6消毒滅菌效果及環(huán)境衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測(cè)制度-資料下載頁
2025-09-13 23:57本頁面
【正文】 第 21 頁 共 25 頁 對(duì)照）與 4管霉菌培養(yǎng)管。培養(yǎng)管用量為 15ml/管。 （ 2）、對(duì)不能用破壞性方法取樣的特殊醫(yī)療用品，可用浸有無菌生理鹽水采樣液的棉拭子在被檢物品表面涂抹采樣。 手術(shù)鉗、鑷子等大件醫(yī)療器械取 2 件用沾有無菌洗脫液的棉拭子反復(fù)涂擦采樣，將棉拭子投入 5ml無菌洗脫液中，將采樣液混均，接種于需 厭氧培養(yǎng)管（共 6 管，其中一管作陽性對(duì)照）與霉菌培養(yǎng)管（共 4 管 ）。接種量為 1ml/管，培養(yǎng)管用量為 15ml/管。 培養(yǎng)： 在待檢樣品的需 厭氧培養(yǎng)管中，接種預(yù)先準(zhǔn)備的金黃色葡萄球菌陽性對(duì)照管 1： 1000 稀釋 1ml，將需 厭氧培養(yǎng)管以及陽性與陰性對(duì)照管均于 30~35℃ 培養(yǎng) 5 天，霉菌培養(yǎng)管與陰性對(duì)照管于 20~25℃ 培養(yǎng) 7 天，培養(yǎng)期間逐日檢查是否有菌生長，如加入供試品后培養(yǎng)基出現(xiàn)混濁或沉淀，經(jīng)培養(yǎng)后不能從外觀上判斷時(shí)，可取培養(yǎng)液轉(zhuǎn)種入另一支相同的培養(yǎng)基中或斜面培養(yǎng)基上，培養(yǎng) 48~72h 后，觀察是否再現(xiàn)混濁或斜面上有菌落生長，并在轉(zhuǎn)種的同時(shí)，取培養(yǎng)液少 量，圖片染色，用顯微鏡觀察是否有菌生長。 判定結(jié)果： 陽性對(duì)照 24h 內(nèi)應(yīng)有菌生長，陰性對(duì)照在培養(yǎng)期間應(yīng)無菌生長，如需 厭氧菌及霉菌培養(yǎng)管內(nèi)均為澄清或雖混濁但經(jīng)證明并 第 22 頁 共 25 頁 非有菌生長，判為滅菌合格； 如需 厭氧菌及霉菌培養(yǎng)管中任何一管顯混濁并證實(shí)有菌生長，應(yīng)重新采樣，分別同法復(fù)試 2 次，除陽性對(duì)照外，其他各管均不得有菌生長，否則判為滅菌不合格。 注意事項(xiàng)： 送檢時(shí)間不得超過 6h，若樣品保存于 0~4℃ ，則不得超過24h。被采樣表面＜ 100㎡，取全部表面；被采表面 ≥100 ㎡，取100㎡。 若消毒因子為化學(xué)消毒劑時(shí)，采樣液中應(yīng)加入相應(yīng)的中和劑。 六、使用中是消毒劑與無菌器械保存液 采樣時(shí)間。更換前使用中的消毒劑與無菌器械保存液。 采樣量級(jí)方法： 在無菌條件下，用無菌吸引管吸取 1ml被檢液體，加入 9ml稀釋液中混均。稀釋液中需根據(jù)不同種類消毒劑加入相應(yīng)中和劑，以中和被檢樣液的殘效作用。 醇類與酚類消毒劑，稀釋液用普通營養(yǎng)肉湯即可； 含氯、含碘、過氧化物消毒劑，需在肉湯中加入 %硫代硫酸鈉； 洗必泰、季銨鹽類消毒劑，需在肉湯中加入 3%（ w/v）吐溫80。 結(jié)果分析： 第 23 頁 共 25 頁 平板上有菌生長，證明被檢樣液有殘存活菌，若每個(gè)平板菌落數(shù)在 10個(gè)以下，仍可用于消毒處理（但不能用于滅菌），若每個(gè)平板菌落數(shù)超過 10 個(gè)，說明沒毫升被檢液含菌量已超過 100個(gè)，即不能再使用。 七、紫外線消毒效果的監(jiān)測(cè) 監(jiān)測(cè)方法。開啟紫外線燈 5min 后將紫外線強(qiáng)度指示卡或紫外線輻照計(jì)探頭置于距燈管下垂直距離 1m處，照射 1min。 結(jié)果判定： 普通 30w直管 型紫外線燈，新燈輻照強(qiáng)度 ≥90uw/ ㎡為合格；使用中的紫外線輻照強(qiáng)度 ≥70uw/ ㎡為合格； 30w 高強(qiáng)度紫外線新等輻照強(qiáng)度 ≥180uw/ ㎡為合格。 八、內(nèi)鏡消毒滅菌效果的監(jiān)測(cè) 采樣時(shí)間。