培養(yǎng)基滅菌ppt課件-wenkub.com
2025-04-25 22:41 本頁(yè)面
【正文】 無(wú)菌空氣的壓力應(yīng)大于 100kp。 101 2022/5/25 ② 為使料液得到徹底滅菌，設(shè)備應(yīng)避免積垢、滲漏和存在“死角”，還應(yīng)盡可能減少泡沫。在這種情況下培養(yǎng)基在維持管中停留的時(shí)間等于所有培養(yǎng)基的受熱時(shí)間，故能避免因局部過(guò)熱而造成營(yíng)養(yǎng)成分破壞或滅菌不足。 ① 維持罐 由式： t2=(N0/Ns)可以求出連續(xù)滅菌過(guò) 程所需的維持時(shí)間，根據(jù)流量和維持時(shí)間可定出 維持罐的裝料容積。雖然加熱和冷卻生培養(yǎng)液所需時(shí)間比使用噴射式連續(xù)滅菌較長(zhǎng)，但滅菌周期比分批滅菌小得多。 86 2022/5/25 此外，由于真空的影響，需要在蒸發(fā)室下面裝一臺(tái)出料泵，或?qū)⒄舭l(fā)室置于離發(fā)酵罐液面 10米以上的高處，否則物料就不能流進(jìn)發(fā)酵罐而進(jìn)入真空系統(tǒng)，這就給生產(chǎn)帶來(lái)不便，尤其對(duì)于已經(jīng)滅菌好的培養(yǎng)基來(lái)說(shuō)，出料泵的密封程度要求很高才能避免重新污染，這個(gè)問(wèn)題也是目前許多工廠不采用真空冷卻的原因之一 。設(shè)計(jì)合適的管道維持器能保證物料先進(jìn)先出，避免過(guò)熱。 81 2022/5/25 為了提高熱量利用和節(jié)約冷卻水，可采用一臺(tái)套管式換熱器或板式換熱器置于維持罐及冷卻器中間，使生培養(yǎng)基與熱培養(yǎng)基先進(jìn)行一次熱交換，得到預(yù)熱后再進(jìn)入連消塔。一般在連續(xù)滅菌時(shí)，應(yīng)采用新型的熱交換設(shè)備，以縮短升溫和殺菌后的冷卻時(shí)間。要在同一溫度下滅菌，達(dá) 到同樣的滅菌效果， CFSTR的滅菌時(shí)間比 PF長(zhǎng)的多。實(shí)際上，長(zhǎng)徑比很大的管式反應(yīng)器 接近與這種理想的流型。 71 2022/5/25 定義流體在反應(yīng)器中的平均停留時(shí)間為 τ 則： τ= V/Q V反應(yīng)器中液體所占的體積 (L , m3) Q通過(guò)反應(yīng)器的液體流率 (L/min, m3/h) 假如任一物料微團(tuán)在反應(yīng)器內(nèi)所經(jīng)歷的時(shí) 間等于平均停留時(shí)間，則可以實(shí)現(xiàn)升溫、 保溫、降溫過(guò)程接近以下的 Tt圖 72 2022/5/25 73 2022/5/25 然而上述假設(shè)實(shí)際難以成立。 66 2022/5/25 然而分批滅菌的 Tt過(guò)程曲線不是任意給定的。 60 2022/5/25 ③ 雜菌的熱死特性的選擇 由于最耐熱的芽孢一般很少發(fā)現(xiàn)，所以在滅菌計(jì)算時(shí)不是把所有的細(xì)菌當(dāng)作最耐熱的芽孢，而是通常用一般耐熱的細(xì)菌芽孢的 K值。 59 2022/5/25 ② 滅菌度 Ns 經(jīng)過(guò)滅菌時(shí)間 t后，培養(yǎng)基中殘存的活菌個(gè)（個(gè) ) 也稱為殺菌程度。 57 2022/5/25 七 . 分批滅菌設(shè)計(jì) 分批滅菌不需其它設(shè)備，操作簡(jiǎn)單易行。 55 2022/5/25 5. 泡沫 泡沫中的空氣形成隔熱層，使熱量難以滲透進(jìn)去，殺死其中的雜菌。所以培養(yǎng)基的 pH越低，所需的時(shí)間也越短。根據(jù)這一原理，培養(yǎng)基滅菌采用高溫短時(shí)的方法能達(dá)到滅菌的效果，又可以減少營(yíng)養(yǎng)成分的破壞。 培養(yǎng)基成分受熱分解的反應(yīng)也是屬于一級(jí)反應(yīng)，符合對(duì)數(shù)殘留定律和阿累尼烏斯方程： dc/dt=K’C K’ = AeE’/RT K’培養(yǎng)基成分的破壞速度常數(shù) E’培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分破壞的活化能 48 2022/5/25 養(yǎng)分雖因溫度增高破壞增加，但滅菌時(shí)間雖短，破壞量減少。 