【正文】
的比例 , 如 H2PO4和 HPO42,HSO4和 SO42, NH3和 NH4+。 進而影響界面電位 U2U1,對蛋白質(zhì)的分配系數(shù)產(chǎn)生強烈的影響 。 通常 pH的微小變化就會引起蛋白質(zhì)分配系數(shù)發(fā)生 2~ 3數(shù)量級的變化 。 雙水相萃取 06 7 8 9pHKpH 對磷酸化酶的分配系數(shù)的影響相系統(tǒng): 7 .2 % P E G 4 0 0 0 / 6 .7 % D e x T 5 0 0 ,2 0 0 m M 緩沖液 ◆ PO 4 3 ■ T ri s 在 P E G / D e x 系統(tǒng)中,當(dāng)使用 T r i s 緩沖液時,在 p H 7 8 . 5 范圍內(nèi),不會使緩沖離子的電荷發(fā)生改變,對酶的分配系數(shù)影響不大;而在使用磷酸鹽緩沖液時,改變 pH 對緩沖離子的電荷數(shù)及其不同離子的比例影響很大,而時酶分配系數(shù)的發(fā)生明顯改變。雙水相萃取 溫度對分配系數(shù)的影響 溫度主要影響兩相系統(tǒng)的形成 , 隨著溫度的降低 , 分相的臨界聚合物濃度減小 , 所以在臨界點附近 , 溫度對酶的分配系數(shù)影響較大 , 而在遠離臨界點時 , 影響較??;在相組成一定時 , 溫度的降低會使相圖的結(jié)點線增長 , 兩相差異增大 , 可引起分配系數(shù)的下降 。 使用 PEG/(NH4)2SO4相系統(tǒng)從細菌中萃取熒光素酶時 ,溫度對分配系數(shù)的影響不明顯 。 雙水相萃取 通常酶的穩(wěn)定性會隨溫度的增高而減低 , 但在雙水相系統(tǒng)中 , 由于所使用的聚合物含有多羥基 , 對酶有保護作用 , 即使在室溫下 , 酶的失活也不明顯 。 因此酶的雙水相萃取可以在室溫下進行 , 這可以節(jié)省因冷卻造成的大量能摹 。 雙水相萃取 雙水相萃取技術(shù)主要應(yīng)用于粗酶提取與回收 , 也可用于對純度要求不高的酶制劑的生產(chǎn) 。 如果使用具有高度選擇性的親和萃取技術(shù)也可以生產(chǎn)一些純度較高的酶制劑 , 如試劑用酶 。 因為對試劑用酶的純度要求并很不高 , 只要沒有干擾測定的其他酶就可以使用 。 應(yīng)用 雙水相萃取 雙水相系統(tǒng)萃取酶的一般流程圖 雙水相萃取 LOGO Thank You! LOGO 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH