【導(dǎo)讀】助寧夏包蟲(chóng)病防治項(xiàng)目要求，制定本方案。動(dòng)物之間存在細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)及多房棘球絳蟲(chóng)循環(huán)的區(qū)域。以上流行區(qū)以鄉(xiāng)為單位劃分。村居民和高危職業(yè)人群進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查。超確診的符合病例診斷標(biāo)準(zhǔn)的現(xiàn)患病例。的診斷標(biāo)準(zhǔn)排除包蟲(chóng)病的居民。選取與病例同性別的，且年齡控。制在±5歲范圍內(nèi)為其匹配條件選擇對(duì)照。建立犬驅(qū)蟲(chóng)記錄表，并妥善保存。采取多種措施努力控制和減少犬的數(shù)量，被在犬能夠吞食的食物中，給犬喂食。確認(rèn)犬吞服后填寫犬驅(qū)蟲(chóng)。每月定期驅(qū)蟲(chóng)1次，連續(xù)12次。測(cè)與評(píng)價(jià)工作，確認(rèn)傳播阻斷后方可停止服藥。犬糞樣，共抽取20份。轉(zhuǎn)運(yùn)出售；嚴(yán)禁在屠宰場(chǎng)內(nèi)養(yǎng)犬，并防止犬進(jìn)入屠宰場(chǎng)。對(duì)病變臟器應(yīng)焚燒或深埋；也可將病變臟器煮沸。40分鐘，高原地區(qū)煮沸時(shí)間適當(dāng)延長(zhǎng)。每年在屠宰場(chǎng)檢查牛數(shù)不少于300頭。齡和內(nèi)臟有無(wú)病灶。

　　

【正文】 合 計(jì) 注：鄉(xiāng)級(jí)每月 5日前，縣級(jí) 10日前將上月完成情況逐級(jí)上報(bào)。 35 附件 91 犬糞收集的技術(shù)要點(diǎn)及檢測(cè)方法（糞抗原 ELISA 檢測(cè)） 方法一（雙抗夾心法） 1 犬糞標(biāo)本的收集和處理 用特制的采糞器插 入犬的肛門內(nèi)約 6cm 深處，輕輕捻轉(zhuǎn)后取出，將采糞器（約含 2g 糞便）插入裝有保存液 2ml 的試管中 ,輕輕搖動(dòng) ,使糞便完全混懸于液體中 ,3000rpm 離心 10 分鐘 ,取出上清 ,20 度保存?zhèn)溆?,犬糞保存液為,含 %NaN3,%Tween20,加或不加 %牛血紅蛋白 . 2 雙抗夾心 ELISA: 用包被液將成蟲(chóng)抗原 (購(gòu)買 ),用 包被液稀釋成 10181。g/ml 濃度，包被 PVC板，每孔 150181。l， 4℃ 18 小時(shí)后，用 ％ PBS－ T洗 3次。加含有 10％ 滅活小牛血清的 PBS－ T100181。l， 37℃下封閉 1小時(shí)，洗板，加犬糞標(biāo)本和滅活小牛血清各50181。l， 37℃ 1 小時(shí)，洗板，加 1： 200 標(biāo)記物， 37℃ 1小時(shí)，洗板，加 TMB底物液100181。l， 37℃ 30 分后加 2M H2SO45O181。l,終止反應(yīng)，讀各孔 A450。 方法二 1 準(zhǔn)備： 采糞前準(zhǔn)備好采糞管（ 50ml 帶螺口蓋塑料管，用前應(yīng)檢查管口是否滲漏），防水記號(hào)筆，一次性手套、口罩、帽子，采糞記錄單（本），圓珠筆（鉛筆），塑料口袋若干。 采糞前一天，村干部通知牧民栓管好自己的家犬，等待采集。 2 采 樣： 到達(dá)牧民家后，一人負(fù)責(zé)在采糞管上用防水記號(hào)筆寫下相應(yīng)編號(hào)，將寫好的采糞管交給采糞人，然后填寫采糞記錄單（本），須記錄采糞樣的區(qū)（鄉(xiāng)）名稱、村名、采集日期和采樣人姓名。 采糞人佩帶一次性手套、口罩、帽子，擰開(kāi)采糞管螺口塑料蓋，每個(gè)樣品采集 1/3 管的份量（盡量采集新鮮成型糞便）。