(精選)生物分離技術(shù)習(xí)題庫-wenkub.com
2024-10-29 18:43 本頁面
【正文】 一般在 0～ 40℃之間，多數(shù)球狀蛋白的溶解度隨溫度的升高而增加； 40～ 50℃以上，多數(shù)蛋白質(zhì)不穩(wěn)定，并開始 變性。有時(shí)不同的鹽濃度可有效地使蛋白質(zhì)分級(jí)沉淀。單純使用此法不易使蛋白質(zhì)沉淀完全，常與其他方法配合使用。 52. 影響有機(jī)溶劑沉析的因素 ？ （ 1）溫度（ 2）生物樣品的濃度（ 3） pH（ 4）金屬離子（ 5）離子強(qiáng)度 54. 簡(jiǎn)述凝 膠層析有哪些用途？ ① 作為分析工具；作為脫鹽工具 ② 生物大分子的濃縮 ③ 除熱原物質(zhì) ④ 生物大分子的分離純化；分子量的測(cè)定 58. 根據(jù)溶解度不同，蛋白質(zhì)有幾種分離純化方法。陰樹脂易受有機(jī)物 污染，可用 10%NaCl+2%～ 5%NaOH 混合溶液浸泡或淋洗 51. 液一液萃取時(shí)溶劑的選擇要注意以下幾點(diǎn) ？ （ 1）選用的溶劑必須具有較高選擇性，各種溶質(zhì)在所選的溶劑中之分配系數(shù)差異愈大愈好。 內(nèi)容主要包括：離心分離、過濾分離、泡沫分離、萃取分離、沉淀（析）分離、膜分離、層析（色譜）分離、電泳分離技術(shù)以及產(chǎn)品的濃縮、結(jié)晶、干燥等技術(shù) 。 （ 1）、是否與水互溶，在水中是否有很大的溶解度；（ 2）、介電常數(shù)小，沉析作用強(qiáng)。不同的分離對(duì)象需要采用不同的分離方法才能有效地被分離。 絮凝：指在某些高分子絮凝劑存在下，在懸浮粒子之間發(fā)生架橋作用而使膠粒形成粗大的絮凝團(tuán)的過程 ？ 答： 概念：在含有溶質(zhì)的水溶液中加入一定量親 水的有機(jī)溶劑，降低溶質(zhì)的溶解度，使其沉淀析出。 親和吸附的特點(diǎn)是高效、簡(jiǎn)便、適用范圍廣、分離速度快、條件溫和，但載體制備難度大，通用性差，成本較高。在臨界點(diǎn)附近，微小的壓力增加或溫度下降，則溶劑的密度大幅度增加，對(duì)溶質(zhì)的溶解度將大幅度增加，有利于溶質(zhì)的萃取。 ，有那些原因會(huì)造成膜污染，如何處理？ 答：（ 1）膜污染主要有兩種情況：一是附著層被濾餅、有機(jī)物凝膠、無機(jī)物水垢膠體物質(zhì)或微生物等吸附于表面；另一種是料液中溶質(zhì)結(jié)晶或沉淀造成堵塞。 ，并簡(jiǎn)述其分離原理 ？ 答：超臨界流體萃取是利用超臨界流體具有的類似氣體的擴(kuò)散系數(shù)，以及類似液體的密度（溶解能力強(qiáng)）的特點(diǎn)，利用超臨界流體為萃取劑進(jìn)行的萃取單元操作。 對(duì)離子交換樹脂強(qiáng)弱的選擇：較強(qiáng)的酸性或堿性，選擇選用弱酸性或弱堿性樹脂。 液體環(huán)境：為了保持被分離物質(zhì)運(yùn)動(dòng)的均一 性，以及好的吸附和解析效果，因此要保持孔隙內(nèi)部和外部液體環(huán)境的一致，所以進(jìn)行液體環(huán)境的平衡。 （ 過飽和溶液的形成 ）、（ 晶核的形成 ）和（ 晶體的生長(zhǎng) ）。 （ 粘度（擴(kuò)散系數(shù)） ） ，與液體有相似的 （ 密度 ） 。 17． 工業(yè)上常用的超濾裝置有 （ 板式 ） ，（ 管式 ），（ 螺旋卷式 ）和（ 中空纖維式 ）。 12． DEAE Sepharose 是 （ 陰 ） 離子交換樹脂，其活性基團(tuán)是 （ 二乙基氨基乙基 ） 。 6． 為使過濾進(jìn)行的順利通 常要加入 （惰性助濾劑） 。（ ∨ ） 四、填空 1． 發(fā)酵液常用的固液分離方法有 （ 離心 ） 和 （ 過濾 ） 等。（） 122． 若兩性物質(zhì)結(jié)合了較多陽離子（如 Ca2+、 Mg2+、 Zn2+等），則等電點(diǎn) pH 升高。 （√ ） 116． 蛋白質(zhì)類的生物大分子在鹽析過程中，最好在高溫下進(jìn)行，因?yàn)闇囟雀邥?huì)增加其溶解度。（） 103． 透析設(shè)備簡(jiǎn)單、操作容易，可用于工業(yè)化生產(chǎn)（） 106． 蛋白質(zhì)變性后溶解度降低，主要是因?yàn)殡姾?被中和及水膜被去除所引起的。可以促使生化物質(zhì)轉(zhuǎn)入有機(jī)相從而提高萃取率。 （ √ ） 92． 凝聚與絮凝作用的原理是相同的，只是沉淀的狀態(tài)不同。（ √ ） 79． 