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20xx年醫(yī)學(xué)專題—第五章細(xì)菌檢驗(yàn)技術(shù)-資料下載頁(yè)

2025-11-07 00:51本頁(yè)面
  

【正文】 菌培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng),可對(duì)各類標(biāo)本中的分枝桿菌進(jìn)行培養(yǎng)及檢測(cè),原理基本同自動(dòng)血培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng),配套專門的培養(yǎng)瓶。 一般將各類標(biāo)本直接送檢,檢驗(yàn)者收到標(biāo)本后,如為清亮的穿刺液標(biāo)本,可直接注入(zh249。 r249。)培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),放入儀器自動(dòng)培養(yǎng)并檢測(cè)。如為痰液等其他含有雜菌或細(xì)胞的標(biāo)本,應(yīng)先進(jìn)行消化、中和等處理后再注入(zh249。 r249。)培養(yǎng)瓶,否則會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。,第六十頁(yè),共六十八頁(yè)。,第四節(jié) 微生物檢驗(yàn)(jiǎny224。n)的自動(dòng)化和微型化,二、微生物鑒定的自動(dòng)化和微型化 (一)微生物數(shù)碼分類原理 1.?dāng)?shù)據(jù)庫(kù) 由許多細(xì)菌條目組成,每個(gè)條目代表(d224。ibiǎo)一個(gè)細(xì)菌種或一個(gè)細(xì)菌生物型。 2.編碼 將細(xì)菌生化反應(yīng)模式轉(zhuǎn)換成 數(shù)學(xué)模式,可把生化反應(yīng)結(jié)果快速轉(zhuǎn)錄成數(shù)字(編碼),經(jīng)查閱編碼檢索本或電腦分析系統(tǒng)又可將數(shù)字轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的細(xì)菌名稱。 3.查碼 在編碼檢索本內(nèi)尋找數(shù)碼信息:如菌名,鑒定結(jié)果的評(píng)價(jià),生 化結(jié)果,陽(yáng)性百分率,必須增加的補(bǔ)充試驗(yàn)項(xiàng)目,指出注意要點(diǎn)等。,第六十一頁(yè),共六十八頁(yè)。,4.解釋(jiěsh236。) 如果一個(gè)編碼只對(duì)應(yīng)一種細(xì)菌,無(wú)論幾率大小,為該種細(xì)菌的可能性( ID %) 均為99. 99 %。如果一個(gè)編碼對(duì)應(yīng)兩種或兩種以上種類的細(xì)菌,應(yīng)計(jì)算每種細(xì)菌出現(xiàn)的幾率所占的百分比ID % 。如ID % ≥99 %,為該種菌的可能性非常大;如ID % ≥90 %,為該種菌的可能性較大;如ID %≥80 %,為該種菌的可能性也較大,但需做補(bǔ)充試驗(yàn)進(jìn)一步確證;如ID %80 %,則一般無(wú)法準(zhǔn)確區(qū)分菌種,必須增加多個(gè)補(bǔ)充試驗(yàn)才可得出準(zhǔn)確結(jié)果。,第四節(jié) 微生物檢驗(yàn)(jiǎny224。n)的自動(dòng)化和微型化,第六十二頁(yè),共六十八頁(yè)。,第四節(jié) 微生物檢驗(yàn)(jiǎny224。n)的自動(dòng)化和微型化,(二)微生物自動(dòng)鑒定儀器(y237。q236。)的基本結(jié)構(gòu)和配套試劑,數(shù)碼分類鑒定系統(tǒng)的組成(zǔ ch233。nɡ) 由鑒定卡、 添加試劑及檢索工具配套形成的完整 的微生物鑒定體系。 (1)鑒定卡 常用的生化反應(yīng)有: ① 發(fā)酵試驗(yàn); ②同化試驗(yàn); ③同化或發(fā)酵抑制試驗(yàn); ④酶試驗(yàn); ⑤其他傳統(tǒng)的生化反應(yīng)。 (2)添加試劑:有些試驗(yàn)經(jīng)孵育后需添加試劑才能呈現(xiàn)顏色變化。添加的試劑有配套試劑盒或單種試劑。 (3)檢索工具:檢索工具可由電腦自動(dòng)處理并報(bào)告。,第六十三頁(yè),共六十八頁(yè)。,第四節(jié) 微生物檢驗(yàn)(jiǎny224。n)的自動(dòng)化和微型化,三、 微生物藥敏試驗(yàn)的自動(dòng)化和微型化 (一)原理 自動(dòng)化藥敏試驗(yàn)使用藥敏試驗(yàn)卡進(jìn)行檢測(cè),實(shí)質(zhì)就是微型化的肉湯稀釋試驗(yàn)。