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2025-01-05 04:51 本頁面
【正文】 C，也有的高于或低于此溫度。 有些酶可在幾種緩沖液中發(fā)揮最大活性，有些酶必須要在該酶特定的緩沖液中才能發(fā)揮最大活性。與識別序列兩側(cè)的核苷酸序列有關(guān)。 ? 例如 HpaⅡ 和 MspⅠ 是 同裂酶 ，識別順序都是 5’……C ↓CG G……3’ 3’……G GC↑C……5’ ? 如果其中有 5’甲基胞嘧啶， HpaⅡ 不能夠切割，MspI能切割。 當胞嘧啶甲基化后 ， MspⅠ 不能再切割 。 幾種 II型限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點 Pst I Provindencia stuartii 164 CTGCAG GACGTC Haemophilus influenzae Rd EcoR I Pst I 5’…… C T G C A G……3’ 3’ ……G A C G T C ...…5’ 不同核酸內(nèi)切酶的特異識別位點 5’…… G A A T T C ……3’ 3’ ……C T T A A G ……5’ A A G C T T T T C G A A A A G C T T T T C G A A DNA A B C D DNA HindⅢ HindⅢ 切割位點 核酸內(nèi)切酶 HindⅢ 對雙鏈 DNA分子的 切割作用 限制性核酸內(nèi)切酶的切割類型： ? （ 1） 兩條鏈上的斷裂位置是交錯和對稱圍繞著一個對稱軸排列 ， 這種形式的斷裂結(jié)果形成具有粘末端的 DNA片段； ? （ 2） 兩條鏈上的斷裂位置是處在一個對稱軸的中心 ， 這樣形式的斷裂是形成具有平末端的 DNA片段 。 四、限制性內(nèi)切酶切割 DNA的位點 限制性內(nèi)切酶切斷 DNA鏈上磷酸二酯鍵的位置一般在識別序列內(nèi)部，如 G↓GATCC, AT↓CGAT。 理論上，某限制性內(nèi)切酶的識別序列長度為 n個核苷酸，則該酶切割 DNA的頻率為 1/4n，也就是說 DNA每隔 4n個核苷酸便 會出現(xiàn)一次該酶的識別序列。 同一菌株中所含的多個不同的限制性核酸內(nèi)切酶 Haemophilus influenzae d 嗜血流感桿菌 d株 屬名
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