【正文】 TGFβ受體XXXXXXX 信號(hào)通路影響 XXXXXXXXXXXXXX。第五部分 XXXXXXXXXXXX(1)XXXXXXXX 在肝纖維化大鼠體內(nèi)的器官分布XXXXXXXXXX。(2)XXXXXXX 大鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)采用XXXXXXXX。(3)XXXXXXX 在肝纖維化大鼠肝臟內(nèi)分布 采用XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX。第六部分 XXXXXXX防治大鼠肝纖維化(1)造模采用膽總管結(jié)扎和CCl4肝纖維化兩種動(dòng)物模型。(2)分組及處理XXXXXXXXXXXXXX。(3)治療效果檢測(cè)主要比較以下指標(biāo)：XXXXXXXXXXXXXXX。技術(shù)路線圖XXXXXXXXXXXXXXX。 立項(xiàng)依據(jù)有堅(jiān)實(shí)的理論與實(shí)踐基礎(chǔ)。本研究是參閱大量文獻(xiàn)并結(jié)合自身以往深厚的肝纖維化防治研究基礎(chǔ)，特別是結(jié)合近四年國(guó)家自然科學(xué)基金資助研究成果，在XXXX 化學(xué)合成及功能研究、低劑量XXX抗肝纖維化作用和機(jī)制的前期工作基礎(chǔ)上，提出的多途徑、互補(bǔ)協(xié)同與靶向治療肝纖維化的新探索。掌握了國(guó)內(nèi)外在受體調(diào)節(jié)藥物靶向、低毒性高效中藥新劑型開發(fā)和以HSC的靶標(biāo)的肝纖維化靶向治療中的最新研究動(dòng)態(tài)，借鑒“雙靶向”干預(yù)的最新研究成果，并與自身實(shí)踐相結(jié)合，在理論上、實(shí)踐上均有可靠基礎(chǔ)。 相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)成熟，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可信。本研究使用的實(shí)驗(yàn)方法、動(dòng)物模型和生物分子化學(xué)合成等多為國(guó)內(nèi)外應(yīng)用多年的經(jīng)典方法，并有自身實(shí)踐基礎(chǔ)。本課題組由掌握以上技術(shù)的成員組成，相關(guān)技術(shù)已應(yīng)用于科研工作。 人員配備合理，具有扎實(shí)的相關(guān)工作基礎(chǔ)和完善的實(shí)驗(yàn)設(shè)備及技術(shù)支持。申請(qǐng)人長(zhǎng)期從事肝纖維化防治研究，先后承擔(dān)包括國(guó)家自然基金在內(nèi)的各類科研項(xiàng)目15項(xiàng)，指導(dǎo)或協(xié)助指導(dǎo)博士后、博士生及碩士生70余名。近四年主持了國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目“RGD修飾細(xì)胞生物信息調(diào)控分子和綴合基因的功能研究(編號(hào)30170412）”和“人卵泡抑素防治肝纖維化的實(shí)驗(yàn)研究(編號(hào)30170411)”的研究工作，項(xiàng)目組主要成員參與并完成以上研究工作。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)指導(dǎo)者、熟練技術(shù)人員及輔助人員等各司其職，可保障研究有條不紊的進(jìn)行。XXXXXXXXX是國(guó)家級(jí)重點(diǎn)學(xué)科和“211”工程重點(diǎn)建設(shè)學(xué)科的組成單位之一，長(zhǎng)期從事肝纖維化防治研究，先后承擔(dān)包括國(guó)家自然科學(xué)基金在內(nèi)的各級(jí)各類科研項(xiàng)目20余項(xiàng)。本項(xiàng)目的特色與創(chuàng)新之處 本課題首次嘗試?yán)肵XXXXXX構(gòu)建HSC特異性受體調(diào)節(jié)藥物靶向載體。