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正文內(nèi)容

儀器分析實驗指導(dǎo)書-資料下載頁

2024-10-28 15:55本頁面
  

【正文】 能。紫外吸收光譜在生產(chǎn)、科研的眾多領(lǐng)域有著十分廣泛的應(yīng)用。主要應(yīng)用于定性分析、定量分析、純度檢測、化合物結(jié)構(gòu)的推測[6]、氫鍵強度的測定。(1)定性分析利用紫外吸收光譜鑒定有機化合物,其主要依據(jù)是化合物的特征吸收特征。如吸收曲線的形狀、吸收峰數(shù)目以及各吸收峰波長及摩爾吸收系數(shù)。用紫外光譜進行定性鑒定的化合物必須是純凈的,并按正確的操作方法用紫外分光光度計繪出吸收曲線,然后根據(jù)該化合物的吸收特征作出初步判斷。如果化合物的紫外光譜在220400nm范圍內(nèi)沒有吸收帶,則可以判斷該化合物可能是飽和的直鏈烴、脂環(huán)烴、或其它飽和的脂肪族化合物或只含一個雙鍵的烯烴等。如果化合物只在270350nm有弱的吸收帶,則該化合物必含有n電子的簡單非共軛發(fā)色基團,如羰基、硝基等。如果化合物在210250nm范圍有強的吸收帶,且ε>104,這是K吸收帶的特征,則表明該化合物可能是含有共軛雙鍵的化合物。如果吸收帶出現(xiàn)在260300nm范圍內(nèi),則表明該化合物存在3個或3個以上共軛雙鍵,如吸收帶進入可見光區(qū),則表明該化合物是長共軛發(fā)色基團的化合物或是稠環(huán)化合物。如果化合物在250300nm范圍內(nèi)有中等強度吸收帶,ε在103104范圍內(nèi),這是B吸收帶的特征,因此表明該化合物可能含有苯環(huán)。(2)定量分析紫外可見光譜擅長與定量分析[7]。紫外分光光度法就是基于紫外可見吸收光譜的應(yīng)用。紫外光譜在化合物含量測量方面的應(yīng)用比其在化合物定性分析測定方面具有更大的優(yōu)越性,方法的靈敏度高,準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性都很好,應(yīng)用非常廣泛。只要對金紫外光有吸收或可能吸收的化合物,均可用紫外可見分光光度法測定。僅藥物分析來說,利用紫外吸收光譜進行定量分析的例子很多,例如一些國家已將數(shù)百種藥物的紫外系吸收光譜的最大吸收波長和吸收系數(shù)載入藥典。紫外分光光度法可方便的用量來直接測定混合物某些組分的含量,如環(huán)己烷中的苯,四氯化碳中的二硫化碳,魚肝油中的維生素A等。(3)純度檢查 紫外吸收光譜能測定化合物中含有微量的具有紫外吸收的雜質(zhì)。如果一個化合物在紫外可見光區(qū)沒有明顯的吸收峰,而其的雜質(zhì)在紫外區(qū)有較強的吸收峰,就可檢出化合物中所含有的雜質(zhì)(乙醇/苯,苯 λmax=256nm)。如果一個化合物在紫外可見光區(qū)有明顯的吸收峰,可利用摩爾吸光系數(shù)(吸光度)來檢查其純度。(4)化合物結(jié)構(gòu)的推測化合物的紫外可見吸收光譜基本上是分子中發(fā)色基團和助色基團的特性,而不是整個分子的特性,所以單獨從紫外吸收光譜不能完全確定化合物的分子結(jié)構(gòu),必須與紅外光譜、核磁共振、質(zhì)譜及其它方法配合,才能得出可靠的結(jié)論。紫外可見光譜在研究化合物的結(jié)構(gòu)中的主要作用是推測官能團、結(jié)構(gòu)中的共軛體系以及共軛體系中的取代基的位置、種類和數(shù)目等。(5)氫鍵強度的測定在實際應(yīng)用中,不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強度不同,可以利用紫外可見光譜來測定化合物在不同溶劑中的氫鍵強度,以確定選擇哪一種溶劑。異丙叉丙酮的n π*吸收帶在環(huán)己烷、乙醇、甲醇及水溶液中的λmax分別為335nm、320nm、312nm和300nm,假定這種λmax的移動完全由溶劑的氫鍵所引起,可利用一定公式計算每種溶劑中的氫鍵強度(極性溶劑分子與羰基氧形成了氫鍵,使n軌道能級降低而趨向穩(wěn)定化,當(dāng)n電子實現(xiàn)n π*躍遷時,需要增加一定的能量來克服氫鍵的能量)。