旋緊口蓋，將手套翻轉(zhuǎn)過(guò)來(lái)包住采糞管，用翻出的拇指和食指綁緊手套口。 注意： 確保一管只裝一條犬糞。 將采好的糞樣裝入一大塑料袋內(nèi)，袋外注明采糞樣的區(qū)（鄉(xiāng)）名稱、村名、采集日期 ,于 2 周內(nèi)送檢。送檢樣品時(shí)，將采糞記 錄單（本）復(fù)印件一并附上。原采糞記錄單（本）應(yīng)妥善保管以備查詢和檢查。 樣品送到后，每管樣品加入含 1%福爾馬林的 PBS 液（糞樣保存液），待糞抗原 ELISA 檢測(cè)。 3 1%福爾馬林的 PBS 液配制 36 原液配制 : 氯化鈉 400 克 氯化鉀 10克 磷酸氫二鈉（無(wú)水） 克 (如果是含 12 個(gè)水的磷酸氫二鈉須用 克 ) 磷酸二氫鉀（無(wú)水） 10克 加蒸餾水至 5升 糞樣保存液配制 : 將上述原液做 10 倍稀釋 , 然后按每 100 毫升稀釋液加入 40%甲醛 1 毫升的比例配制的液體就是糞樣保存液。 4 檢測(cè) 37 附件 92 氫溴酸檳榔堿下瀉法檢查犬細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)操作規(guī)程 1 總則 細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)是需兩宿主寄生的寄生蟲(chóng)，其成蟲(chóng)寄生于終末宿主 (食肉動(dòng)物 )的小腸中，該成蟲(chóng)成熟后排出的卵，污染環(huán)境，感染中間宿主 (食草動(dòng)物 )，引發(fā)棘球蚴病。因此終末宿主的細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)感染情 況直接影響著人、畜間棘球蚴病的流行及發(fā)病情況。 我國(guó)棘球蚴病為典型的家養(yǎng)動(dòng)物循環(huán)型，即病原體循環(huán)于有蹄家畜和家牧犬之間，因此對(duì)家、牧犬進(jìn)行細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)感染情況調(diào)查，有著十分重要的流行病學(xué)和效果考核監(jiān)測(cè)的意義?，F(xiàn)國(guó)際還普遍采用 氫溴酸檳榔堿下瀉法 檢查犬的細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)感染情況?，F(xiàn)將該法介紹如下： 2 檢查區(qū)的選擇與設(shè)置 要求遠(yuǎn)離人群和交通要道、土質(zhì)較硬、有利于糞便收集。在檢查區(qū)內(nèi)要將鐵釬安置牢固，鐵釬之間間距 3m，避免犬互相撕咬。在檢查區(qū)邊挖一廢坑，坑深 1m，寬 ， 將所有糞便及廢棄物倒入坑內(nèi)。 3 檢查人員分工 最少 4 人。 1 號(hào)組員負(fù)責(zé)對(duì)犬一般情況進(jìn)行調(diào)查與登記編號(hào)，并對(duì)安全防護(hù)進(jìn)行監(jiān)督； 2 號(hào)組員實(shí)施灌藥； 3 號(hào)組負(fù)責(zé)保定； 4 號(hào)組員對(duì)所有犬排泄物進(jìn)行檢查。 藥品配制 氫溴酸檳榔堿粉末 水 100ml 砂糖 15～ 20g 混勻，配成 ％溶液，裝入清潔注射液瓶?jī)?nèi)備用。 防護(hù)用品 口罩、帽子、連體工作服、膠靴、乳膠手套、線手套、噴燈、汽油、酒 精、大塑料袋若干個(gè)、鐵 鍬 、石灰。 固定犬用品 鋼筋制鐵釬、拴犬鐵鏈、鐵制犬保定鉗。 投藥及檢蟲(chóng)用品 38 登記表、鐵制連續(xù)注射器、 30cm20cm黑底搪瓷盤、 1L 搪瓷杯、水壺、自制木片、挑蟲(chóng)針、平皿、放大鏡、硫酸阿托品注射液。 