【正文】 結(jié)核桿菌DNA擴(kuò)增及分析程序(2)，要詳細(xì)描述操作過程。 適應(yīng)范圍：TBDNA的Taq Man熒光定量/定性，標(biāo)本類型為痰液等。 目的：保證HCVRNA檢測結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。2丙肝病毒核酸擴(kuò)增熒光檢測標(biāo)準(zhǔn)操作程序（3）檢測結(jié)果報(bào)告制度：Pro（2）擴(kuò)增儀標(biāo)準(zhǔn)操作程序：SOP（1）《乙肝病毒核酸擴(kuò)增熒光檢測試劑盒》說明書（由公司生產(chǎn)） 支持性文件： 核酸擴(kuò)增：①試劑配制程序②加樣③PCR擴(kuò)增（條件、結(jié)果分析）均要詳細(xì)描述； 乙肝DNA樣本的處理：要詳細(xì)描述處理步驟及過程； 標(biāo)準(zhǔn)操作 質(zhì)控物：陰性、陽性對照及陽性參控品系列來源于(或試劑盒) 試劑來源： 不能從本區(qū)再進(jìn)入任何“上游”區(qū)域，降低本區(qū)的氣壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。(4) 適應(yīng)范圍：核酸擴(kuò)增、產(chǎn)物分析和報(bào)告簽發(fā)。 保持室內(nèi)空氣流通，避免發(fā)生氣溶膠污染。 詳細(xì)做好實(shí)驗(yàn)記錄和儀器使用記錄，見樣本制備室實(shí)驗(yàn)記錄本(4)及儀器使用登記本；(5) 核酸加入至擴(kuò)增反應(yīng)管中在本區(qū)的超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行，然后通過（最好有傳遞艙）傳遞至擴(kuò)增區(qū)； 不同檢測項(xiàng)目的樣本核酸的提取和貯存，按相應(yīng)檢測項(xiàng)目的SOP進(jìn)行；(3) 標(biāo)本的接收處理和保存按臨床標(biāo)本的管理制度及臨床標(biāo)本標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行；（1－2） 臨床標(biāo)本的接收、保存，核酸（DNA、RNA）提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測定RNA時(shí)CDNA的合成，在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行； 程序細(xì)則： 適應(yīng)范圍：試劑的制備和貯存。 適應(yīng)范圍：適用于本實(shí)驗(yàn)室使用的離心機(jī)。 適應(yīng)范圍：適用于本實(shí)驗(yàn)室恒溫金屬浴箱。 適應(yīng)范圍：適應(yīng)于擴(kuò)增儀。報(bào)告發(fā)出后，置－20℃冰箱保存一個(gè)月（1）以備查。 標(biāo)本的唯一性標(biāo)識須字跡清晰明了，不得隨意作任何涂改，必要時(shí)，在舊標(biāo)識上劃雙線更改，更改后應(yīng)保持舊標(biāo)識可辨識。如第一個(gè)檢測乙型肝炎病毒的化驗(yàn)單編號為GB001。如乙型肝炎病毒標(biāo)記為GB、丙型肝炎對應(yīng)病毒標(biāo)記為GC、結(jié)核桿菌標(biāo)記為GTB。 對于驗(yàn)收合格的標(biāo)本，應(yīng)立即分裝并標(biāo)記，如不能及時(shí)檢測應(yīng)將其分類保存至－20℃冰箱。 標(biāo)本外泄污染；，檢驗(yàn)單姓名與標(biāo)本姓名不符，標(biāo)本標(biāo)識不清的應(yīng)及時(shí)與臨床聯(lián)系退回并作記錄。 目的：使臨床檢測標(biāo)本符合要求，保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。 腦脊液和胸腹水：由臨床醫(yī)生采集后放入消毒的試管中及時(shí)送檢。編號方式同上，置－20℃保存待檢；采集生殖道標(biāo)本要求病人在采樣前2小時(shí)內(nèi)不能排尿，采樣時(shí)將棉拭子伸入男性尿道或女性宮頸口23cm，旋轉(zhuǎn)一周以獲取上皮細(xì)胞，將取樣后的棉拭子放入含1ml無菌生理鹽水離心管中漂洗片刻在管壁上擠干后丟棄拭子，13000rpm離心10min，棄上清，保留沉淀。標(biāo)本在室溫下保存不能超過24小時(shí)。并告知相關(guān)科室。 目的：規(guī)范臨床待檢標(biāo)本的正確采集和處理。1臨床標(biāo)本采集及處理標(biāo)準(zhǔn)操作程序： 適應(yīng)范圍：適應(yīng)離心機(jī)。 定期用經(jīng)校準(zhǔn)的溫度計(jì)測量其實(shí)際溫度并進(jìn)行校準(zhǔn)（每月一次）。 