三、PL熒光分光光度計實驗報告 由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中,激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光,熒光經(jīng)過濾過和反射后,被光電倍增管所接受,然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來?;窘Y(jié)構(gòu)和原理如圖所示。①光源光源應(yīng)具有強度大、適用波長范圍寬兩大特點,常用光源有高壓汞燈、氙燈、氙一汞弧燈等。此外,紫外激光器、固體激光器、高功率連續(xù)可調(diào)染料激光器和二極管激光器等熒光光源把熒光法的應(yīng)用范圍拓寬。②濾光片和單色器在熒光光度計中,通常采用干涉濾光片和吸收濾光片作為激發(fā)光束和熒光輻射的波長選擇器。在熒光分光光度計中至少選用一個,而常常是用兩個光柵單色器,且均帶有可調(diào)狹縫,以供選擇合適的通帶。理想的單色器應(yīng)在整個波長區(qū)內(nèi)有相同的光子通過效率,不幸的是這種理想的單色器不存在。③ 檢測器一般普通的熒光分光光度計均采用光電倍增管作為檢測器。它是很好的電流源,在一定條件下其電流量與人射光強度成正比。此外,還有光導(dǎo)攝像管、電子微分器、電荷耦合器陣列檢測器。④ 顯示裝置以前,顯示裝置有數(shù)字電壓表,記錄儀和陰極示波器等,現(xiàn)在,人們可以通過計算機軟硬件技術(shù)根據(jù)不同要求,來選擇不同的直觀的視頻讀出方式。物質(zhì)熒光的產(chǎn)生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質(zhì)分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài), 這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的,在返回基態(tài)的過程中將一部分的能量又以光的形式放出,從而產(chǎn)生熒光。不同物質(zhì)由于分子結(jié)構(gòu)的不同,其激發(fā)態(tài)能級的分布具有各自不同的特征,這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質(zhì)都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜;因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來定性地進行物質(zhì)的鑒定。在溶液中,當(dāng)熒光物質(zhì)的濃度較低時,其熒光強度與該物質(zhì)的濃度通常有良好的正比關(guān)系,即IF=KC,利用這種關(guān)系可以進行熒光物質(zhì)的定量分析,與紫外可見分光光度法類似,熒光分析通常也采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進行。測量原理:稀溶液IF=其中,I0為激發(fā)光強度;If為熒光強度;υf為熒光效率。b為液池厚度; ε和c分別為發(fā)光物質(zhì)的摩爾吸光系數(shù)和摩爾濃度。設(shè)備名稱:熒光分光光度計 型 號:RF5301PC型 國別廠家:日本島津公司 技術(shù)指標(biāo):波長掃描范圍:220900nm 波長精度:177。; 狹縫范圍: 信噪比:S/N比150以上(水拉曼峰測定,狹縫5nm)最高掃描速度:5500nm/min(1)開機,選擇相應(yīng)的附件。先開啟儀器主機電源,預(yù)熱半小時后啟動電腦程序RF530XPC,儀器自檢通過后,即可正常使用。(2)測樣(1)spectrum模式在“Acquire Mode”中選擇“Spectrum”模式。對于做熒光光譜的樣品,“Configure”中“Parameters”的參數(shù)設(shè)置如下: “Spectrum Type”中選擇Emission;給定EX波長;給定EM的掃描范圍(最大范圍220900nm);設(shè)定掃描速度;掃描間隔;狹縫寬度,點擊“OK”完成參數(shù)的設(shè)定。對于做激發(fā)光譜的樣品,“Configure”中“Parameters”的參數(shù)設(shè)置如下: “Spectrum Type”中選擇Excitation;給定EM波長;給定EX的掃描范圍(最大范圍220nm—900nm);設(shè)定掃描速度;掃描間隔;狹縫寬度,點擊“OK”,完成參數(shù)的設(shè)定。在樣品池中放入待測的溶液,點擊“Start”,即可開始掃描。