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觀察細(xì)胞的技術(shù)-基礎(chǔ)知識(shí)-資料下載頁

2025-11-15 15:39本頁面

【導(dǎo)讀】由于細(xì)胞非常小而又復(fù)雜,很難觀察到其結(jié)構(gòu)并了解其組成,更難了解各種各樣的組分是如何起作用的。細(xì)胞生物學(xué)家發(fā)展了許多技術(shù)來研究細(xì)胞。除了水之外,細(xì)胞中似乎沒有什么東西能干擾光通過細(xì)胞,因此,用普通的光學(xué)顯微鏡觀察未經(jīng)處理的細(xì)胞幾乎是看不見的。細(xì)胞生物學(xué)家發(fā)現(xiàn)某些染料能使組織染上顏色,而且有些染料出人意料地表現(xiàn)出專一性地對(duì)細(xì)胞某些特定的成分的染色反應(yīng),如細(xì)胞核可一被堿性染料染色,這種有差別的染色使他們能夠清楚地看到細(xì)胞內(nèi)部的結(jié)構(gòu)。目前的技術(shù)通常是把細(xì)胞暴露在與蛋白質(zhì)的氨基形成化學(xué)建的化合物中,從而把臨近的分子連接起來。組織一般太軟,不能將其直接切成薄片。刀不是將冰凍的細(xì)胞切斷,而是使之裂開,就好象把一塊月餅掰開一樣。用這樣的方法制備膜的標(biāo)本,膜蛋白和一層脂類會(huì)完整地保留下來,在電鏡下觀察膜斷裂面的蛋白質(zhì)顆粒和膜的表面結(jié)構(gòu),圖形富有立體感。

  

【正文】 用特定方法制成切片的標(biāo)本,而掃描失電子顯微鏡電子光速不穿過標(biāo)本而是從其表面反射,因此能觀察到細(xì)胞的三維影象。掃描隧道電子顯微鏡則利用存在于樣品中的電子。在研究三維影象方面,下面兩種方法特別有用,就是用冰凍撕裂和冰凍蝕刻技術(shù)制備標(biāo)本,再用電子顯微鏡進(jìn)行觀察。先在非常低的溫度下,快速將樣本冰凍,再用冷的刀將樣品撕裂。刀不是將冰凍的細(xì)胞切斷,而是使之裂開,就好象把一塊月餅掰開一樣。再用蝕刻法使冷凍的細(xì)胞撕裂面更為清晰,也就是在真空中除去水分。用這樣的方法制備膜的標(biāo)本,膜蛋白和一層脂類會(huì)完整地保留下來,在電鏡下觀察膜斷裂面的蛋白質(zhì)顆粒和膜的表面結(jié)構(gòu),圖形富有立體
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