在消毒滅菌后、使用前進(jìn)行采樣。 采樣方法： 監(jiān)測(cè)采樣部位為內(nèi)鏡的內(nèi)腔面。用無菌注射器抽取 10ml 含相應(yīng)中和劑的緩沖液，從待檢內(nèi)鏡活檢口注入，應(yīng) 15ml 無菌試管從活檢出口收集，及時(shí)送檢， 2h 內(nèi)檢測(cè)。 菌落計(jì)數(shù)。將送檢液用漩渦器充分震蕩，取 加入2 只直徑 90mm 無菌平皿，每個(gè)平皿分別加入已經(jīng)熔化的 45~48℃營養(yǎng)瓊脂 15ml~18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，于 35℃ 培養(yǎng)48h后計(jì)數(shù)。 第 24 頁 共 25 頁 結(jié)果判定。菌落數(shù) /鏡 =2個(gè)平皿菌落數(shù)平均值 20 。 致病菌檢測(cè)。將送檢液用漩渦器充分震蕩，取 分別接種于 90mm血平皿、中國蘭平皿和 ss平皿，均勻涂布， 35℃培養(yǎng) 48h，觀察有無致病菌生長。 九、壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測(cè)方法 化學(xué)監(jiān)測(cè)方法： ① 化學(xué)指示卡（管：放入每一個(gè)待滅菌的物品包中央。 ② 化學(xué)指示膠帶監(jiān)測(cè)法：將其 粘貼于每一個(gè)滅菌包外。 ③ 結(jié)果判定： 所放的指示卡（管）的性狀或顏色均變至規(guī)定的條件，即滅菌合格。 生物監(jiān)測(cè)法 ① 指示菌株： 為嗜熱脂肪桿菌芽孢（ atcc7953 或 ssik31 株）。 ② 檢測(cè)方法： 將兩個(gè)嗜熱脂肪桿菌芽孢菌片分別裝入滅菌小紙袋內(nèi)，置于標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包中心部位。 預(yù)真空滅菌柜內(nèi)，排氣口上方放置一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試包（由 16條全棉手術(shù)巾，每條 41cm66cm ，將每條手術(shù)巾的長邊先折成 3層，短邊折成 2 層然后疊放，作成 23cm23cm15cm 大小的 測(cè)試包）；下排氣滅菌柜室內(nèi)，排氣口上方放置一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試包（由3 件平紋長袖手術(shù)衣、 4塊小手術(shù)巾、 2塊中手術(shù)巾、 1 塊大手術(shù) 第 25 頁 共 25 頁 巾， 30塊 10cm10cm8 層紗布敷料包裹成 25cm30cm30cm 大小）。手提壓力蒸汽滅菌器用通氣貯物盒（ 22cm13cm6cm ）代替標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包，盒內(nèi)盛滿中試管，指示菌片放于中心部位的兩只試滅菌管內(nèi) （試管口用滅菌牛皮紙包封），將貯存盒平放于手提壓力蒸汽滅菌器底部。 經(jīng)一個(gè)滅菌周期后，在無菌條件下，取出標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包的指示菌片，投入溴甲酚紫蛋白胨水培養(yǎng)基中，經(jīng) 56℃ 培養(yǎng) 7 天（自含式生物指示劑按說明書執(zhí)行），觀察培養(yǎng)基顏色變化。 檢測(cè)時(shí)必須設(shè)陰性對(duì)照和陽性對(duì)照。 ③ 結(jié)果判定。 每個(gè)指示菌片接種的溴甲酚紫蛋白胨水培養(yǎng)基都不變色，判定為滅菌合格； 指示菌片之一接種的溴甲酚紫蛋白胨水培養(yǎng)基，由紫色變?yōu)辄S色時(shí)，則滅菌不合格。 bd試驗(yàn)。預(yù)真空壓力蒸汽滅菌器每天滅菌前進(jìn)行。二 0一三年九月一日
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