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高中生物同步課件:53血紅蛋白的提取和分離3人教版選修1-文庫吧在線文庫

2024-12-31 07:20上一頁面

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【正文】 在蒸餾水和甲苯作用下,紅細(xì)胞破裂釋放 ? 分離血紅蛋白溶液: ? 離心分層;濾紙過濾去除脂溶性沉淀層;分液漏斗分出紅色透明液體。 ③頂塞的制作: 打孔 → 安裝玻璃管 。 B、裝填:將凝膠懸浮液一次性的裝填入色譜柱內(nèi),裝填時(shí)輕輕敲動(dòng)色譜柱,使凝膠填裝均勻。 ④洗脫: 小心加入 pH= 的 20mmol/l的磷酸緩沖液到適當(dāng)高度,連接緩沖液洗脫瓶,打開下端出口進(jìn)行洗脫。 ? ( 4)純度鑒定:通過 SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定。 視頻 ( ’~) (三)純度鑒定 ? 使用最多的是 SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳。 不能發(fā)生洗脫液流干,露出凝膠顆粒的現(xiàn)象 。B、代表意義: “ G”表示凝膠的交聯(lián)程度,膨脹程度及分離范圍 。 ? 透析: ? 裝入透析袋并置于磷酸緩沖液中( PH為 )透析。 (一)樣品處理 ? 紅細(xì)胞的洗滌: ? 目的是去除雜蛋白。 SDS能使蛋白質(zhì)發(fā)生完全變性。調(diào)節(jié)緩沖劑的( )就可以制得( )使用的緩沖液。對蛋白質(zhì)的研究和應(yīng)用, 首先要得到純凈的蛋白質(zhì)。 具體過程 相對分子質(zhì)量較小 較長 較慢 相對分子質(zhì)量較大 凝膠外部 較短 較快 凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理 概念:在一定的范圍內(nèi),能對抗外來少量強(qiáng)酸、強(qiáng)堿或稍加稀釋不引起溶液PH發(fā)生明顯變化的作用叫做緩沖作用,具有緩沖作用的溶液叫做緩沖溶液。電泳利用了待分離樣品中各種分子( )以及分子本身( )、( )的 不同使帶電分子產(chǎn)生不同的( ),從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。 SDS 單條肽鏈的分子量 分子的大小 思考 人們用雞的紅細(xì)胞提取 DNA,用人 的紅細(xì)胞提取血紅蛋白的原因是什么? 雞的紅細(xì)胞具有細(xì)胞核,含有 DNA,便于進(jìn)行 DNA的提取,人的紅細(xì)胞無細(xì)胞核,結(jié)構(gòu)簡單,血紅蛋白含量豐富便于提取血紅蛋白。 ? 透析: 分離血紅蛋白溶液 有機(jī)溶劑 無色透明的甲苯層 脂類物質(zhì) 白色薄層固體(脂溶性物
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