將新型配體人工化學(xué)合成、受體調(diào)節(jié)藥物靶向技術(shù)與新型脂質(zhì)體載藥技術(shù)三者結(jié)合應(yīng)用于肝纖維化防治，有很強(qiáng)的原始創(chuàng)新性。 本課題首次研究XXXXX生物小分子通過XXXXX與中藥粉防己堿相聯(lián)合，多途徑、互補(bǔ)與協(xié)同防治肝纖維化。本課題是利用分子機(jī)制指導(dǎo)中西藥聯(lián)合應(yīng)用、構(gòu)建中藥靶向制劑提高療效降低副作用和多途徑協(xié)同作用抗肝纖維化的全新嘗試，是在總結(jié)自身工作基礎(chǔ)上進(jìn)行的大膽設(shè)想與創(chuàng)新。研究計(jì)劃及預(yù)期研究結(jié)果 研究計(jì)劃： 預(yù)期研究成果 獲得快速、有效和大量合成XXXXXXX和高藥物包封率、高配體修飾率的穩(wěn)定XXXXXXXX的技參數(shù)，并合成足量研究相關(guān)產(chǎn)物。 體外研究證實(shí)XXXXXXXX。 在體內(nèi)XXXXXXXXX，有效降低有效劑量、提高療效和降低副作用。 研究證實(shí)XXXXXXX可成為抗肝纖維化藥物新劑型開發(fā)的有效載體。（二）研究基礎(chǔ)與工作條件 1 研究基礎(chǔ)。自1981年以來，我們研究室長(zhǎng)期從事肝纖維化防治研究，先后對(duì)鈣拮抗劑、鈣調(diào)蛋白拮抗劑、大黃素、激活素、腎素血管緊張素系統(tǒng)及卵泡抑素等在肝纖維化發(fā)生發(fā)展中的作用進(jìn)行了系列的研究，積累了較豐富的理論，掌握了相關(guān)研究技術(shù)。承擔(dān)了包括國(guó)家自然科學(xué)基金在內(nèi)的各類科研項(xiàng)目20多項(xiàng)，先后獲省部級(jí)以上科技進(jìn)步獎(jiǎng)10項(xiàng)。項(xiàng)目負(fù)責(zé)人率先在我國(guó)開展鈣拮抗劑尤其是中藥粉防己堿對(duì)肝纖維化防治研究，取得豐富的粉防己堿抗肝纖維化基礎(chǔ)和臨床研究成果，在國(guó)內(nèi)外期刊發(fā)表相關(guān)論文50余篇，獲省部級(jí)以上科技進(jìn)步獎(jiǎng)5項(xiàng)。近兩年，我們?cè)谏虾Ｊ薪涛痦?xiàng)目“粉防己堿影響肝星狀細(xì)胞活化信號(hào)分子研究（編號(hào)02BK14）”資助下完成了小劑量粉防己堿抗肝纖維化效果與機(jī)制的研究，在國(guó)內(nèi)外首次報(bào)道小劑量粉防己堿可通過影響TGFβSmads信號(hào)通路抑制HSC活化，相關(guān)研究論文被SCI收錄(收錄號(hào) IDS Number: 963XN)。該研究為指導(dǎo)粉防己堿在肝纖維化防治中應(yīng)用有重要價(jià)值。（參見申請(qǐng)人簡(jiǎn)歷及附件二、三）。近四年來，申請(qǐng)人承擔(dān)并完成了國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目“RGD修飾細(xì)胞生物信息調(diào)控分子和綴合基因的功能研究（編號(hào) 30170412）”，化學(xué)合成了RGDM6P，分子克隆構(gòu)建pCIRGDSmad7并成功通過脂質(zhì)體進(jìn)行基因轉(zhuǎn)染，通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)觀察了RGDM6P和pCIRGDSmad7的生物學(xué)效應(yīng)。細(xì)胞及動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)均證實(shí)pCIRGDSmad7和RGDM6P可減輕ECM沉積，并影響TGFβ1和整合素表達(dá)強(qiáng)度和分布。主要研究工作由本項(xiàng)目組成員參與并完成。目前我們正在利用基金很少量結(jié)余款項(xiàng)進(jìn)行合成RGDM6P修飾SSL的工作。