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培養(yǎng)基及其配制ppt課件-wenkub.com

2025-01-01 19:45 本頁面
   

【正文】 二、培養(yǎng)基的配制 用具器材: 粗天平、塑料量杯、燒杯、量筒、移液管、三角瓶、玻璃棒、藥勺、 PH試紙( )、橡皮吸球、吸水紙、羊皮紙等。 激素母液(常用的) 生長素 NAA, IBA, 2,4D, IAA 細(xì)胞分裂素 6BA, KT, GA, ZT 注意: 這些激素配制時,一般配成 1mg/ml, NAA、IBA、 IAA一般可先用少量 95%酒精助溶。 (四)母液配制(以 MS培養(yǎng)基為例) 有機(jī)物母液 鐵鹽母液 無機(jī)大量 母液 無機(jī)微量母液 激素母液 配制 MS培養(yǎng)基時母液的計算 無機(jī)大量母液 (擴(kuò)大 10倍配 1L ) 成 分 硝酸鉀 硝酸銨 硫酸鎂 磷酸二氫鉀 氯化鈣 稱量工具 托盤天平 注意 : 無機(jī)大量母液中的各種物質(zhì)在混合過程中有些離子易產(chǎn)生沉淀,應(yīng)使每種物質(zhì)先充分溶解,再進(jìn)行混合,而且鈣鹽最后緩慢加入進(jìn)去。一般瓊脂以顏色淺、透明度好、潔凈的為上品。瓊脂條的用量在 6— 10g/ L之間,瓊脂粉的用量在 3— 4g/ L之間。因此,在使用時要有其量的意識,使活性炭發(fā)揮其積極作用。 但是,活性炭具有副作用,研究表示,每毫克的活性炭能吸附 l00ng左右的生長調(diào)節(jié)物質(zhì),這說明只需要極少量的活性炭就可以完全吸附培養(yǎng)基中的調(diào)節(jié)物質(zhì)。 ⑶降低玻璃苗的產(chǎn)生頻率,對防止產(chǎn)生玻璃苗有良好作用,一般濃度為 %。添加抗生物質(zhì)可防止菌類污染,減少培養(yǎng)中材料的損失。如為了促進(jìn)芽器官的分化,應(yīng)除去或降低生長素的濃度,或者調(diào)整培養(yǎng)基中生長素與細(xì)胞分裂素的比例。 在培養(yǎng)基中添加細(xì)胞分裂素有三個作用: ①誘導(dǎo)芽的分化促進(jìn)側(cè)芽萌發(fā)生長。適宜的用量范圍較狹窄,過量常有毒效應(yīng)。 ⑵ NAA(萘乙酸 )在組織培養(yǎng)中的起動能力要比 IAA高出 34倍,且由于可大批量人工合成,耐高溫高壓,不易被分解破壞,所以應(yīng)用較普遍。天然的生長素?zé)岱€(wěn)定性差,高溫高壓或受光條件易被破壞。其成分大多不清楚,所以一般應(yīng)盡量避免使用。對組織和細(xì)胞的繁殖、分化有促進(jìn)作用,對細(xì)胞壁的形成也有作用。 VB1對愈傷組織的產(chǎn)生和生活力有重要作用, VB6能促進(jìn)根的生長, Vpp與植物代謝和胚的發(fā)育有一定關(guān)系。在大規(guī)模生產(chǎn)時,可用食用的綿白糖代替。7H20和 Na2— EDTA結(jié)合成合物使用。 鐵 是一些氧化酶、細(xì)胞色素氧化酶、過氧化氫酶等的組成成分。7H20提供。常用的物質(zhì)有 KH2P04或 NaH2P04 (3)K: 對碳水化合物合成、轉(zhuǎn)移、以及氮素代謝等有密切關(guān)系。 第一節(jié) 培養(yǎng)基成分及作用 主要成分包括:無機(jī)鹽類(大量和微量元素)、維生素類、氨基酸類、有機(jī)附加物、植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)、糖類,水和瓊脂等。第三章 培養(yǎng)基及其配制 培養(yǎng)基是植物組織培養(yǎng)的重要基質(zhì)。 : 指濃度大于 / L的元素等。 制備培養(yǎng)基時,常以 KCI、 KN
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