如果實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)液體不慎泄漏，立即用軟布蘸10％次氯酸鈉反復(fù)清洗，然后再用75％酒精擦拭； 每月用棉簽沾水清洗模塊上的錐孔，以保證Ependoff管與錐孔壁接觸充分，導(dǎo)熱良好；，則用10％次氯酸鈉清潔表面或用75％酒精擦拭； 適應(yīng)范圍：適應(yīng)于恒溫金屬浴； 程序細(xì)則： 透鏡的清潔：在反應(yīng)艙底部有一個(gè)透鏡，儀器使用過程中，透鏡可能會沾上灰塵、水份，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可用專用擦鏡紙直接擦去，也可蘸取酒精擦拭透鏡。 如發(fā)生毛細(xì)管斷裂，立即用沾有10％次氯酸鈉的抹布擦拭，再用無水乙醇擦拭，并用紫外燈照射過夜； 每個(gè)月用干凈的棉棒和酒精擦拭加熱腔內(nèi)壁及棱鏡； 如果發(fā)現(xiàn)棱鏡上有灰塵，立即用干凈的棉棒和酒精擦拭； 支持性文件： 擴(kuò)增儀使用說明書。（1）儀器設(shè)備校準(zhǔn)登記表 Tab 引用的表格： 做好儀器的校準(zhǔn)記錄(1)； 儀器故障維修后應(yīng)對儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，合格后方可使用； 儀器使用過程中如發(fā)現(xiàn)溫度有漂移或懷疑實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想的可能原因是循環(huán)儀時(shí)，應(yīng)及時(shí)與廠商聯(lián)系對儀器進(jìn)行校準(zhǔn)； 無以上校準(zhǔn)條件者也可寫送院設(shè)備科或計(jì)量局校準(zhǔn)。 擦干吸頭外面； 垂直握住移液器，將吸頭浸入液面2－3mm處，緩慢(1－3秒)一致的吸 校準(zhǔn)步驟： 電子天平：放置于無塵和無震動影響的臺面上，房間盡可能有空調(diào)，稱量時(shí)，為保證天平內(nèi)的濕度（相對濕度60－90％），天平內(nèi)應(yīng)放置一裝有10ml蒸餾水的小燒杯，小燒杯10ml體積。 適應(yīng)范圍：適應(yīng)于各種品牌、可調(diào)和多通道移液器。 做好校準(zhǔn)記錄。 目的：確保恒溫金屬浴溫度的準(zhǔn)確性。恒溫金屬浴校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序：Tab 目的：保證溫度計(jì)的精確性。溫度計(jì)校準(zhǔn)操作程序： 空白對照、陰性對照無擴(kuò)增，陽性對照正常檢出，陽性標(biāo)準(zhǔn)品導(dǎo)致的標(biāo)準(zhǔn)曲線之斜率（－ 空白對照無擴(kuò)增，陰性對照有擴(kuò)增，排除其它污染可能性后，提取液存在污染可能，單獨(dú)用 陽性對照未檢出，陽性標(biāo)準(zhǔn)品檢測正常，提示樣品提取液可能存在問題。效驗(yàn)實(shí)驗(yàn)要求設(shè)置空白對照，陰性對照、陽性對照各一。 收到試劑后，目測試劑是否處于凍存狀態(tài)； 每天工作結(jié)束后開啟各工作區(qū)的紫外燈，試劑準(zhǔn)備室定時(shí)照射2小時(shí)，樣本處理室和核酸擴(kuò)增及產(chǎn)物分析室應(yīng)照射過夜，由實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)行。 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對工作臺面用可移紫外消毒燈調(diào)至實(shí)驗(yàn)臺上方60－90cm處照射30分鐘，由實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)行； 實(shí)驗(yàn)開始前開啟各工作區(qū)的紫外燈，定時(shí)照射1小時(shí)，由實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)行； 操作程序： 適應(yīng)范圍：本實(shí)驗(yàn)室的工作區(qū)和實(shí)驗(yàn)臺面及相關(guān)的設(shè)備； 目的：對實(shí)驗(yàn)臺面和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)環(huán)境進(jìn)行消毒，防止和減少實(shí)驗(yàn)污染；紫外消毒標(biāo)準(zhǔn)操作程序： 目的：實(shí)驗(yàn)室用具的清潔消毒及污染的應(yīng)急處理，防止和減少實(shí)驗(yàn)污染，保證實(shí)驗(yàn)室工作正常運(yùn)行。實(shí)驗(yàn)室清潔消毒及污染應(yīng)急處理程序：四、基因診斷實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化操作程序SOP(standard operating procedure)的編寫： 對抱怨中反映出的影響到實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量及質(zhì)量體系有效性的問題，實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)會同科質(zhì)量負(fù)責(zé)人及其他相關(guān)人員及時(shí)分析存在問題，提出糾正措施，并由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人監(jiān)督執(zhí)行； 不能當(dāng)面答復(fù)的抱怨應(yīng)約定反饋時(shí)間，根據(jù)情況盡快召集相關(guān)人員商討處理方案，盡可能給予滿意答復(fù)，并記錄答復(fù)內(nèi)容；(1) 目的：重視被檢查單位或個(gè)人的抱怨和申訴，正確處理“抱怨”更加有效地改進(jìn)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系。1抱怨處理制度：，應(yīng)立即按實(shí)驗(yàn)室清潔消毒及污染應(yīng)急處理標(biāo)準(zhǔn)操作程序處理。(1)、及紫外線消毒標(biāo)準(zhǔn)操作程序(2)、并做好記錄(34)； 實(shí)驗(yàn)室清潔應(yīng)按試劑準(zhǔn)備區(qū)及貯存室、樣本處理室、擴(kuò)增及產(chǎn)物分析室的方向進(jìn)行；，不可混用； 制度細(xì)則： 適應(yīng)范圍：適應(yīng)于實(shí)驗(yàn)室工作環(huán)境、實(shí)驗(yàn)臺面、工作間、移液器等的清潔消毒工作； 目的：為保證實(shí)驗(yàn)室工作環(huán)境清潔衛(wèi)生，防止交叉污染；1實(shí)驗(yàn)室清潔消毒處理制度： 預(yù)防措施：A、B、C、D等,要有針對性地寫出措施。 污染途徑： 空氣傳播:臨床標(biāo)本中的污染源在空氣中傳播； 直接傳播：工作中偶然針刺，碎玻璃劃傷直接傳染； 皮膚粘膜接觸：臨床標(biāo)本中的感染源通過破損皮膚粘膜接觸造成的感染； 制度細(xì)則： 通過圖形的資料對比進(jìn)行誤差分析，解除誤差途徑，如每個(gè)月的月底將項(xiàng)目的全部質(zhì)檢血清檢測結(jié)果X和s與該批測定的X和s進(jìn)行比較，如果X發(fā)生了變化，說明準(zhǔn)確度發(fā)生變化提示有非隨機(jī)誤差存在。 室內(nèi)質(zhì)控圖的使用方法： 血清質(zhì)量控制品：外購衛(wèi)生部或廠家質(zhì)控品，自制質(zhì)控品要溯源，或比對試驗(yàn)； 引用的文件及表格：5（本文略，寫作時(shí)要明確標(biāo)出）。 電子保存的軟件備份及總匯打印均應(yīng)有相應(yīng)的規(guī)定與說明。 實(shí)驗(yàn)記錄保存于各自實(shí)驗(yàn)操作區(qū)內(nèi)，至少保存兩年以上，兩年后交科室建檔封存。 檢測過程中的記錄：專用實(shí)驗(yàn)的記錄本，不同區(qū)記錄本不能混用，試劑準(zhǔn)備及貯存室記錄每天檢測所用的試劑情況，如：名稱、批號、數(shù)量等； 在樣本接收室接收標(biāo)本，接、收者均需在可接收登記本上簽字；(1) 目的：實(shí)驗(yàn)室記錄是質(zhì)量證明資料及質(zhì)量體系運(yùn)作的主要組成部分，為使資料的記錄、保存狀態(tài)在控，特建立。1實(shí)驗(yàn)室記錄的管理制度 報(bào)告單遺失時(shí)怎么辦？ 檢測標(biāo)本的參考值或參考范圍； 病人基本情況：姓名、性別、年齡、科別等；如果高于測定方法線性范圍上限則對樣本稀釋再測，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；如結(jié)果低于測定方法線性范圍下限，則報(bào)告小于測定范圍下限，而不能報(bào)告為“O”、陰性或其它各種形式的結(jié)果。 目的：檢測結(jié)果的報(bào)告是檢驗(yàn)過程的最終輸出，為使報(bào)告生成、發(fā)放、管理受控，特建立。 每次檢測過程必須有相應(yīng)的室內(nèi)質(zhì)控，室內(nèi)質(zhì)控的進(jìn)行依據(jù)相關(guān)SOP文件并作好記錄。(4) 檢測時(shí)標(biāo)本的唯一性標(biāo)識中的“序號”作為檢測過程中的“檢測號”進(jìn)行傳遞。