得益于此，他（她）們分別熟練掌握了生物小分子的化學(xué)合成相關(guān)技術(shù)（多肽合成、固相化反應(yīng)、納米技術(shù)、高效分離技術(shù)等）、免疫組織與細(xì)胞化學(xué)技術(shù)、RTPCR和定量PCR、蛋白印跡、高效液相分析、質(zhì)譜分析、肝纖維化動(dòng)物模型及生物信息學(xué)方法等與本課題相關(guān)的關(guān)鍵技術(shù)與方法（相關(guān)論文參見申請(qǐng)人簡(jiǎn)歷）。由于以上的工作基礎(chǔ)，我們擁有豐富的生物分子合成經(jīng)驗(yàn)，成熟的生物分子構(gòu)建技術(shù)和良好的人員與設(shè)備支持。已經(jīng)構(gòu)建成功的RGDM6P及相關(guān)技術(shù)要領(lǐng)，可直接用于本課題。構(gòu)思本課題的重要原因之一是探討解決簡(jiǎn)單單一藥物治療中發(fā)現(xiàn)的諸多問題而開展的，密切相關(guān)的細(xì)胞學(xué)、動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)也是本實(shí)驗(yàn)成功的重要保證。工作條件 XXXXXXX設(shè)有校屬的XXXXXXXXX消化系疾病第三研究室。實(shí)驗(yàn)室擁有本項(xiàng)目研究相關(guān)的大部分生化、細(xì)胞生物學(xué)及分子生物學(xué)等方面的各種儀器設(shè)備，如倒置顯微鏡攝影設(shè)備、γ計(jì)數(shù)儀、CO2培養(yǎng)箱、酶聯(lián)免疫測(cè)定儀、電轉(zhuǎn)膜儀、低溫冰箱、低溫超速離心機(jī)及其它分子生物學(xué)設(shè)備等。 XXXXXXXXXXXX醫(yī)學(xué)研究所為本項(xiàng)目開展提供了儀器、技術(shù)支持和信息服務(wù)平臺(tái)。我們可免費(fèi)使用相關(guān)設(shè)備如層流無(wú)菌室、質(zhì)譜儀、高效液相色譜儀、定量PCR儀、NICOMP Particle Sizer Model 3700分析系統(tǒng)、流式細(xì)胞儀和FlousS MultiImage圖像分析儀等，新華醫(yī)院和學(xué)院均有SPF級(jí)的動(dòng)物飼養(yǎng)條件。第五篇：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目申請(qǐng)書撰寫國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目申請(qǐng)書撰寫與項(xiàng)目評(píng)審－項(xiàng)目申請(qǐng)書撰寫 國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目主要支持研究人員在自然科學(xué)基金會(huì)每年公布的《項(xiàng)目指南》的資助范圍之內(nèi)自主選題，參與競(jìng)爭(zhēng)。申請(qǐng)書撰寫的好壞直接關(guān)系到申請(qǐng)的成敗，這就要求申請(qǐng)者在撰寫申請(qǐng)書時(shí)能充分展示其學(xué)術(shù)思想的新穎性和研究路線的可行性，不僅能“擺事實(shí)”，說清楚自己擬開展的工作有研究?jī)r(jià)值，而且能夠“講道理”，闡明自己擬開展的研究工作為什么有價(jià)值，擬解決什么科學(xué)問題或?qū)W術(shù)問題，創(chuàng)新點(diǎn)在哪里，向自然科學(xué)基金會(huì)提供一份高質(zhì)量的申請(qǐng)書。本節(jié)將向申請(qǐng)者就申請(qǐng)書的撰寫要點(diǎn)提供若干參考建議。1 關(guān)于立項(xiàng)依據(jù)與研究?jī)?nèi)容對(duì)國(guó)內(nèi)外的研究現(xiàn)狀進(jìn)行廣泛深入的調(diào)研，既要介紹國(guó)外動(dòng)態(tài)，更要介紹國(guó)內(nèi)研究的情況。列出國(guó)內(nèi)外同行的工作，指出需解決的共性問題。介紹國(guó)內(nèi)情況應(yīng)包括申請(qǐng)者本人的研究工作，這樣可以使評(píng)議人從中了解申請(qǐng)者的一些思路。