【正文】 30～ 35℃ 培養(yǎng)箱培養(yǎng) 48 小時(shí)，觀察結(jié)果，每皿菌落數(shù)應(yīng) ≤1 個(gè)，否則應(yīng)加強(qiáng)清潔消毒工作，必要時(shí)驗(yàn)證生物安全柜的性能。 藥品及培養(yǎng)基是微生物試驗(yàn)的基礎(chǔ)，直接影響微生物試驗(yàn)結(jié)果。適宜的培養(yǎng)基制備方法、貯藏條件和質(zhì)量控制試驗(yàn)是提供優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基的保證。 藥品及培養(yǎng)基的采購(gòu)及接收 微生物實(shí)驗(yàn) 室所用的藥品及培養(yǎng)基必須是符合國(guó)家相關(guān)資質(zhì)的公司所出產(chǎn)的。實(shí)驗(yàn)室根據(jù)檢驗(yàn)需要申購(gòu)所需的培養(yǎng)基并做 第 23 頁(yè) 共 27 頁(yè) 好相應(yīng)的接收記錄。 培養(yǎng)基的接收 微生物檢驗(yàn)室應(yīng)指定專人負(fù)責(zé)培養(yǎng)基的管理，在接收培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)核對(duì)培養(yǎng)基的品名、來(lái)源、批號(hào)、生產(chǎn)日期、有效期、數(shù)量，脫水培養(yǎng)基應(yīng)附有處方和使用說(shuō)明，并做好接收記錄。 培養(yǎng)基的制備 培養(yǎng)基可按處方配制，也可使用按處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基。在制備培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇質(zhì)量符合要求的脫水培養(yǎng)基或單獨(dú)配方組分進(jìn)行配制。脫水培養(yǎng)基應(yīng)附有處方和 使用說(shuō)明，配制時(shí)應(yīng)按使用說(shuō)明上的要求操作以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合要求，不得使用結(jié)塊或顏色發(fā)生改變的脫水培養(yǎng)基。脫水培養(yǎng)基或單獨(dú)配方組分應(yīng)在適當(dāng)?shù)臈l件下貯藏，如低溫、干燥和避光，所有的容器應(yīng)密封，尤其是盛放脫水培養(yǎng)基的容器。商品化的成品培養(yǎng)基除了應(yīng)附有處方和使用說(shuō)明外，還應(yīng)注明有效期、貯藏條件、適用性檢查試驗(yàn)的質(zhì)控菌和用途。 為保證培養(yǎng)基質(zhì)量的穩(wěn)定可靠，各脫水培養(yǎng)基或各配方組分應(yīng)準(zhǔn)確稱量，并要求有一定的精確度。配制培養(yǎng)基最常用的溶劑是純化水，特殊情況下，可能需要用去離子水和蒸餾水。應(yīng)記錄各稱量物的重量 和水的使用量。配制培養(yǎng)基所用容器和配套器具應(yīng)潔凈，可用純化水沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來(lái)物質(zhì)的殘留，對(duì)熱敏感的培養(yǎng)基如糖發(fā)酵培養(yǎng)基其分裝容器一般應(yīng)預(yù)先進(jìn) 第 24 頁(yè) 共 27 頁(yè) 行滅菌，以保證培養(yǎng)基的無(wú)菌性。 脫水培養(yǎng)基應(yīng)完全溶解于水中，再行分裝與滅菌。配制時(shí)若需要加熱助溶，應(yīng)注意不要過(guò)度加熱，以避免培養(yǎng)基顏色變深。如需要添加其他組分時(shí)，加入后應(yīng)充分混勻。應(yīng)按照生產(chǎn)商提供或使用者驗(yàn)證的參數(shù)進(jìn)行培養(yǎng)基的滅菌。商品化的成品培養(yǎng)基必須附有所用滅菌方法的資料。培養(yǎng)基滅菌一般采用濕熱滅菌技術(shù)，特殊培養(yǎng)基可采用薄膜過(guò)濾除菌。 培養(yǎng)基若采用不適當(dāng)?shù)募訜岷蜏缇鷹l件，有可能引起顏色變化、透明度降低、瓊脂凝固力或 ph 的改變。因此，培養(yǎng)基應(yīng)采用驗(yàn)證的滅菌程序滅菌，培養(yǎng)基滅菌方法和條件，應(yīng)通過(guò)無(wú)菌性試驗(yàn)和促生長(zhǎng)試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。此外，對(duì)高壓滅菌器的蒸汽循環(huán)系統(tǒng)也要加以驗(yàn)證，以保證在一定裝載方式下的正常熱分布。溫度緩慢上升的高壓滅菌器可能導(dǎo)致培養(yǎng)基的過(guò)熱，過(guò)度滅菌可能會(huì)破壞絕大多數(shù)的細(xì)菌和真菌培養(yǎng)基促生長(zhǎng)的質(zhì)量。滅菌器中培養(yǎng)基的容積和裝載方式也將影響加熱的速度。因此，應(yīng)根據(jù)滅菌培養(yǎng)基的特性，進(jìn)行全面的滅菌程序驗(yàn)證。應(yīng)確定每批培養(yǎng)基滅菌后的 ph 值（冷卻至室溫 25℃ 測(cè)定）。若培養(yǎng)基處方中未列出 ph值的范圍，除非經(jīng)驗(yàn)證表明培養(yǎng)基的 ph 值允許的變化范圍很寬，否則， ph 值的范圍不能超過(guò)規(guī)定值士 。 