滲透壓沖擊是各種細(xì)胞破碎法中最為溫和的一種，適用于易于破碎的細(xì)胞，如動(dòng)物細(xì)胞和 革蘭氏陽性菌 。（ √ ） 53． 納米過濾膜孔徑最小 。（ ） 49． 有機(jī) 溶劑與水混合要在低溫下進(jìn)行 。（ √ ） 45． 硫酸銨在堿性環(huán)境中可以應(yīng)用 。（ √ ） 41． 不同高分子化合物的溶液相互混合可形成兩相或多相系統(tǒng)，如葡聚糖與聚乙二醇（ PEG）按一定比例與水混合后，溶液先呈渾濁狀態(tài)，待靜置平衡后，逐漸分成互不相溶的兩相，上相富含 PEG，下相富含葡聚糖 。 （ √ ） 38． 蛋白質(zhì)為兩性電解質(zhì)，改變 pH 可改變其荷電性質(zhì)， pH﹤ pI 蛋白質(zhì)帶負(fù)電。（ ） 33． 超聲波破碎法的有效能量利用率極低，操作過程產(chǎn)生大量的熱，因此操作需在冰水或有外 部冷卻的容器中進(jìn)行 。（√ ） 26． 蛋白質(zhì)變性后溶解度降低，主要是因?yàn)殡姾杀恢泻图八け蝗コ鸬?。（√? 19． 溶劑的極性從小到大為丙醇＞乙醇＞水＞乙酸。（ ） 15． 應(yīng)用有機(jī)溶劑提取生化成分時(shí)，一般在較高溫度下進(jìn)行。（ ） 5． 極性 溶劑與 非極性 溶劑互溶。 154． 反滲透膜的孔徑小于 ( C )C 2nm 157． 活性炭在下列哪種溶劑中吸附能力最強(qiáng)（ A ） A、水 160． 在超濾過程中，主要的推動(dòng)力是（ C ） C、壓力 162． 在選用凝膠層析柱時(shí)，為了提高分辨率，宜選用的層析柱是（ A ） A、粗且長(zhǎng)的 163． 如果用大腸桿菌作為宿主細(xì)胞，蛋白表達(dá)部位為周質(zhì)，下面哪種細(xì)胞破碎的方 法最佳（ C ） C. 滲透壓休克法 164． 鹽析法與有機(jī)溶劑沉淀法比較， 其優(yōu)點(diǎn)是（ B ） B．變性作用小 165． 在萃取液用量相同的條件下， 下列哪種萃取方式的理論收率最高三級(jí)逆流萃取 三、判斷題 1． 助濾劑是一種可壓縮的多孔微粒。 D 分配柱層析適用于分離極性比較小、 在有機(jī)溶劑中溶解度大的成分，或極性很相似的成分。 C、與該溶質(zhì)保留時(shí)間相 對(duì)應(yīng)的流動(dòng)相體積 137． 分子篩層析純化酶是根據(jù)（ C ）進(jìn)行純化。 A、明礬 49．下列哪項(xiàng)不是蛋白質(zhì)的濃度測(cè)定的方法（ D ）。 C、與該溶質(zhì)保留時(shí)間相對(duì)應(yīng)的流動(dòng)相體積 34．吸附色譜分離的依據(jù)是 （ A ） 。 A、珠磨法 28．用來提取產(chǎn)物的溶劑稱 （ C ） 。 13．人血清清蛋白的等電點(diǎn)為 ，在 PH 為 7 的溶液中將血清蛋白質(zhì)溶液通電，清蛋白質(zhì)分子向（ A） A ：正極移動(dòng) 14．蛋白質(zhì)具有兩性性質(zhì)主要原因是（ B ） B：蛋白質(zhì)分子有多個(gè)羧基和氨基 15．使蛋白質(zhì)鹽析可加入試劑（ D ） D：硫酸銨 16．凝膠色譜分離的依據(jù)是 （ B ） 。 2．針對(duì)配基的生物學(xué)特異性的蛋白質(zhì)分離方法是（ C ）。 58． 等電點(diǎn)：是兩性物質(zhì)在其質(zhì)點(diǎn)的凈電荷為零時(shí)介質(zhì)的 pH 值 ,溶質(zhì)凈電荷為零，分子間排斥電位降低，吸引力增大，能相互聚集起來，沉淀析出，此時(shí)溶質(zhì)的溶解度最低。 53． 高效液相色譜：是指選用顆粒極細(xì)的高效耐壓新型固定相，借助高壓泵來輸送流動(dòng)相，并配有實(shí)時(shí)在線檢測(cè)器，實(shí)現(xiàn)色譜分離過程全部自動(dòng)化的液相色譜法。 43． 洗脫：利用適當(dāng)?shù)娜軇?，將樹脂吸附的物質(zhì)釋放出來，重新轉(zhuǎn)入溶液的過程。 2 35．鹽析：是利用不同物質(zhì)在高濃度的鹽溶液中溶解度的差異，向溶液中加入一定量的中性鹽，使原溶解的物質(zhì)沉淀析出的分離技術(shù)。 29．膜的濃差極化：是指但溶劑透過膜，而溶質(zhì)留在膜上，因而使膜面濃度增大，并高于主體中濃度。 21．化學(xué)滲透破壁法：某些化學(xué)試劑，如有機(jī)溶劑、變性劑、表面活性劑、抗生素、金屬螯合
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