掃描結(jié)束后,系統(tǒng)提示保存文件??稍凇癙resentation”中選擇“Graf”、“Radar”、“Both Axes Ctrl+R”來調(diào)整顯示結(jié)果范圍;在“Manipulate” 中選擇“PeakPick”來標(biāo)出峰位,最后在“Channel”中進行通道設(shè)定。述操作步驟對固體樣品同樣適用。(2)Quantitative模式“Acquire Mode”中選擇“Quantitative”模式。b.“Configure”中“Parameters”的參數(shù)設(shè)置如下:Method 選擇“Multi Point Working Curve” ;“Order of Curve” 中選擇 “1st和“No” ;給定EX、EM波長;設(shè)定狹縫寬度,點擊“OK”,完成參數(shù)的設(shè)定。在樣品池中放入裝有空白溶液的比色皿后執(zhí)行“Auto Zero” 命令校零點。點擊“Standard”模式,制作工作曲線。將樣品池中的空白溶液換成一系列的已知濃度的樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液進行測量,執(zhí)行“Read”命令,得到相應(yīng)的熒光強度,系統(tǒng)根據(jù)測量值自動生成一條“熒光強度濃度”曲線。在“Presentation” 中選擇“Display Equation”,得到標(biāo)準(zhǔn)方程。將此工作曲線 “Save”為擴展名為“.std”的文件。工作曲線制備完畢,即可進入未知樣的測量,選擇進入“Unknown”模式,將樣品池中的已知濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液換成待測樣品溶液,執(zhí)行“Read”命令,即可得到相應(yīng)的熒光強度和相應(yīng)的濃度。將此 “Save”為擴展名為“.qnt”的文件。(3)Time Course模式“Acquire Mode”中選擇“Time Course”模式。b.“Configure”中“Parameters”的參數(shù)設(shè)置如下:給定EX、EM波長;設(shè)定狹縫寬度;設(shè)定反應(yīng)時間;讀取速度;讀取點數(shù); 點擊“OK”,完成參數(shù)的設(shè)定?!癆uto Zero” 命令校零點。,點擊“Start”,即可開始掃描。掃描結(jié)束后,即可得到熒光強度對時間的工作曲線?!癝ave”為擴展名為“.TMC”的文件。(3)關(guān)機退出軟件后關(guān)閉主機。注意事項請注意愛護液體比色皿,特別是測試有機樣品的同學(xué)請在測量完畢后用有機溶劑清洗,干燥后再放入盒子中,否則會造成比色皿表面嚴(yán)重污染,影響透光度。(1)無機化合物的分析與有機試劑配合物后測量;可測量約60多種元素。鈹、鋁、硼、鎵、硒、鎂、稀土常采用熒光分析法;氟、硫、鐵、銀、鈷、鎳采用熒光熄滅法測定; 銅、鈹、鐵、鈷、鋨及過氧化氫采用催化熒光法測定;鉻、鈮、鈾、碲采用低溫?zé)晒夥y定;鈰、銪、銻、釩、鈾采用固體熒光法測定(2)生物與有機化合物的分析 見表(3)熒光探針與蛋白質(zhì)或其他大分子結(jié)構(gòu)非共價相互作用而使一種或幾種熒光性質(zhì)發(fā)生改變的小分子物質(zhì)??捎糜谘芯看蠓肿游镔|(zhì)的性質(zhì)和行為。目前常用的熒光探針有熒光素類探針、無機離子熒光探針、熒光量子點、分子信標(biāo)等。熒光探針除應(yīng)用于核酸和蛋白質(zhì)的定量分析外,在核酸染色、DNA電泳、核酸分子雜交、定量PCR技術(shù)以及DNA測序上都有著廣泛的應(yīng)用。第五篇:實驗指導(dǎo)書礦山安全救護儀器應(yīng)用演示實驗實驗一 礦山安全救護儀器應(yīng)用演示實驗實驗類型:演示性實驗 實驗學(xué)時:2 實驗要求:限修實驗房間:安全432一、實驗?zāi)康氖煜げ⒄莆蘸粑?、自救器等救護設(shè)備的工作原理及使用方法。通過實驗,鞏固和加深對礦井工作中安全自救技術(shù)知識的理解及應(yīng)用。