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高中生物同步課件:53血紅蛋白的提取和分離3人教版選修1-資料下載頁

2024-11-17 07:20本頁面

【導(dǎo)讀】對蛋白質(zhì)的研究和應(yīng)用,首先要得到純凈的蛋白質(zhì)。我們就一起來學(xué)校蛋白質(zhì)的提取和分離。和力等等,可以用來分離不同蛋白質(zhì)。通道,由多糖類構(gòu)成如葡聚糖、瓊脂糖,子篩作用,來進行分離的方法。有緩沖作用的溶液叫做緩沖溶液。的()的影響,維持PH基本不變。調(diào)節(jié)緩沖劑的()。電泳利用了待分離樣品中各種分子。瓊脂糖凝膠電泳和聚丙稀酰胺凝膠電泳。SDS能使蛋白質(zhì)發(fā)生完全變性。量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有電荷量。每條肽鏈環(huán)繞一個亞鐵血紅素基團,可攜帶一。血紅蛋白因含血紅。目的是去除雜蛋白。要加入檸檬酸鈉防止血液凝。固;離心將血液分層,用膠頭吸管吸出黃色血漿;在蒸餾水和甲苯作用下,紅細胞破裂釋放。離心分層;濾紙過濾去除脂溶性沉淀層;分液漏。斗分出紅色透明液體。75表示凝膠的得水值,即每克凝膠膨脹。會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低分離效果。

  

【正文】 0mmol/l的磷酸緩沖液到適當(dāng)高度,連接緩沖液洗脫瓶,打開下端出口進行洗脫。 ⑤收集: 待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時,用試管收集流出液,每 5ml收集一試管,連續(xù)收集。 (在分離過程中,如果紅色區(qū)帶均勻一致的移動,說明色譜柱制作成功) 注意: 正確的加樣操作: 不要觸及并破壞凝膠面。 使吸管管口沿管壁環(huán)繞移動。 視頻 ( ’~) (三)純度鑒定 ? 使用最多的是 SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳。 二、實驗操作 ? 蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步: ? ( 1)樣品處理:包括洗滌紅細胞;血紅蛋白的釋放;離心等操作收集血紅蛋白溶液。 ? ( 2)粗分離:透析除去分子較小的雜質(zhì)。 ? ( 3)純化:通過凝膠色譜法將分子量較大的雜質(zhì)蛋白質(zhì)除去。 ? ( 4)純度鑒定:通過 SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定。 視頻 ( ’~) 練習(xí)鞏固 隨著人類跨入蛋白質(zhì)組時代,對蛋白質(zhì)的研究和應(yīng)用越來越深入,首先要做的一步是 A 弄清各種蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu) B 弄清各種蛋白質(zhì)的功能 C 弄清各種蛋白質(zhì)的合成過程 D 獲得高純度的蛋白質(zhì) 用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的過程中,關(guān)于蛋白質(zhì)的敘述,正確的是 A 相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)行程大于相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì) B 相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)行程小于相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì) C 相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)行程等于相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì) D 二者根本無法比較 使用 SDS聚丙烯酰胺電泳過程中,不同蛋白質(zhì)的電泳遷移率完全取決于 A 電荷的多少 B 分子的大小 C 肽鏈的多少 D 分子形狀的差異 在采血容器中加入檸檬酸鈉的目的是 A 調(diào)節(jié) pH B 維持紅細胞的能量供應(yīng) C 防止微生物生長 D 防止血液凝固 一分子血紅蛋白最多可攜帶的 O2分子數(shù)或者 CO2分子數(shù)分別是 A 2 B 4 C 1 D、 1 記住樣品處理中的血紅蛋白溶液離心后分層順序 自上而下 是: 有 機溶劑 脂 類物質(zhì) 血 紅蛋白溶液 紅 細胞破碎物沉淀
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