制成平板或分裝于試管的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行下列檢查。容器和蓋子不得破裂，裝量應(yīng)相同，盡量避免形成氣泡，固體培養(yǎng)基表面 第 25 頁(yè) 共 27 頁(yè) 不得產(chǎn)生裂縫或漣漪，在冷藏溫度下不得形成結(jié)晶，不得污染微生物等。應(yīng)檢查和記錄批數(shù)量、有效期及培養(yǎng)基的無(wú)菌檢查。 培養(yǎng)基的貯藏 自配的培養(yǎng)基應(yīng)標(biāo)記名稱、批號(hào)、配制日期等信息，并在已驗(yàn)證的條件下貯藏。商品化的成品培養(yǎng)基 標(biāo)簽上應(yīng)標(biāo)有名稱、批號(hào)、生產(chǎn)日期、 失效期及培養(yǎng)基的有關(guān)特性，生產(chǎn)商和使用者應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)基使用說(shuō)明書上的要求進(jìn)行貯藏，所采用的貯藏和運(yùn)輸條件應(yīng)使成品培養(yǎng)基最低限度的失去水分并提供機(jī)械保護(hù)。 培養(yǎng)基滅菌后若貯藏在高壓滅菌器中，質(zhì)量可能會(huì)受影響，一般不提倡這種存放法。瓊脂培養(yǎng)基不得在 o℃ 或 o℃ 以下存放，因?yàn)槔鋬隹赡芷茐哪z特性。 培養(yǎng)基應(yīng)避光保存，若要長(zhǎng)期保存，應(yīng)置于密閉容器中以防止水分流失。瓊脂平板最好現(xiàn)配現(xiàn)用，如置冰箱保存，一般不超過(guò) 1 周，且應(yīng)密閉包裝，若延長(zhǎng)保存期限，保存期需經(jīng) 驗(yàn)證確定。固體培養(yǎng)基滅菌后的再融化只允許 1 次，以避免因過(guò)度受熱造成培養(yǎng)基質(zhì)量下降或微生物污染。培養(yǎng)基的再融化一般采用水浴或流通蒸汽加熱。若使用微波爐， 應(yīng)避免培養(yǎng)基過(guò)度受熱及水分的蒸發(fā)，更要注意安全。融化的培養(yǎng)基應(yīng)置于 45～ 50℃ 的水浴中，不得超過(guò) 8 小時(shí)。傾注培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)擦干培養(yǎng)基容器外表面的水分，避免容器外壁的水滴 第 26 頁(yè) 共 27 頁(yè) 進(jìn)人培養(yǎng)基中造成污染。使用過(guò)的培養(yǎng)基（包括失效的培養(yǎng)基）應(yīng)按照國(guó)家污染廢物處理相關(guān)規(guī)定進(jìn)行。 質(zhì)量控制試驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)試驗(yàn)用培養(yǎng)基建立質(zhì)量控制程序，以確保所用 培養(yǎng)基質(zhì)量符合相關(guān)檢測(cè)的需要。實(shí)驗(yàn)室配制或商品化的成品培養(yǎng)基的質(zhì)量依賴于其制備過(guò)程，采用不適宜方法制備的培養(yǎng)基將影響微生物的生長(zhǎng)或復(fù)蘇，從而影響試驗(yàn)結(jié)果的可靠性。所有配制好的培養(yǎng)基均應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量控制試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)室配制的培養(yǎng)基的常規(guī)監(jiān)控項(xiàng)目是 ph、適用性檢查試驗(yàn)，定期的穩(wěn)定性檢查以確定有效期。 培養(yǎng)基在有效期內(nèi)應(yīng)依據(jù)適用性檢查試驗(yàn)確定培養(yǎng)基質(zhì)量是否符合要求。有效期的長(zhǎng)短將取決于在一定存放條件下（包括容器特性及密封性）的培養(yǎng)基其組成成分的穩(wěn)定性。 除藥典附錄另有規(guī)定外，在實(shí)驗(yàn)室中，若采用已驗(yàn)證的 配制和滅菌程序制備培養(yǎng)基且過(guò)程受控，那么同一批脫水培養(yǎng)基的適用性檢查試驗(yàn)可只進(jìn)行 1 次。 如果培養(yǎng)基的制備過(guò)程未經(jīng)驗(yàn)證，那么每一批培養(yǎng)基均要進(jìn)行適用性檢查試驗(yàn)，試驗(yàn)的菌種可根據(jù)培養(yǎng)基的用途從相關(guān)附錄中進(jìn)行選擇，也可增加從生產(chǎn)環(huán)境及產(chǎn)品中常見(jiàn)的污染菌株。培養(yǎng)基的質(zhì)屋控制試驗(yàn)若不符合規(guī)定，應(yīng)尋找不合格的原因，以防止問(wèn)題重復(fù)出現(xiàn)。任何不符合要求的培養(yǎng)基均不能使用。 第 27 頁(yè) 共 27 頁(yè) 用于環(huán)境監(jiān)控的培養(yǎng)基須特別防護(hù)，最好要雙層包裝和終端滅菌，如果不能采用終端滅菌的培養(yǎng)基，那么在使用前應(yīng)進(jìn)行100％的預(yù)培養(yǎng)以防止外來(lái) 的污染物帶到環(huán)境中及避免出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。