必須闡明申請(qǐng)者擬開展本項(xiàng)研究工作的充足理由以及理論和學(xué)術(shù)意義。主要參考文獻(xiàn)要顯示國(guó)內(nèi)外關(guān)鍵性的研究工作，要注意文獻(xiàn)的時(shí)效性(經(jīng)典文獻(xiàn)除外)。研究?jī)?nèi)容應(yīng)緊緊圍繞研究目標(biāo)，要集中精力解決科學(xué)問題，避免內(nèi)容龐雜或空泛，重點(diǎn)不突出。研究目標(biāo)應(yīng)是解決學(xué)術(shù)性問題，避免目標(biāo)設(shè)置偏大、解決一個(gè)非學(xué)術(shù)性的目標(biāo)或做一件達(dá)到某一指標(biāo)的具體工作，同時(shí)也要避免泛泛探索規(guī)律的研究。擬解決的關(guān)鍵問題要清楚，避免漏寫此項(xiàng)。研究方法、技術(shù)路線要具體、清晰。注意知識(shí)產(chǎn)權(quán)的保護(hù)，即能說明問題，又不暴露“技術(shù)訣竅”要從學(xué)術(shù)思想角度提出可行性分析，不能僅就研究隊(duì)伍和研究條件方面進(jìn)行介紹和分析，只有上述三方面優(yōu)勢(shì)的綜合，才是取得成果的關(guān)鍵。要提出擬開展的研究項(xiàng)目的研究特色和新穎的學(xué)術(shù)思想，對(duì)創(chuàng)新性內(nèi)容的提出和分析必須科學(xué)和嚴(yán)謹(jǐn)。要注意研究條件的特色不能完全代表項(xiàng)目的研究特色，更不能代表新穎的學(xué)術(shù)思想。不要泛泛空談學(xué)科交叉，申請(qǐng)者要闡明擬申請(qǐng)項(xiàng)目的交叉點(diǎn)在哪里，對(duì)相關(guān)學(xué)科發(fā)展的促進(jìn)作用如何。對(duì)基礎(chǔ)研究而言，填補(bǔ)國(guó)內(nèi)空白不是特色與創(chuàng)新。研究計(jì)劃要盡量具體，以便評(píng)議人了解申請(qǐng)人研究進(jìn)度是否合理。預(yù)期進(jìn)展可給出一個(gè)大致的設(shè)想。預(yù)期的研究結(jié)果要與研究目標(biāo)相吻合。研究結(jié)果要注重質(zhì)量。研究生的培養(yǎng)要注重水平的提高。關(guān)于研究基礎(chǔ)與工作條件工作基礎(chǔ)指申請(qǐng)者和項(xiàng)目組主要成員與本項(xiàng)目有關(guān)的研究工作積累以及已取得的研究工作成績(jī)，不是指所在單位研究集體或者導(dǎo)師的工作。工作條件包括已具備的實(shí)驗(yàn)條件，尚缺少的實(shí)驗(yàn)條件和擬解決的途徑，以及利用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室和部門重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室的計(jì)劃與落實(shí)情況。申請(qǐng)者簡(jiǎn)歷必須包括申請(qǐng)者和項(xiàng)目組主要成員的學(xué)歷和研究工作簡(jiǎn)歷，近期已發(fā)表與本項(xiàng)目有關(guān)的主要論著和獲得的學(xué)術(shù)獎(jiǎng)勵(lì)情況及在本項(xiàng)目中承擔(dān)的任務(wù)。要列出相關(guān)論文(著)所有作者排序、論文(著)名稱、期刊(出版社)名稱、發(fā)表(出版)時(shí)間。申請(qǐng)者和項(xiàng)目組主要成員正在承擔(dān)的科研項(xiàng)目情況，包括自然科學(xué)基金項(xiàng)目和其他國(guó)家科技計(jì)劃項(xiàng)目，要注明項(xiàng)目的名稱和編號(hào)、經(jīng)費(fèi)來源、起止年月、負(fù)責(zé)的內(nèi)容等，為了使評(píng)議人能夠了解擬申請(qǐng)的項(xiàng)目與正在承擔(dān)的項(xiàng)目的關(guān)系與區(qū)別，應(yīng)對(duì)正在承擔(dān)的項(xiàng)目的研究任務(wù)和重點(diǎn)給出簡(jiǎn)單的說明。