根據(jù)不同的藥物對(duì)不同菌種最低抑菌濃度(minimal inhibitory concentration, MIC)的不同,每一種藥物一般選用3種或以上不同藥物濃度,每一藥敏試驗(yàn)卡(板)可同時(shí)檢測(cè)約20種抗生素的藥敏試驗(yàn)結(jié)果。藥敏試驗(yàn)檢測(cè)原理有:光電比濁法測(cè)定細(xì)菌濃度、熒光標(biāo)記法測(cè)定熒光強(qiáng)度的變化、氧化還原指示劑檢測(cè)細(xì)菌生長(zhǎng)(shēngzhǎng)代謝產(chǎn)物等方法。經(jīng)數(shù)小時(shí)孵育后,每隔一定時(shí)間自動(dòng)測(cè)定每一藥敏試驗(yàn)孔中細(xì)菌生長(zhǎng)(shēngzhǎng)情況,與細(xì)菌生長(zhǎng)(shēngzhǎng)對(duì)照孔的結(jié)果進(jìn)行比較計(jì)算出生長(zhǎng)(shēngzhǎng)率。 將藥敏試驗(yàn)卡中各測(cè)定孔的生長(zhǎng)率在數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行比較分析,可得到最低抑菌濃度MIC值,常參照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),判斷最終結(jié)果為敏感(S)、中度敏感(MS)和耐藥(R),并對(duì)結(jié)果進(jìn)行解讀。,第六十四頁(yè),共六十八頁(yè)。,第四節(jié) 微生物檢驗(yàn)(jiǎny224。n)的自動(dòng)化和微型化,(二)儀器的基本結(jié)構(gòu)和配套試劑 微生物自動(dòng)鑒定系統(tǒng)大多與藥敏試驗(yàn)系統(tǒng)組合在一起,藥敏試驗(yàn)系統(tǒng)常配備計(jì)算機(jī)專家系統(tǒng)。 藥敏試驗(yàn)卡是系統(tǒng)的工作基礎(chǔ),一般與鑒定卡配套,常分為革蘭陰性菌、革蘭陽(yáng)性菌、厭氧菌、苛氧菌、酵母菌等的藥敏試驗(yàn)卡。 (三)注意事項(xiàng)及影響因素 1.藥敏試驗(yàn)卡的保存 2.接種的菌液濃度(n243。ngd249。) 3.檢驗(yàn)信息系統(tǒng)的應(yīng)用,第六十五頁(yè),共六十八頁(yè)。,一、免疫學(xué)鑒定(ji224。nd236。ng),第五節(jié) 細(xì)菌的其他鑒定(ji224。nd236。ng)技術(shù),免疫學(xué)鑒定:是應(yīng)用免疫學(xué)試驗(yàn)(sh236。y224。n)的原理和方法,用已知的抗原(或抗體)來(lái)檢測(cè)標(biāo)本中的抗體(或抗原),是細(xì)菌感染性疾病重要的診斷方法。,方法:抗原檢測(cè)和抗體檢測(cè),檢測(cè)抗原方法包括:凝集反應(yīng)、熒光免疫顯微技術(shù)、免疫比濁法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、化學(xué)發(fā)光免疫分析等。,檢測(cè)抗體方法包括:肥達(dá)反應(yīng)、外斐反應(yīng)、性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn) 、免疫比濁法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、化學(xué)發(fā)光免疫分析等。,第六十六頁(yè),共六十八頁(yè)。,二、藥敏鑒定(ji224。nd236。ng)試驗(yàn),第五節(jié) 細(xì)菌的其他(q237。tā)鑒定技術(shù),藥敏鑒定試驗(yàn):細(xì)菌(x236。jūn)對(duì)藥物的敏試驗(yàn)是在體外測(cè)定藥物抑制或殺死細(xì)菌(x236。jūn)能力的試驗(yàn),有些藥敏試驗(yàn)亦可用于鑒定某些細(xì)菌(x236。jūn)。,方法包括:桿菌肽試驗(yàn) 、O/129抑菌試驗(yàn) 、Optochin敏感試驗(yàn)。,第六十七頁(yè),共六十八頁(yè)。,內(nèi)容(n232。ir243。ng)總結(jié),微生物學(xué)檢驗(yàn)。半固體培養(yǎng)基:含0.2%~0.5%瓊脂(qi243。ngzhī),用于觀察細(xì)菌的動(dòng)力。固體培養(yǎng)基:含2%~3%瓊脂(qi243。ngzhī),用于細(xì)菌的分離培養(yǎng)。方法:將待檢菌種接種于葡萄糖蛋白胨水中,35℃培養(yǎng)18~24小時(shí)后,往培養(yǎng)基中加入甲基紅指示劑少許,觀察結(jié)果。原理:某些細(xì)菌具有氧化酶(細(xì)胞色素氧化酶),能將二甲基對(duì)苯二胺或四甲基對(duì)苯二胺氧化生成紅色的醌類化合物。氧化酶(細(xì)胞色素氧化酶)試驗(yàn)。無(wú)色+鋅粉→無(wú)色:陽(yáng)性。二、藥敏鑒定試驗(yàn),第六十八頁(yè),共六十八
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