5 檢查方法 投藥 按每公斤體重 劑量，從犬口腔內(nèi)注入藥液，投藥前禁食 12 小時(shí)。將犬拴好，由 3 號(hào)組員負(fù)責(zé)保定，固定好犬頭部，以免其咬人， 2 號(hào)組員用注射器將藥液注入口腔，在藥未注完及注射器沒(méi)有從犬嘴拿出以前，抓犬的 3 號(hào)組員絕不能放開(kāi)犬頭。 或：投約前禁食 12 小時(shí)。按 ，將藥物注入饅頭或其它食物中喂犬。 糞樣的收集 服藥后 40～ 60 分鐘，被檢犬在排出大量正常糞便后，會(huì)排出標(biāo)準(zhǔn)糞樣 (無(wú)內(nèi)容物的粘性液體 )，收取約三分之一，置于黑底搪瓷盤中。 如超過(guò) 60 分鐘，被檢犬還未排出標(biāo)準(zhǔn)糞樣，可第二次投藥。投藥劑量為第一次的一半。 用藥反應(yīng) 少量犬服藥后發(fā)生反應(yīng)，如心博過(guò)速、抽搐、虛脫等癥狀，這些癥狀一般在短時(shí)間內(nèi)會(huì)自行消失，但反應(yīng)嚴(yán)重時(shí)，應(yīng)使用硫酸阿托品治療，劑量為 ～ 1mg／ kg。 6 結(jié)果判定 蟲(chóng)體檢查 用 4%～ 10%的福爾馬林溶液清洗搪瓷盤中標(biāo)準(zhǔn)糞樣，沉淀片刻，棄上清，晃動(dòng)盤，肉眼判定有無(wú)蟲(chóng)體，發(fā)現(xiàn)蟲(chóng)體吸入平皿，逐條計(jì)數(shù)、登記 (附：家牧犬細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)感染調(diào)查統(tǒng)計(jì)表 )。檢完后，認(rèn)真清洗糞檢盤，避免重檢。 感染強(qiáng)度 分三級(jí)。 I 輕度 10 條以下， Ⅱ 中度 10～ 100 條， Ⅲ 強(qiáng)度 100 條以上。 7 消毒處理 糞便收集完后，將犬繼續(xù)固定 12 小時(shí)，排出的糞便深埋。所有地面上糞便清除干凈，扔入廢坑，撒入石灰，并用土埋實(shí)，以免小孩或犬將坑內(nèi)廢棄物弄出造成污染。 凡被犬糞接觸的地面、鐵鍬、鐵釬、鐵鏈等一律用噴燈焚燒。 39 防護(hù)服、膠靴、手套、帽子、口罩等檢查用品用后按無(wú)污染解脫法，分別裝入結(jié)實(shí)塑料袋中 (每袋體積不能大于高壓鍋所能容納的體積 )，嚴(yán)格高壓消毒處理。 所有參與工作的人員用肥皂和清水反復(fù)洗手。 此項(xiàng)工作危險(xiǎn)性很大，為了自己和當(dāng)?shù)鼐用?、家畜安全自開(kāi)始至結(jié)束，要嚴(yán)密注視每一個(gè)環(huán)節(jié)，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)處理；嚴(yán)禁外人進(jìn)入場(chǎng)地，消毒必須徹底。 40 附件 10： 寧夏包蟲(chóng)病防治工作 家（牧）犬細(xì)粒棘球絳蟲(chóng) 感染調(diào)查統(tǒng)計(jì)表 調(diào)查地點(diǎn) 縣 鄉(xiāng) 村（隊(duì)） 調(diào)查時(shí)間 調(diào)查人 犬 主 犬 況 體型 飼養(yǎng) 方式 檢查方式 細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)數(shù)量及感染強(qiáng)度 備注 姓名 民族 職業(yè) 犬號(hào) 年 齡 品種 毛色 大 中 小 拴養(yǎng) 放養(yǎng) 注： 1 體型：大： 20kg以上；中： 10kg以上。用 V符號(hào)表示。 2 檢查方式：氫溴酸檳榔堿下瀉法；剖檢法。 