【正文】 一般使用6個月左右需更換過濾器,確保超凈無菌的效果。高壓蒸汽滅菌鍋一般是電加溫,清潔、安全、效率高。(九)高壓蒸汽滅菌鍋主要用于培養(yǎng)基消毒滅菌。配培養(yǎng)基時需酸度計測定pH。洗凈后的玻璃器皿,如迅速干燥,可放入干燥箱內(nèi)烘干,溫度以80℃為宜。 ,用于稱量培養(yǎng)基中的微量元素、植物激素類等。二、常用的儀器和設備（一）天平主要用于試劑的稱量。（三）試管苗培養(yǎng)室試管苗培養(yǎng)室主要用于植物材料接種后培養(yǎng)、試管苗繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)。 滅菌室主要用于培養(yǎng)基的消毒滅菌工作。(一)組織培養(yǎng)準備室組織培養(yǎng)準備室工作內(nèi)容較多,處理事務數(shù)量大,可分為化學實驗室、洗刷室、滅菌室。遺傳性狀不穩(wěn)定,易變異,適合于細胞工程培育新品種。 胚狀體發(fā)生方式，是指植物外植體在組織培養(yǎng)過程中經(jīng)脫分化再分化過程,形成胚狀體的類型。由植物器官外植體經(jīng)人工培養(yǎng)基、特殊培養(yǎng)條件誘導培養(yǎng)脫分化成愈傷組織,此期間的愈傷組織可大量繁殖,誘導再分化產(chǎn)生不定芽。 原球莖發(fā)生方式,是指出外植體誘導培養(yǎng)而產(chǎn)生原球莖增殖快繁的類型。特點是培養(yǎng)過程筒單,技術(shù)容易掌握。（三）植物的再生功能植物的再生功能是指植物在無性繁殖過程中,利用根莖葉器官而產(chǎn)生不定根成不定芽,形成完整植株的能力。成年細胞和組織比幼年細胞和組織難。(二)細胞的分化和形態(tài)建成在通常情況下,性細胞結(jié)合生長發(fā)育長成合子,最后產(chǎn)生具有完整結(jié)構(gòu)的有機體。其過程如圖51。因此,由一個外植體所形成的愈傷組織是異質(zhì)性的,這些細胞團或部分細胞具有不同的分化器官或其他組織的能力。去掉細胞壁而裸露的原生質(zhì)培養(yǎng)稱原生質(zhì)體培養(yǎng)。具體可分為植物器官培養(yǎng)、愈傷組織培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體培養(yǎng)。學習本章時,除掌握植物組織培養(yǎng)的基本概念和基本理論外,還必須重點掌握組織培養(yǎng)室的主要儀器設備的功能、使用方法,以及各種培養(yǎng)基的適用對象和制備技術(shù)。分為微生物殺蟲劑、微生物除草劑和農(nóng)業(yè)抗生素。厭氧培養(yǎng)：本法適用于專性厭氧菌的培養(yǎng)。(5)厭氧培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入還原劑,并以石蠟或凡士林封口,造成無氧環(huán)境,專供厭氧菌培養(yǎng)用,如皰肉培養(yǎng)基。根據(jù)培養(yǎng)基性質(zhì)和用途不同分為五大類：(1)基礎培養(yǎng)基:含有多數(shù)細菌生長繁殖所需要的基本營養(yǎng)成分,如普通瓊脂平板。培養(yǎng)基:人工配制的具有適宜pH值和滲透壓的適合細菌生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。角為宜,切勿劃破培養(yǎng)基表面:畫線要密而不重復,充分利用平板表面；嚴格無菌操作。角左右進行第二區(qū)劃線,第二區(qū)劃線與第一區(qū)劃線開始相交2～3條,以后可不相交。(2)接種環(huán)冷卻后,以無菌操作方法沾取葡萄球菌、大腸桿混合菌1環(huán)。涂布接種法:用于紙片藥敏試驗和生物制品菌苗的生產(chǎn)。此期細菌生長迅速、繁殖極快,菌數(shù)呈對數(shù)直線上升,細菌的形態(tài)、染色性等較典型,對抗生素最敏感,是研究細胞的最佳時期小(3)穩(wěn)定期:由于培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的消耗、毒性代謝產(chǎn)物的積聚,細菌繁殖速度減慢,而死亡數(shù)上升,繁殖數(shù)與死亡數(shù)大致平衡:活菌數(shù)保持相對穩(wěn)定,細菌可產(chǎn)生外素或抗生素、形成芽胞等。(3)溫度—T:37℃(4)氣體:氧氣和二氧化碳根據(jù)細菌對氧的需要不同分為:1)專性需氧菌,如結(jié)核分支桿菌、霍亂弧菌。芽胞的功能:對熱、干燥、化學消毒劑、輻射等有較強的抵抗力。 (3)菌毛:大多數(shù)G和少數(shù)G+常體表遍布著的比鞭毛細短而直硬的絲狀物，化學成分為蛋白質(zhì),需在電子顯微鏡下才能看見。莢膜功能:抗吞噬細胞的吞噬作用,保護細菌免受或抵抗體內(nèi)殺菌物質(zhì)的殺傷作用,使細菌易在體內(nèi)大量繁殖致病,增加細菌的侵襲力:莢膜具有抗原性可用來鑒別細菌。②參與細菌的呼吸過程,與能量的產(chǎn)生、儲存和利用有關(guān):③具有生物合成功能。③與細胞膜共同完成細菌內(nèi)外的物質(zhì)交換。（二）細菌的結(jié)構(gòu)基本結(jié)構(gòu)：細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)及核質(zhì)特殊結(jié)構(gòu):莢膜、鞭毛、菌毛、芽胞 細菌的基本結(jié)構(gòu):從外向內(nèi)可分為細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)和核質(zhì),與人體細胞相比較,多了最外層的細胞壁。按形態(tài)又可分為棒狀桿菌、球桿菌、分枝桿菌等。桿菌:一群長短不等呈桿狀或近似桿狀的細菌。(二)少數(shù)微生物能引起人和動、植物的病害。真核細胞型微生物:體積最大,不能通過細菌濾器:分化程度高,有典型的細胞結(jié)構(gòu),有核膜和核仁，細胞器完整。數(shù)量多、分布廣、繁殖快、可遺傳變異、與人類關(guān)系密切。例如AT對變成了TA對或GC對變成了CG對。堿基替換 堿基替換是一個堿基對被另一不同的堿基對所替換。(二)可逆性 (三)多向性(四)有害性(五)稀有性(六)平衡性基因突變在生物進化中具有重要意義。發(fā)生在生殖細胞中的突變可以通過受精作用直接傳遞給后代?；蛲蛔兛梢园l(fā)生在生殖細胞或生物體的任何組織細胞中。嬰兒期肌張力亢進,并患先天性心臟病。細胞遺傳學研究表明,患者X染色質(zhì)陰性,Y染色質(zhì)也是陰性,核型為45,X本病發(fā)病機制是父親配子形成過程中染色體不分離。本病產(chǎn)生主要是出于患者母親在生殖細胞形成過程中發(fā)生性染色體不分離。主要臨床表現(xiàn):為陰莖短小,睪九極小或隱睪,無精子產(chǎn)生,無胡須,體毛少,喉結(jié)不明顯,皮下脂肪發(fā)達,性情體態(tài)均表現(xiàn)女性化趨勢。性染色體病是指人類的性染色體即X或Y染色體結(jié)構(gòu)或數(shù)目異常所引起的疾病。患兒多在生后半年內(nèi)死亡。患兒正要特征:是生長發(fā)育遲級,出生時低體重,頭面部和是有嚴重畸形。先天愚型患者核型現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)有三種,即21三體型,易位型和嵌合型。患兒有通貫掌,50%左右的患兒有先天性心臟病等。(1)先天愚型(Dewn綜合征)核型47,XX(XY)+21本病主要臨床表現(xiàn):出生時體重、身長偏低,智力低下,生長發(fā)育遲緩。染色體異常可進行產(chǎn)前診斷,即母親懷孕早期用羊水細胞或絨毛膜細胞培養(yǎng)進行染色體分析后作出確診,以減少染色體病的發(fā)生。易位 某一染色體斷裂后的片段連接到非同源染色體的現(xiàn)象稱易位。染色體結(jié)構(gòu)改變的原因:染色體發(fā)生斷裂染色體畸變主要形式：缺失 染色體少了某一片段稱為缺失。這種配子與正常的配子結(jié)合產(chǎn)生三體型(2n+1)和單體型(2n1)。