大約17種蛋白被稱為熱激蛋白。8. 試列表比較常染色質(zhì)DNA與端粒DNA的復(fù)制。意義：①利用基因工程技術(shù)，可以大量生產(chǎn)在一些正常細(xì)胞中產(chǎn)量很低的多肽物質(zhì)，用于醫(yī)藥等工業(yè)生產(chǎn)中；②定向改造生物墓因結(jié)構(gòu)，生產(chǎn)抗病強(qiáng)、品質(zhì)優(yōu)的各種農(nóng)副產(chǎn)品，以提高經(jīng)濟(jì)價(jià)值；③用于生命科學(xué)的基礎(chǔ)研究；值得注意的是基因工程技術(shù)若使用不當(dāng)、管理不善，也會(huì)給人類帶來災(zāi)難。5．DNA的損傷原因是什么?提示：①自身復(fù)制過程中發(fā)生的錯(cuò)誤：②外界環(huán)境的影響，如物理因素(紫外線、X一射線輻射等)，化學(xué)因素(各種誘變劑、抗菌素等)。 DNA復(fù)制時(shí)，由DNA解旋酶(又稱解鏈酶)通過水解ATP獲得能量來解開DNA雙鏈，并沿復(fù)制叉方向移動(dòng)，所產(chǎn)生的單鏈很快被單鏈結(jié)合蛋白所覆蓋，防止DNA的變性并保護(hù)其單鏈不被降解，復(fù)制叉前進(jìn)過程中，雙螺旋產(chǎn)生的應(yīng)力在拓?fù)洚悩?gòu)酶的作用下得到調(diào)整。由于DNA聚合酶不能從無到有合成新鏈，所以DNA復(fù)制需要有含3’OH的引物，引物由含有引物酶的引發(fā)體合成一段含3一10個(gè)核苷酸的RNA片段；②延長(zhǎng)：DNA復(fù)制時(shí)，分別以兩條親代DNA鏈為模板，當(dāng)復(fù)制叉沿DNA移動(dòng)時(shí)，以親代3’→5’鏈為模板時(shí)，子鏈的合成方向是539?！?’外切酶活性，DNA復(fù)制后期，用于切除RNA引物；③339。(二)問答題1．試述Meselson和Stahl關(guān)于DNA半保留復(fù)制的證明實(shí)驗(yàn)。35．轉(zhuǎn)錄加工(posttranscriptional processing)：細(xì)菌中很多RNA分子和幾乎全部真核生物的RNA在合成后都需要不同程度的加工，才能形成成熟的RNA分子，這個(gè)過程叫轉(zhuǎn)錄后加工。31．啟動(dòng)子(promoter)：DNA鏈上能指示RNA轉(zhuǎn)錄起始的DNA序列稱啟動(dòng)子。27．轉(zhuǎn)錄(transcription)：由依賴于DNA的RNA聚合酶催化，以DNA的一條鏈的一定區(qū)段為模板，按照堿基配對(duì)原則，合成一條與DNA鏈互補(bǔ)的RNA鏈的過程。SOS修復(fù)是一種易出差錯(cuò)的修復(fù)過程，雖能修復(fù)DNA的損傷而避免死亡。22．切除修復(fù)(excision repair)：在一系列酶的作用下，將DNA分子中受損傷部分切除，以互補(bǔ)鏈為模板，合成出空缺的部分，使DNA恢復(fù)正常結(jié)構(gòu)的過程。18．結(jié)構(gòu)畸變：基因中的缺口、或插入(insertion)或缺失(deletion)某些堿基造成移碼突變使 DNA的模板鏈?zhǔn)スδ堋：铣蓵r(shí)需要引物與模板。14．逆轉(zhuǎn)錄(reverse transcription)：以RNA為模板合成DNA的過程。 11．前導(dǎo)鏈(1eading strand)：在DNA復(fù)制過程中，以親代鏈(3’→ 5’為模板時(shí)，子代鏈的合成 (5’→ 3’)是連續(xù)的．這條能連續(xù)合成的鏈稱前導(dǎo)鏈。大腸桿菌的引物酶單獨(dú)沒有活性，只有與其它蛋白質(zhì)結(jié)合在一起，形成一個(gè)復(fù)合體，即引發(fā)體才有生物活性。它的功能在于穩(wěn)定DNA解開的單鏈，阻止復(fù)性和保護(hù)單鏈部分不被核酸酶降解。4．解旋酶(helicase)：是一類通過水解ATP提供能量，使DNA雙螺旋兩條鏈分開的酶，每解開一對(duì)堿基，水解2分子ATP。最初由Crick(1958)提出，經(jīng)后人的不斷補(bǔ)充和修改，現(xiàn)包括反轉(zhuǎn)錄和RNA復(fù)制等內(nèi)容。( )14．核糖體大小亞基的結(jié)合和分離與Mg2+，的濃度有關(guān)。( )10．線粒體和葉綠體內(nèi)的蛋白質(zhì)生物合成起始與原核生物相同。( √ )6．大腸桿菌的核糖體的小亞基必須在大亞基存在時(shí)，才能與mRNA結(jié)合。( )2．密碼子在mRNA上的閱讀方向?yàn)?’→ 3’。①肽基轉(zhuǎn)移酶 ②鳥苷三磷酸 ③mRNA ④甲酰甲硫氨酰tRNA⑤EFTu、EFTs、 EFG(SD順序)是指: ( ① )①在mRNA分子的起始碼上游813個(gè)核苷酸處的順序②在DNA分子上轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)前813個(gè)核苷酸處的順序③16srRNA339。 ①IF1 ②IF2 ③eIF2 ④eIF4 ⑤elF4A14．蛋白質(zhì)生物合成具有下列哪些特征( ①②③⑤ )。 ①空載tRNA的脫落發(fā)生在“A”位上 ②核糖體沿mRNA的3’→5’方向相對(duì)移動(dòng) ③核糖體沿mRNA的5’→3’方向相對(duì)移動(dòng) ④核糖體在mRNA上一次移動(dòng)的距離相當(dāng)于二個(gè)核苷酸的長(zhǎng)度9．在蛋白質(zhì)合成中，下列哪一步不需要消耗高能磷酸鍵( ① )。 ①RF ②RF一1 ③RF一2 ④RF一3 5．能與tRNA反密碼子中的I堿基配對(duì)的是( ④ )。(四)選擇題1．蛋白質(zhì)生物合成的方向是( ④ )。12．肽鏈合成終止時(shí)，__終止因子_________進(jìn)人“A”位，識(shí)別出___終止密碼子______，同時(shí)終止因子使__肽基轉(zhuǎn)移酶______的催化作用轉(zhuǎn)變?yōu)開__水解作用_________。8．原核細(xì)胞的起始氨基酸是__甲酰甲硫氨酸___，起始氨酰tRNA是___甲酰甲硫氨酰tRNA___。4．植物細(xì)胞中蛋白質(zhì)生物合成可在____核糖體____、____線粒體____和____葉綠體_______三種細(xì)胞器內(nèi)進(jìn)行。(三)填空題1．蛋白質(zhì)的生物合成是以__ mRNA 為模板，以__ 有規(guī)則重復(fù)的構(gòu)象（αhelix ，β－sheet，βturn）氫鍵三級(jí)結(jié)構(gòu)Tertiary structure核酸（Nucleic acids） 蛋白質(zhì)（Proteins） Cys: UGU UGC Ala: GCU GCC GCA CGC提示：(1)在正常肽段的第一個(gè)Val的密碼GUA的G后插入了一個(gè)C ；(2) 突變體肽段 MetAlaMetArg結(jié)果發(fā)現(xiàn)只有一個(gè)肽段的差異，測(cè)得其基酸順序如下：12．真核細(xì)胞與原核細(xì)胞核糖體組成有什么不同?如何證明核糖體是蛋白質(zhì)的合成場(chǎng)所?原核細(xì)胞：70S核糖體由30S和50S兩個(gè)亞基組成；真核細(xì)胞：80S核糖體由40S和60S兩個(gè)亞基組成。 (2)起始氨酰tRNA不同：原核為fMettRNAf，真核MettRNAi(3)核糖體不同：原核為70S核粒體，可分為30S和50S兩種亞基，真核為80S核糖體，分40S和60S兩種亞基10．蛋白質(zhì)合成后的加工修飾有哪些內(nèi)容?提示：(1)水解修飾；(2)肽鍵中氨基酸殘基側(cè)鏈的修飾；(3)二硫鍵的形成；(4)輔基的連接及亞基的聚合。 (4)肽鏈合成終止，當(dāng)核糖體移至終止密碼UAA、UAG或UGA時(shí)，終止因子RFRF2識(shí)別終止密碼，并使肽酰轉(zhuǎn)移酶活性轉(zhuǎn)為水解作用，將P位肽酰tRNA水解，釋放肽鏈，合成終止。蛋白質(zhì)合成可分四個(gè)步驟，以大腸桿菌為例： (1)氨基酸的活化：游離的氨基酸必須經(jīng)過活化以獲得能量才能參與蛋白質(zhì)合成，由氨酰tRNA合成酶催化，消耗1分子ATP，形成氨酰tRNA。(2)三位點(diǎn)模型 大腸桿菌上的70S核糖體上除A位和P位外，還存在第三個(gè)結(jié)合tRNA的位點(diǎn)，稱為E位，它特異地結(jié)合無負(fù)載的tRNA及無負(fù)載的tRNA最后從核糖體上離開的位點(diǎn)。 (2)tRNA：蛋白質(zhì)合成中氨基酸運(yùn)載工具，tRNA的反密碼子與mRNA上的密碼子相互作用，使分子中的遺傳信息轉(zhuǎn)換成蛋白質(zhì)的氨基酸順序是遺傳信息的轉(zhuǎn)換器。 (5)通用性及例外：地球上的一切生物都使用同一套遺傳密碼，但近年來已發(fā)現(xiàn)某些個(gè)別例外現(xiàn)象，如某些哺乳動(dòng)物線粒體中的UGA不是終止密碼而是色氨酸密碼子。增加或刪除某個(gè)核苷酸會(huì)發(fā)生移碼突變。9．多核糖體(polysome)：mRNA同時(shí)與若干個(gè)核糖體結(jié)合形成的念珠狀結(jié)構(gòu)，稱為多核糖體。5．變偶假說(wobble hypothesis)：指反密碼子的前兩個(gè)堿基(3’端)按照標(biāo)準(zhǔn)與密碼子的前兩個(gè)堿基(5’端)配對(duì)，而反密碼子中的第三個(gè)堿墓則有某種程度的變動(dòng)，使其有可能與幾種不同的堿基配對(duì)。蛋白質(zhì)的生物合成(一)名詞解釋1．翻譯(translation)：以mRNA為模板，氨酰tRNA為原料直接供體，在多種蛋白質(zhì)因子和酶的參與下，在核糖體上將mRNA分子上的核苷酸順序表達(dá)為有特定氨基酸順序的蛋白質(zhì)的過程。ES細(xì)胞的培養(yǎng)：分離胚泡的內(nèi)層細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)。 在含有兩個(gè)抗性基因的載體中，如果外源DNA片段插入其中一個(gè)基因并導(dǎo)致該基因失活，就可用兩個(gè)分別含不同藥物的平板對(duì)照篩選陽性重組子。 基因文庫的構(gòu)建對(duì)重組子的篩