3細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)感染強(qiáng)度： 表示陰性； +表示 10 條以下； ++表示 10100 條； +++表示 100 條以上。 填表時(shí)間： 審核人： 填表單位： 41 附件 111 剖檢法檢查羊包蟲(chóng)（棘球蚴）病操作規(guī)程 1 總則 棘球蚴病是細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)的中絳期 棘球蚴寄生在哺乳動(dòng)物臟器內(nèi)所引起的疾病。我國(guó)棘球蚴病為典型的家養(yǎng)動(dòng)物循環(huán)型，即病原體循環(huán)于有蹄家畜中間宿主和家、牧犬終末宿 主之間。有蹄家畜包括馬、驢、騾、黃牛、水牛、牦牛、犏牛、駱駝、綿羊、山羊及豬等，所有這 11 種家畜都有不同程度的感染棘球蚴病。其中綿羊感染最多，是發(fā)病重點(diǎn)，也最具有流行病學(xué)及防制監(jiān)控意義。 目前對(duì)中間宿主患棘球蚴病的生前診斷均無(wú)行之有效的方法?，F(xiàn)普遍采用國(guó)際公認(rèn)的剖檢法，對(duì)家畜屠宰后，進(jìn)行棘球蚴病感染調(diào)查。 2 檢查用品 大搪瓷盤、刀、 30cm 50cm的切菜板、單面刀片、平皿、水桶。 3 檢查方法 被檢羊登記、編號(hào)。 剖檢。 內(nèi)臟檢查。 取出剖檢羊胃、腸等消化器官，仔細(xì)檢查體腔內(nèi)心、肝、肺、腎及脾等臟器外表面，有無(wú)包囊或小白點(diǎn)形的囊狀物。 將帶包囊和小白點(diǎn)狀物的臟器從體腔內(nèi)取出，用清水冼去血污，置入瓷盤上。 檢囊 首先肉眼逐區(qū)觀察臟器表面，對(duì)于表層明顯可見(jiàn)的包囊先切開(kāi)，看其結(jié)構(gòu)。然后，用手逐區(qū)觸摸臟器，發(fā)現(xiàn)臟器實(shí)質(zhì)內(nèi)囊狀物時(shí)，切開(kāi)深層囊，觀其結(jié)構(gòu)。 幼年羊包囊處于發(fā)育初期，其形態(tài)和大小不同于成年羊包囊，呈小白點(diǎn)狀，囊徑小于 ，不易觀察，生長(zhǎng)在臟器表面和內(nèi)部。檢查辦法應(yīng)先肉眼仔細(xì)逐區(qū)觀察臟器 表面，將表面所有可疑小白點(diǎn)囊狀物 字型切下，放入平皿。然后，將被檢臟器按順序切成 2～ 5mm 的薄片，逐片用手觸摸，肉眼檢查，發(fā)現(xiàn)囊狀物，用 字型切下，放入平皿。 4 判定結(jié)果 包囊判定 42 包囊位于臟器的實(shí)質(zhì)內(nèi)，周圍由宿主結(jié)締組織包圍，呈灰白色，有半透明感。 囊壁粉皮樣白色，切開(kāi)囊壁，可見(jiàn)囊腔，囊液透明無(wú)色。含囊砂 (原頭蚴 )和子囊或無(wú)。 幼齡羊大多形成 ，具以下特征： 小囊外觀呈 珠狀，表面光澤，位于臟器包膜之下，有很強(qiáng)的觸感，質(zhì)地堅(jiān)韌有彈性。 將囊沿中軸切開(kāi)，具明顯囊腔，其內(nèi)含少量透明囊液，壁白色。 包囊計(jì)數(shù) 根據(jù)上述特征結(jié)構(gòu)，按不同臟器進(jìn)行包囊計(jì)數(shù)，測(cè)囊徑范圍，登記 (附：家畜棘球蚴病調(diào)查統(tǒng)計(jì)表 )。 5 被檢物處理 被檢臟器查完后煮沸或焚燒做無(wú)害化處理。 43 附件 112 寧夏包蟲(chóng)病防治集中屠宰場(chǎng) 家 畜棘球蚴病調(diào)查統(tǒng)計(jì)報(bào)表 縣 屠宰場(chǎng) 屠宰日期 編號(hào) 動(dòng)物種類 來(lái) 源（產(chǎn)地） 是否存在病臟 寄生臟器 包囊大小 包囊個(gè)數(shù)