【正文】 如何理解黃酮類化合物聚酰胺色譜分離的“雙重色譜”性能。 母核推斷 A、 B環(huán)取代情況確定 [MH]+、 [MCO]+、 [MCH3]+（ 含甲氧基）、 [A1+H]、 [A1CO]、 [B2CO]等碎片離子。 EIMS裂解規(guī)律 1．分子離子峰為基峰 — 用于測定分子量。1BBBC H2O H δ BH 6. 5~7. 9ppm, 位于較低場 2′ 6′ H δ 大 (2H,d. ) 3′ 5′ Hδ 小 (2H,d. ) 2′ Hδ (1H,) （ 1） （ 2） 5′ Hδ ~ () （ 1） δ AH 6. 3 ~7. 1 ppm（一 OH供電） 6′ Hδ (。339。539。639。6 39。4 39。 黃酮 、黃酮醇加入診斷試劑后吸收峰（帶 I、帶 II）的位移規(guī)律 診斷試劑 位移規(guī)律 歸 屬 NaOMe 帶 I紅移 40~60nm，強度不降 示有 4′ OH 帶 I紅移 50~60 nm，強度下降 示有 3OH、但無 4′ OH NaOAc 帶 II紅移 5~20nm 示有 7OH NaOAc / H3BO3 帶 I紅移 12~30nm 示 B環(huán)有鄰二酚羥基 帶 II紅移 5~10nm 示 A環(huán)有鄰二酚羥基 （不包括 5， 6鄰二酚羥基） 診斷試劑 位移規(guī)律 歸 屬 AlCl3 及 AlCl3/HCl AlCl3/HCl譜圖 = AlCl3譜圖 示無鄰二酚羥基 AlCl3/HCl譜圖 ≠ AlCl3譜圖 示有鄰二酚羥基 AlCl3/HCl譜較 AlCl3譜 帶 I紫移 30~40 nm 示 B環(huán)有鄰二酚羥基 若紫移 20 nm 示 B環(huán)有鄰三酚羥基 帶 I紫移 50~65 nm 示 A、 B環(huán)均可能有鄰二酚羥基 AlCl3/HCl譜圖 = MeOH譜圖 示無 3及 /或 5OH無鄰二酚羥基 AlCl3/HCl譜圖 ≠ MeOH譜圖 示可能有 3及 /或 5OH 帶 I紅移 35~55 nm 示只有 5OH 無 3OH 僅紅移 17~20 nm 示除 5OH外，尚有 6含氧取代 紅移 50~60nm 示可能有 3OH及 5OH 異黃酮、二氫黃酮（醇）的吸收峰（帶 II）位移規(guī)律 NaOAc 異黃酮 帶 II紅移 6~20nm 示有 7OH 二氫黃酮（醇） 帶 II紅移 34~37nm 示有 5， 7二 OH 帶 II紅移 51~58nm 示有 7二 OH AlCl3/HCl AlCl3/HCl譜圖與甲醇中的譜圖比較 異黃酮 帶 II紅移 10~14nm 示有 5OH 二氫黃酮（醇） 帶 II紅移 20~26nm 示有 5OH 診斷試劑 位移規(guī)律 歸 屬 查耳酮、橙酮的吸收峰（ 帶 I ）位移規(guī)律 NaOMe 查耳酮 帶 I紅移 60~100nm，強度增加 示有 4OH 帶 I紅移 60~100nm，強度不增加 示有 2或 4′ OH 橙酮 帶 I紅移 70~95nm， 示有或 6OH AlCl3 及 AlCl3/HCl 查耳酮、橙酮 （ AlCl3較 AlCl3/HCl譜圖） 帶 I 紅移 40~70nm 示有 B環(huán)鄰二酚羥基 查耳酮（ AlCl3/HCl譜圖較 MeOH譜圖） 帶 I 紅移 40~60nm 示有 2′ OH 診斷試劑 位移規(guī)律 歸 屬 二． 1HNMR譜在黃酮結構研究中的應用 ?測定溶劑 ： CCl4 樣品需制備成三甲基硅醚化衍生物，不能顯示羥基質子特征，目前已基本不被采用。 一般， A環(huán)引入 – OH，帶 II紅移， B環(huán)引入 – OH帶 I紅移。 再測定在加入各種診斷試劑后的紫外光譜。 苷與苷元聚酰胺色譜 Sephadex G型：親水性凝膠 Sephadex LH20型 ：羥丙基葡聚糖凝膠，水及極性有機溶劑 分子篩作用 吸附原理 （按分子大小分離） （按極性大小分離） 黃酮苷及苷元的分離 苷元的分離 洗脫順序：分子由大到小被洗脫 極性由小到大被洗脫 叁糖苷 雙糖苷 單糖苷 苷元 1OH 2OH 3OH 4OH 5 OH黃酮 4 . 葡聚糖凝膠柱色譜 “ 雙重色譜”原理 常用洗脫劑： 堿水（ / L ） 鹽水（ / L NaCl） 醇或醇水不同比例。 （ 1）酚羥基數目越多，吸附能力越強。 c、酚羥基數目越多，酸性越強。 黃酮類化合物的理化性質 （ 1）分子的立體結構 平面型分子 非平面型分子 黃酮 二氫類（ C環(huán)半椅式結構） 黃酮醇 異黃酮（羰基與 B環(huán)立體障礙） 查耳酮 交叉共軛 分子間排列不緊密，水分子易于進入 水溶度小 水溶度大 黃酮類化合物的理化性質 2OOHRH R=OH 二氫黃酮醇 R=H 二氫黃酮 （ 2）取代基團的性質、數目、連接位置 引入羥基，數目多， 4‘ 位，水溶度較大。 OO HOHO HO HO H O H+34OO H+ 飛燕草苷元