在亞二倍體中,丟失一條染色體構(gòu)成某號染色體的單體(單體型)。原因：是由于親代的生殖細胞在成熟過程中全部同源染色體不發(fā)生分離而產(chǎn)生異常配子(2n),這種2n配子與正常配子結(jié)合形成三倍體(3n)。具有兩個染色體組的細胞或個體稱為二倍體(細胞或個體),以2n表示。(一)染色體數(shù)目畸變不同物種具有不同的染色體數(shù)目,同一物種染色體數(shù)目卻是相對又恒定的,這些對維持物種的穩(wěn)定性具有重要意義。三、染色體變異染色體變異包括染色體結(jié)構(gòu)的改變和數(shù)目的變化染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目在一般情況下是比較穩(wěn)定的。(三)Y染色質(zhì)形態(tài):男性間期細胞被熒光染料染色后在細胞核內(nèi)出現(xiàn)的強熒光小體。,即失活的X染色體可以來自父方也可以來自母方,但一個細胞中的某條X染色體一旦失活,由該細胞增殖而來的所有子細胞都具有相同的失活X染色體。Y染色體較小,為近端著絲粒染色體,列入G組,正常情況下,具Y染色體的個體發(fā)育為男性,無Y染色體的個體發(fā)育為女性。G組:包括2122號和Y染色體,為近端著絲粒染色體,222號染色體可以有隨體。在核型中的每對染色體,其一條來自父方的精子,一條來自母方的卵子,在形態(tài)結(jié)構(gòu)大小上基本相同,稱為同源染色體,而不同對的染色體彼此稱為非同源染色體。在人類近端著絲粒染色體短臂的末端,可見球狀結(jié)構(gòu),稱為隨體。常用于染色體的研究及染色體病的診斷檢查。(三)生過患兒的夫婦,其后代再生有孩子發(fā)病風險增高。在多基因遺傳病中,易患性高低受遺傳因素和環(huán)境因素雙重影響。多基因遺傳的特點：①兩個極端變異(純種)的個體雜交,子一代都是中間型。多基因假說主要論點是：①數(shù)量性狀遺傳的基礎是兩對或兩對以上的基因的作用,每對等位基因間無顯隱性,是共顯性的。*多基因遺傳病 一、多基因遺傳的特點一些遺傳性狀的遺傳基礎不是一對等位基因控制,而是受多對基因控制,它們的作用是微小的,稱為微效基因,但作用可累加,形成明顯的表型。(四)連鎖和交換定律與人類遺傳在實踐中,可用基因的連鎖和交換定律, 來推測某種遺傳病在胎兒中發(fā)生的可能性。在減數(shù)分裂過程中,位于同源染色體上的等位基因有時會隨著非姊妹染色單體的交換而發(fā)生交換,因而產(chǎn)生了基因的重組，這就是互換。所以測交后,在子代產(chǎn)生了與親代表現(xiàn)型相同的類型的同時,也產(chǎn)生了與親代表現(xiàn)型不同的新類型。從圖3所示的結(jié)果可以看出,F1與雙隱性類型測交,雖然測交后代的表現(xiàn)型與基因自由組合定律中測交的結(jié)果一樣,也是4種 類型:灰身長翅、灰身殘翅、黑身長翅和黑身殘翅,但是,它們之間的數(shù)量比并不符合基因自由組合定律中的1:1:1:1,而是與親本表現(xiàn)型相同類型的親本組合占比例很大 (占總數(shù)的84%)。像這樣,位于1對同源染色體上的兩對(或兩對以上)等位基因,在向下一代傳遞時,同一條染色體上的不同基因連在一起不相分離的現(xiàn)象,叫做連鎖。黑身基因和殘翅基因也位于同1條染色體上,可以用by來表示。F1的基因型應該是(BbVv)(圖 1)摩爾根又讓F1的雄果蠅(BbWv)與雙隱性類型的雌果蠅(bbvv)測交,按照自由組合定律,測交后代中應該出現(xiàn)4種不同的類型,即灰身長翅、灰身殘翅、黑身長翅、黑身殘翅,并且它們之間的數(shù)量 比應該為1:1:1:1。這里先天聾啞得到表現(xiàn),所以后代表現(xiàn)為先天聾啞。(五)自由組合定律與人類遺傳在醫(yī)學實踐中,人們可以根據(jù)基因的自由組合定律來分析家系中兩種遺傳病同時發(fā)病的情況,并且推斷出后代的基因型和表現(xiàn)型以及它們出現(xiàn)的概率,為遺傳病的預測和診斷提供理論依據(jù)。(三)對自由組合現(xiàn)象解釋的驗證孟德爾所做的測交試驗,無論是以F1作母本還是作父本,實 驗的結(jié)果都符合預期的設想,也就是4種表現(xiàn)型的實際籽粒的數(shù)量比都接近于1:1:1:1。在這16種方式中共有9種基因型和4種表現(xiàn)型。F1自交產(chǎn)生配子時,根據(jù)基因的分離定律,每對基因都要彼此分離,所以,Y與y分離、R與r分離。二、基因的自由組合定律（一）兩對相對性狀(二)對自由組合現(xiàn)象的解釋孟德爾假設豌豆的形狀和顏色分別由一對基因黃色圓粒和綠色皺?？刂?即黃色和綠色分別是由Y和y控制。前者病情較輕②患者的雙親中必有該病患者.,系譜中?？煽吹竭B續(xù)傳遞現(xiàn)象。Ⅳ、X連鎖顯性遺傳（XD）控制一種遺傳性狀的基因是顯性基因,位于X染色體上,其遺傳方式為X連鎖顯性遺傳,由X染色體上顯性致病基因引起的疾病稱為X連鎖顯性遺傳病。②雙親無病時,兒子可能發(fā)病,女兒則不會發(fā)病。男性細胞中只有1條X染色體,而Y染色體缺少相應的等位基因,所以叫半合子,男性只要X染色體上有隱性致病基因就會患病。 Ⅲ、X連鎖隱性遺傳（XR）控制一種遺傳性狀的基因是隱性基因,位于X染色體上,其遺傳方式稱為X連鎖隱性遺傳?；颊叩耐屑s有1/4的幾率患病。臨床上所見到的常染色體隱性遺傳病者往往是兩個攜帶者婚配的后代。Ⅱ、常染色體隱性遺傳（AR）概念控制一種遺傳性狀的基因是隱性基因位于常染色體上,其遺傳方式稱為常染色體隱性遺傳。ⅠB決定紅細胞表面有抗原B。ABO血型決定于一組復等位基因,它們是ⅠA、ⅠB和i。④雙親無病時,子女一般不患病,只有在基因突變的情況下,才能看到雙親無病時子女患病的病例?；颊叩幕蛐蛷睦碚撋?應有兩種:AA和Aa,但致病基因的頻率較低,臨床上所見到的患者大多數(shù)為雜合體(Aa),雜體患者和正常人婚配后,每生一個孩子有1/2的可能性為患者,1/2的可能性為正常。細胞的減數(shù)分裂,同源染色體的分離是分離律的細胞學基礎。生物體在整個發(fā)育過程中,不僅要受到內(nèi)在因素基因的控制,還要受到外部環(huán)境條件的影響。(六) 基因型和表現(xiàn)型在遺傳學上,把生物個體表現(xiàn)出來的性狀叫做表現(xiàn)型，如豌的高莖和矮莖。測交就是讓F1代與隱性純合子雜交，這個方法可以用來測定F1的基因組合P（親代）： Dd dd D d d Dd ddF2（子二代）高莖 ： 矮莖 787 ： 277 1 ： 1證明了F1是雜合子(Dd),并證明了F1著形成配子時,成對的因發(fā)生了分離,分離后的基因分別進入到不同的配子中。由相同基因的配子結(jié)合成的合子發(fā)育成的個體,叫做純合(體)。P 高莖 矮莖 DD dd ↓ ↓ 配子 D d 受精F1 Dd高莖 配子 D dF2 D DD高 Dd高 d Dd 高 dd矮 F2基因型：DD:Dd:dd=1:2:1F2表現(xiàn)型：高莖：矮莖=3:1(三）對分離現(xiàn)象的解釋孟德爾認為,生物體的性狀都是出遺傳因子(后來改稱為基因)控制的。這樣,一個初級卵母細胞經(jīng)過兩次分裂之后,最終形成一個單倍體的卵細胞(n)和三個單倍體的極體(n)。初級卵母細胞經(jīng)過第一次減數(shù)分裂形成一個體積較大的次級卵母細胞和個體積較小的第一極體。初級精母細胞經(jīng)過第一次減數(shù)分裂后,形成兩個次級精母細胞,每個次級精母細胞再經(jīng)第二次減數(shù)分裂,形成兩個精細胞。在增殖期中,精原細胞的一部分經(jīng)有絲分裂而不斷增殖,它們的染色體數(shù)目像其它體細胞一樣,都是二倍體(2n)。減數(shù)分裂是遺傳學基本規(guī)律(分離律、自由組合律、連鎖與互換律)的細胞學基礎。核仁、核膜形成,經(jīng)過胞質(zhì)分裂,完成整個減數(shù)分裂過程。每個細胞只有n個二分體。核仁、核膜重新形成,同時進行細胞質(zhì)的分裂,形成兩個子細胞。后期Ⅰ 同源染色體分離,分別向兩極移動。在粗線期,非姐妹染色單體之間發(fā)生了片段的交換,稱