植物生化制藥第五章核酸類藥物-wenkub.com
2025-05-23 12:10 本頁(yè)面
【正文】 能溶于乙醚、苯、三氯甲烷等有機(jī)溶劑，也溶于脂肪酸和礦物油，不溶于丙酮，部分溶于乙醇。 4. 微生物脂類生物安全性好。 第三節(jié) 發(fā)酵工程生產(chǎn)脂類藥物 發(fā)酵工程生產(chǎn)脂類藥物是利用微生物在最適宜條件下把糖等底物轉(zhuǎn)化成脂類化合物的現(xiàn)代生物技術(shù)。 一、脂類藥物的制備方法 1. 直接抽提法 2. 水解法 3. 化學(xué)合成 4. 生物合成法 二、脂類藥物的分離 1. 溶解度法 2. 吸附分離法 3. 超臨界流體萃取技術(shù) 待分離物質(zhì) 提 取 溶 劑 （腦干提取液） 丙酮 乙醇 乙醚 膽固醇 √ 卵磷脂 √ 腦磷脂 √ 超臨界流體 （ supercritical fluid, SF） 是指某種氣體（液體）或氣體（液體）混合物在操作壓力和溫度均高于臨界點(diǎn)時(shí)，使其密度接近液體，而其擴(kuò)散系數(shù)和黏度均接近氣體，其性質(zhì)介于氣體和液體之間的流體。 實(shí)際上，脂類藥物往往是互溶在一起的，依據(jù)脂溶性這一共同特點(diǎn)歸為一大類成為脂類，而不是一個(gè)準(zhǔn)確的化學(xué)名詞。 （ 2）樣品含量測(cè)定。 6%苯酚：臨用前用 80%苯酚配制。 （三）多糖藥物的鑒定檢測(cè)方法 1. 定量測(cè)定 （ 1）苯酚 硫酸法 （ 2）蒽酮 硫酸法 （ 3）氨基己糖的比色測(cè)定 先在鹽酸溶液中將氨基己糖經(jīng)堿性乙?；?，再與對(duì)二甲基苯甲酸發(fā)生呈色反應(yīng)，從而進(jìn)行定量測(cè)定。 2. 分級(jí)沉淀法 不同多糖在不同濃度的甲醇、乙醇或丙酮中的溶解度不同，因此可用不同濃度的有機(jī)溶劑分級(jí)沉淀分子大小不同的粘多糖。乙醇的加入，改變了溶液的極性，導(dǎo)致糖溶解度下降。 （ 2）酶解法 蛋白酶水解法已逐步取代堿提取法而成為提取多糖的最常用方法。 材料用冷水浸過(guò)，用熱水提取，必要時(shí)可加熱至 80～ 90℃ 攪拌提取。這一類多糖主要是不溶性膠類，如木聚精、半乳聚糖等。 （一）多糖的提取 提取多糖時(shí)，一般先需進(jìn)行脫脂，以便多糖釋放。單糖或小分子寡糖也可以在提取后，用吸附層析法或離子交換法進(jìn)行純化。溶劑用量一般為材料的 10倍，需多次提取。 多糖根據(jù)來(lái)源不同可分為： (1) 植物多糖：黃芪多糖，人參多糖。 （ 5）抗腫瘤和抗凝血作用，肝素是天然抗凝劑。增強(qiáng)機(jī)體的抗炎、抗氧化和抗衰老作用。 ② 低聚糖：蔗糖、麥芽糖、乳糖等。相關(guān)研究表明 , 它能促進(jìn)抗生素在感染部位的傳輸 , 從而減少抗生素的用藥量。局部使用抗生素不影響菠蘿蛋白酶的效果。 對(duì)心血管疾病的防治 菠蘿蛋白酶作為蛋白水解酶對(duì)心血管疾病的防治是有益的。用分光光度計(jì)在 275nm的波長(zhǎng)處測(cè)吸光度 A。 （ 2）酶活力單位定義 在測(cè)定條件下 [ ，（ 37+℃ ） ]，每分鐘水解酪蛋白釋放出的三氯乙酸可溶物在 275nm的吸光度與 1181。最適 ，相對(duì)分子量 33000。試用于同抗生素配伍治療關(guān)節(jié)炎、關(guān)節(jié)周圍炎、蜂窩組織炎和小腿潰瘍等。 在酶的分離提純中，總活力用于計(jì)算某一抽提或純化步驟后酶的回收率（ Y），而比活力則用于計(jì)算某一純化步驟的效果，即純度的提高（ E），其關(guān)系如下： Y=某步驟后的總活力 /某步驟前的總活力 E=某步驟后的比活力 /某步驟前的比活力 五、菠蘿蛋白酶 是從菠蘿汁或加工菠蘿削下的廢皮中提取的一種蛋白水解酶，粗菠蘿水解酶是各種成分的混合物，除蛋白水解酶系外，還含有磷酸酯酶、過(guò)氧化物酶、纖維素酶、其它糖苷酶及非蛋白物質(zhì)。 丁醇性質(zhì)：親脂性強(qiáng)、兼具親水性、在脂與水分子間能起表面活性劑的橋梁作用。 （二）原材料的預(yù)處理 1. 機(jī)械法 3. 超聲波法 4. 酶解法 5. 丙酮粉法 二、酶的提取 1. 水溶液法 常用稀鹽溶液或緩沖液提取，經(jīng)過(guò)預(yù)處理的原料，包括組織糜，勻漿，細(xì)胞顆粒，丙酮粉都可用水溶液抽提。 （ 2）考慮生物在不同發(fā)育階段及營(yíng)養(yǎng)狀況時(shí)，酶含量的差別及雜質(zhì)干擾的情況。 二、酶的分子組成及分類 1. 酶分子的組成 ①單體酶 ②寡聚酶 ③多酶復(fù)合體 酶 有機(jī)物分子 金屬有機(jī)物 金屬 輔酶或輔基（非蛋白部分） 酶蛋白 復(fù)合蛋白質(zhì) 單純蛋白質(zhì)（單體酶） 2. 酶的分類 分類 名稱 催化反應(yīng)的類型 實(shí)例 1 氧化還原酶 電子轉(zhuǎn)移 醇脫氫酶 2 轉(zhuǎn)移酶 轉(zhuǎn)移功能基團(tuán)
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