第六章沉淀反應(yīng)-wenkub.com
2025-10-10 14:04 本頁面
【正文】 ? 免疫濁法度測定為液體內(nèi)沉淀試驗(yàn)；單向擴(kuò)散試驗(yàn)平板法是一種定量的凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)，免疫電泳技術(shù)是電泳分析與沉淀反應(yīng)的結(jié)合產(chǎn)物，常見的有對流免疫電泳、火箭免疫電泳、免疫電泳、免疫固定電泳等。 故已不推薦使用。 技術(shù)要點(diǎn) 免疫固定電泳 左圖為 IgG κ 型 , 中圖為 IgG λ 型，右為正常 SP G A M κ λ SP G A M κ λ SP G A M κ λ 免疫固定電泳示意圖 分辨率強(qiáng)，敏感度高，操作周期短，僅需數(shù)小時(shí)，結(jié)果易于分析。 ,防止寬底峰形 . ，可用甲醛與 IgG上的氨基結(jié)合（甲酰化），抵消了電滲作用。 對流免疫電泳 電泳時(shí)凝膠中抗體不移動(dòng)，樣品孔中的抗原向正極泳動(dòng)，隨著抗原量的逐漸減少，抗原泳動(dòng)的基底區(qū)越來越窄，抗原抗體分子復(fù)合物形成的沉淀線逐漸變窄，形成一個(gè)形狀如火箭的不溶性復(fù)合物沉淀峰，抗體濃度固定時(shí)，峰的高度與抗原量呈正相關(guān)。 電泳分析 ＋ 沉淀反應(yīng) 抗原抗體反應(yīng) 的高度特異性 電泳技術(shù)的高 分辨率、快速、 微量 免疫電泳技術(shù) 原理：雙向擴(kuò)散 + 電泳 比雙向擴(kuò)散試驗(yàn)靈敏度提高 8～16倍 技術(shù)要點(diǎn)：制備 %巴比妥 瓊脂凝膠板，在其上成對打 孔，孔徑 3mm， 孔距 6 mm， 于陰極側(cè)孔內(nèi)加待測血清， 陽性側(cè)孔加抗血清，電泳條 件 3～ 4mA/cm， 30min～ 1h。 技術(shù)要點(diǎn)：平板玻璃上傾注一層均勻的瓊脂糖薄層，凝固后打孔，孔徑為 3mm， 孔間距在 3～ 5 mm之間，在相對的孔中加入抗原或抗體，放置濕盒 37℃18 ～ 24h 后，觀察孔周圍是否出現(xiàn)沉淀環(huán)。 原 理 原理：抗體與待測的抗原 ,在兩者比例合適的部位結(jié)合形成沉淀環(huán)。 + + + + + + + + + — 1/80 — — — — + + + — 當(dāng) 可溶性抗原 與相應(yīng)抗體特異結(jié)合，二者比例合適時(shí)，在特殊的緩沖液中它們快速形成一定大小的抗原抗體復(fù)合物，使反應(yīng)液體出現(xiàn)濁度。免疫比
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