二、實驗內(nèi)容(一)過濾式自救器的使用(二)化學(xué)氧自救器的使用(三)壓縮氧自救器的使用(四)正壓氧氣呼吸器的使用三、儀器設(shè)備AZL60型過濾式自救器ZH15(30)型隔絕式系列化學(xué)氧化自救器ZYX30(45)型隔絕式系列壓縮氧自救器HYZ4/2型正壓氧氣呼吸器 隔絕式系列壓縮氧自救器主要用于煤礦井下或環(huán)境空氣發(fā)生有毒氣體污染及缺氧窒息性災(zāi)害時,現(xiàn)場人員迅速佩戴,保護佩戴人員正常呼吸迅速逃離災(zāi)區(qū)實現(xiàn)自救。四、所需耗材無。五、實驗原理、方法和手段(一)過濾式自救器工作原理:含有CO的空氣經(jīng)干燥后進入自救器中的觸媒層發(fā)生氧化反應(yīng),將CO氧化成無毒的CO2氣體,進入人體肺部,再呼出體外。在井下工作,當(dāng)發(fā)現(xiàn)有火災(zāi)或瓦斯爆炸時,必須立即佩用自救器,撤離現(xiàn)場。災(zāi)區(qū)空氣中氧濃度不低于18%%,僅能防護一氧化碳一種氣體。(二)化學(xué)氧自救器工作原理:化學(xué)氧自救器是利用生氧劑與人體呼出的CO2與水汽結(jié)合,發(fā)生化學(xué)反應(yīng)而生成氧氣來供給人呼吸。這些富氧氣體通過氣囊、降溫網(wǎng)、孔板、口具形成閉路循環(huán)系統(tǒng),供人呼吸。(三)壓縮氧自救器ZY45 型壓縮氧自救器是一種隔絕式再生式閉路呼吸保護裝置,主要用于煤礦或在普通大氣壓的作業(yè)環(huán)境中發(fā)生有毒有害氣體突出及缺氧窒息性災(zāi)害時,:本自救器主要由鼻夾,口具,氣囊,清凈罐,清凈罐底蓋,排氣閥, 氧氣瓶,減壓器,安全閥,手動供氣閥,開關(guān),開關(guān)把手,壓力表組成。工作原理:供氣原理:轉(zhuǎn)動開關(guān)把手,打開氣瓶閥氧氣瓶中的高壓氧氣就通過開關(guān)流入減 壓器和手動供氣閥,這時減壓器將以≥,如果 定量供氣量不能滿足人體需要時,可短時間按壓補氣壓板,以60L/min 的流量向氣囊供氣。呼吸原理:使用時,佩戴者咬住口具,夾上鼻夾,人體就和自救器組成了“人—機”呼吸系統(tǒng)。呼氣時,氣流通過呼氣閥經(jīng)內(nèi)氣囊進入清凈罐,其中的二氧化碳與清凈罐中的二氧化碳吸收劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)而被吸收,余下的氧氣進入外氣囊,吸氣時,通過吸氣閥進入人體,就完成了整個呼吸循環(huán)過程。在整個佩戴過程中,人的鼻孔被鼻夾夾住,通過“人口—口具”的呼吸連接,完全用嘴進行呼吸?!叭恕獧C” 的防止了甲烷瓦斯等有害氣體進入人體。減壓器安全保護原理,~ 時,安全閥開啟,向外泄氣泄壓,保護減壓器不發(fā)生爆炸。(四)正壓氧氣呼吸器HYZ4正壓氧氣呼吸器其呼吸循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)始終牌正壓狀態(tài),在面罩不嚴(yán)密的情況下,外界的有毒有害氣體不能進入到呼吸循環(huán)系統(tǒng)內(nèi),安全性高。正壓氧氣呼吸器具有整體重量輕、結(jié)構(gòu)緊湊、安全性高、防護性能好、佩戴舒適、操作簡單、維護量小、價格低廉等優(yōu)點,是礦山救護隊員、消防特勤指戰(zhàn)員、特種工程技術(shù)人員在嚴(yán)重污染、毒氣類型不明確或缺氧的惡劣環(huán)境下從事?lián)岆U救援工作必不可少的人體防護裝備。六、實驗步驟(一)過濾式自救器自救器隨身攜帶;揭起保護罩;掀起紅色開啟扳手,打開外殼密封;揭開并扔掉上外殼;抓住口具,拉出過濾器;將口具片塞進牙齒與嘴唇之間,緊閉嘴唇;雙手拉開鼻夾彈簧,夾好鼻子用口呼吸;取下安全帽,戴好頭帶;戴好安全帽,開始撤離危險區(qū)。(二)化學(xué)氧自救器將專用腰帶穿入自救器皮帶卡,固定在背部腰間。使用時先將自救器轉(zhuǎn)到腹前,一手托底,另一手拉開封口帶。去掉上外罐,手提頭帶將自救器抽出后將下外罐丟棄。戴好頭帶,整理好氣囊。拔掉口具塞,迅速啟動氧燭(若氧燭啟動失效,應(yīng)深吸氣后通過口具向藥罐呼氣以強制生氧)。將口具放入口中,口具片置于唇齒之間,牙齒咬緊牙墊,用鼻夾墊夾住鼻子,開始用口呼吸。均勻呼吸,快速撤離災(zāi)區(qū)。(三)壓縮氧自救器將自救器從佩戴時的腰部側(cè)面移到人體正前面。用手水平拉開左邊的塑料掛鉤下部,使上殼上的塑料掛鉤從下殼脫出。再解開上,下外殼另一邊的掛鉤;然后用手沿豎直方向?qū)⑸蠚ぬ崞穑顾c下殼脫離,這樣就完成了自救器的啟封。將口具放在嘴唇與牙齒之間,牙齒緊緊咬住口具
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