青霉素發(fā)酵生產(chǎn)工藝xxxx-資料下載頁
2025-01-06 18:57本頁面
【正文】 ⒈種子培養(yǎng)期染菌 ⒉發(fā)酵前期染菌 ⒊發(fā)酵中期染菌 ⒋發(fā)酵后期染菌 37 染 菌 的 處 理 ? ⒈種子培養(yǎng)期染菌 種子培養(yǎng)主要是生長繁殖菌體。此時(shí)菌體濃度低，培養(yǎng)基營養(yǎng)豐富，因此容易染菌。種子培養(yǎng)期染菌，帶進(jìn)發(fā)酵罐中的危害極大，應(yīng)嚴(yán)格控制種子污染。當(dāng)發(fā)現(xiàn)種子受污染后均應(yīng)滅菌后棄去，并對(duì)種子罐、管道進(jìn)行檢查和徹底滅菌。 返 回 38 染 菌 的 處 理 ? ⒉發(fā)酵前期染菌 發(fā)酵前朗主要是菌體生長繁殖，代謝產(chǎn)物生成很少，染菌后雜菌容易繁殖，與生產(chǎn)菌爭奪營養(yǎng)成分和氧分，嚴(yán)重干擾生產(chǎn)菌的生長繁殖和產(chǎn)物的生成，因此要特別注意發(fā)酵前期的染菌。當(dāng)發(fā)酵前期染菌時(shí)，由于營養(yǎng)成分消耗不多，能耗也不大，從經(jīng)濟(jì)性的角度考慮應(yīng)迅速重新滅菌，補(bǔ)充必要的營養(yǎng)成分，重新接種進(jìn)行發(fā)酵。 返 回 39 染 菌 的 處 理 ? ⒊發(fā)酵中期染菌 發(fā)酵中期染菌將嚴(yán)重干擾生產(chǎn)菌的代謝，影響產(chǎn)物的生成。如產(chǎn)酸，產(chǎn)泡沫，使菌體自溶，使發(fā)酵液變臭等。發(fā)酵中期染菌，由于營養(yǎng)成分大量消耗，一般挽救處理困難，危害性大，發(fā)酵中期染菌應(yīng)做到早發(fā)現(xiàn)，早處理，通常做法是“倒罐”，即用一罐沒有染菌的發(fā)酵液與染菌的發(fā)酵液混合，使有害菌濃度下降，生產(chǎn)菌濃度提高進(jìn)而重新成為優(yōu)勢(shì)生長菌群。顯然，倒罐必然造成物料消耗和操作費(fèi)用的增加。 返 回 40 染 菌 的 處 理 ? ⒋發(fā)酵后期染菌 發(fā)酵后期產(chǎn)物積累較多，效價(jià)已經(jīng)很高，營養(yǎng)物質(zhì)接近耗盡，此時(shí)如染菌量不多，可繼續(xù)進(jìn)行發(fā)酵，如嚴(yán)重污染也可提前放罐，停止發(fā)酵，這在經(jīng)濟(jì)上往往是合算的。 41 下游操作 ?過濾 ?萃取 ?脫色 ?結(jié)晶 42 發(fā)酵液預(yù)處理 ? 青霉菌素發(fā)酵后，放罐，加少量絮凝劑沉淀蛋白，然后經(jīng)真空轉(zhuǎn)鼓過濾或板框過濾（青霉菌絲較粗，過濾較容易） ，除掉菌絲體及部分蛋白，過濾收率一般在 90%左右。 ? 青霉素易降解，發(fā)酵液及濾液應(yīng)冷卻至 10 ℃ 低溫保存，備后續(xù)提取精制 。 通常發(fā)酵液中青霉素濃度很低，僅 %~%左右，而雜質(zhì)濃度比青霉素的高幾十倍甚至幾千倍。發(fā)酵液中常見的雜質(zhì)有：菌絲、未用完的培養(yǎng)基、易污染雜菌、產(chǎn)生菌的代謝產(chǎn)物等。 43 提 取 ? 溶媒萃取法 青霉素游離酸易溶于有機(jī)溶劑，而青霉素鹽易溶于水。利用這一性質(zhì)，在酸性條件下青霉素轉(zhuǎn)入有機(jī)溶媒中，調(diào)節(jié) pH，再轉(zhuǎn)入中性水相，反復(fù)幾次萃取，即可提純濃縮。 常用有機(jī)溶劑：醋酸丁酯（或戊酯） 44 提 取 ? 溶媒萃取法 萃取 23次。從發(fā)酵液萃取到醋酸丁酯時(shí)， pH選擇 ，從醋酸丁酯反萃到水相時(shí)， pH選擇 。 發(fā)酵濾液與醋酸丁酯體積比 34。 萃取總收率在 85%左右 。 45 青 霉 素 提 取 ? 青霉素的提取遵循下面四個(gè)原則 ： ⒈時(shí)間短 ⒉溫度低 ⒊ pH適中 ⒋勤清洗消毒 46 脫色 萃取液中添加活性炭，除去色素、熱源，過濾，除去活性炭。 47 結(jié)晶 萃取液一般通過結(jié)晶提純 。 直接結(jié)晶：在 2次乙酸丁酯萃取液中加醋酸鈉－乙醇溶液反應(yīng)，得到結(jié)晶鈉鹽。加醋酸鉀－乙醇溶液，得到青霉素鉀鹽。 共沸蒸餾結(jié)晶：萃取液，再用 M NaOH萃取， 。加 積丁醇， 16－ 26℃ ， 。水和丁醇形成共沸物而蒸出。鈉鹽結(jié)晶析出。結(jié)晶經(jīng)過洗滌、干燥后，得到青霉素鈉產(chǎn)品。 48 青霉素鉀鹽發(fā)酵生產(chǎn)流程 49 謝謝！ 50 演講完畢，謝謝觀看！
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