對(duì)上式兩邊求導(dǎo)數(shù)得： dlnK/dT=△ E/(RT2) 46 2022/5/25 六 . 影響培養(yǎng)基滅菌的因素 1. 營(yíng)養(yǎng)成分的保持 濕熱滅菌時(shí)，微生物被熱死的同時(shí)，培養(yǎng)基的 營(yíng)養(yǎng)成分也遭到了一定的破壞。 2） 不同菌的孢子熱死反應(yīng)的 E可能各不相同 ， 在 相同 T滅菌 ， 尚不能肯定 E低的孢子的死亡速度一 定比 E高的快 ， 因?yàn)?K并不是唯一決定于 E。 41 2022/5/25 將方程積分后得： N0： 開(kāi)始滅菌 (t=0) 時(shí)原有活菌數(shù) Ns： 經(jīng)時(shí)間 t后殘存活菌數(shù) D值：活的微生物在受熱過(guò)程中減少到原來(lái)數(shù)目的 1/10（ Ns/N0= 1/10） 001 2 . 3 0 3l n l gSSNNtK N K N==2 . 3 0 3 2 . 3 0 3l g 1 0DKK==42 2022/5/25 3. 溫度對(duì)殺菌速率常數(shù) K的影響 微生物受熱蛋白質(zhì)變性而死亡，溫度對(duì)殺菌速率常數(shù)的影響可以用阿累尼烏斯（ Arrhenins)方程表示： K=AeE/RT K 殺菌速率常數(shù)（死亡速率常數(shù)）（ min1） A 頻率因子（阿累尼烏斯常數(shù)），因菌種的不同而異。 40 2022/5/25 對(duì)數(shù)殘留定律： 在一定溫度下，微生物的受熱死亡符合單分子反應(yīng)動(dòng)力學(xué)即微生物的熱死亡速率與任一瞬間殘存的活菌數(shù)成正比。相反溫度超過(guò)最高限度時(shí)，細(xì)胞中的原生質(zhì)膠體和酶蛋白就幾乎發(fā)生不可逆的凝固變性，使微生物在很短的時(shí)間內(nèi)死亡。 連續(xù)滅菌 （ 連消 ） ： 將培養(yǎng)基在罐外連續(xù)進(jìn)行 加熱 、 維持和冷卻然后進(jìn)入到反應(yīng)器的殺菌方 法就是連續(xù)滅菌 。 相對(duì)熱阻： 指在相同條件下兩種微生物熱阻的比值。 濕熱滅菌的效果，取決與致死溫度和致死時(shí)間。 ③濕熱的穿透力比干熱大，使深部也能達(dá)到滅菌溫度，故濕熱比干熱收效好。 27 2022/5/25 在同樣的溫度下，溫?zé)岬臍⒕Ч雀蔁岷?，其原因有? ①蛋白質(zhì)凝固所需的溫度與其含水量有關(guān)，含水量愈大，發(fā)生凝固所需的溫度愈低。在醫(yī)院中可用于檢驗(yàn)室用品、非金屬器械、無(wú)菌病室的食品食具、藥杯及其它用品的消毒。微波能使介質(zhì)內(nèi)雜亂無(wú)章的極性分子在微波場(chǎng)的作用下，按波的頻率往返運(yùn)動(dòng)，互相沖撞和磨擦而產(chǎn)生熱，介質(zhì)的溫度可隨之升高，因而在較低的溫度下能起到消毒作用。多用于醫(yī)療器械的滅菌。 21 2022/5/25 (3) 紅外線： 紅外線輻射是一種 ～ 1000微米波長(zhǎng)的電磁波 ,有較好的熱效應(yīng) ,尤以 1～ 10微米波長(zhǎng)的熱效應(yīng)最強(qiáng)。主要用于玻璃器皿、瓷器等的滅菌。其優(yōu)點(diǎn)是穿透力強(qiáng)，滅菌效果可靠，能殺滅所有微生物。由巴斯德創(chuàng)用以消毒酒精類，故名。一般用流通蒸汽滅菌器， 100℃ 加熱15～ 30min，可殺死其中的繁殖體；但芽胞尚有殘存。煮沸法可用于飲水和一般器械（刀剪、注射器等）的消毒。 濕熱滅菌簡(jiǎn)便、有效、經(jīng)濟(jì)。 10 2022/5/25 11 2022/5/25 12 2022/5/25 二 . 滅菌的方法 (所有的滅菌，不全針對(duì)培養(yǎng)基） 微生物細(xì)胞是由蛋白質(zhì)組成，加熱可導(dǎo)致蛋白
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