【正文】 反式作用因子的作用方式⑴ 成環(huán)假說(shuō) 位于不同 DNA結(jié)合位點(diǎn)上的兩個(gè)蛋白質(zhì)通過(guò)兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)之間 DNA彎曲成環(huán)，而彼此靠近，直接接觸而發(fā)揮作用。如一個(gè)反式因子與增強(qiáng)子結(jié)合， RNApol與啟動(dòng)子結(jié)合， 通過(guò) DNA柔曲性 ， 彎曲成環(huán) 使兩個(gè)蛋白質(zhì)靠近，為它們的相互作用提供條件。 ⑵ 滑動(dòng)假說(shuō) 一種反式因子結(jié)合 DNA的特定序列后， 沿著DNA滑動(dòng) 到另一個(gè)特定序列并與那里的蛋白質(zhì)發(fā)生相互作用促進(jìn)轉(zhuǎn)錄的起始。⑶ 扭曲假說(shuō) 反式因子與 DNA結(jié)合時(shí)， DNA發(fā)生變形，這種構(gòu)型的改變可 使 DNA解旋 ，有利轉(zhuǎn)錄的起始。 ⑷ 接力假說(shuō) 一個(gè)反式因子與 DNA特定序列結(jié)合， 促進(jìn)另一種蛋白質(zhì)結(jié)合于相鄰的 DNA序列 ，由此再促進(jìn)別的蛋白質(zhì)的結(jié)合，最后一直伸展到轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)，對(duì)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生調(diào)控作用。在短距離內(nèi)，這種機(jī)制是可能的，但遠(yuǎn)距離無(wú)法采用這種機(jī)制。 反式作用因子的組合式調(diào)控 幾種反式作用因子通過(guò)組合共同完成基因的表達(dá)調(diào)控 。如有 A、 B、 C三種反式因子結(jié)合 A基因的調(diào)控區(qū)，其中 A、 C兩種因子起正調(diào)控， B因子起負(fù)調(diào)控，其綜合效應(yīng)則是激活轉(zhuǎn)錄，又如有A、 B、 D三種因子結(jié)合 B基因的調(diào)控區(qū)，其中 A起正調(diào)控， B、 D起負(fù)調(diào)控，其綜合效應(yīng)則抑制 B基因的轉(zhuǎn)錄。 中介因子在轉(zhuǎn)錄起始調(diào)節(jié)中的作用 許多核受體與通用轉(zhuǎn)錄因子之間并不直接相互作用 ,而是通過(guò)中介因子在核受體與通用轉(zhuǎn)錄因子之間發(fā)揮作用。如 CBP在 CREB(cAMP response element binding protein)與通用轉(zhuǎn)錄因子 (TFⅡB) 之間發(fā)揮作用。C C結(jié)構(gòu)基因CREBCREB細(xì)胞核PiPiCREBPiCREBPiＣＲＥDNA蛋白質(zhì) 轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成 在轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成過(guò)程中， RNApol與啟動(dòng)子結(jié)合都是關(guān)鍵的一步 。細(xì)菌的 RNApol識(shí)別的是一段 DNA序列，真核生物 RNApol識(shí)別的不是單純的 DNA，是由轉(zhuǎn)錄因子與 DNA形成的蛋白質(zhì) DNA復(fù)合物，真核生物有 3種 RNApol，分別識(shí)別不同的啟動(dòng)子，轉(zhuǎn)錄不同的產(chǎn)物，需不同的轉(zhuǎn)錄因子。三、轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控三、轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控 （一） 5′ 端加帽和 3′ 端加多聚腺苷酸化的調(diào)控意義加帽和 Poly(A)尾不是 mRNA穩(wěn)定的唯一因素，但是十分重要的因素。這兩個(gè)因素至少保證 mRNA在轉(zhuǎn)錄過(guò)程中不被降解。核糖體在核內(nèi)組裝， rRNA受到蛋白質(zhì)的保護(hù)而不被降解。tRNA在合成后，形成特殊的空間結(jié)構(gòu)可抵抗降解。mRNA如果沒(méi)有 5′ 帽和 3′poly(A) 尾，在合成過(guò)程中就會(huì)被迅速降解。 （二） mRNA的選擇性剪接對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控作用 mRNA的選擇剪接 真核細(xì)胞的剪接過(guò)程中，參加拼接的外顯子可以不按其在基因組的線性分布次序拼接，內(nèi)含子也可以不被切除而保留，即一個(gè)外顯子或內(nèi)含子是否出現(xiàn)在成熟的 mRNA中是可選擇的，這種剪接方式稱為 選擇剪接 (alternative splicing)。⑴ 外顯子選擇 (optional exon)⑵ 內(nèi)含子選擇 (optional intron)⑶ 互斥外顯子（ mutually exclusive exon）⑷ 內(nèi)部剪接位點(diǎn) (internal splice site) (三 ) mRNA運(yùn)輸?shù)目刂苖RNA的運(yùn)輸是受到控制的 。 成熟的 mRNA大約只有 20%的 mRNA進(jìn)入胞漿，留在核內(nèi)的 RNA約在 1小時(shí)內(nèi)降解成小片段。 mRNA通過(guò)核膜的運(yùn)輸是一個(gè)主動(dòng)運(yùn)輸過(guò)程，核膜上的核孔是大約 9nm的通道，但可以運(yùn)輸大于9nm的顆粒，如核糖體（ 15nm）。核糖體均在核內(nèi)組裝，再運(yùn)輸?shù)桨麧{。 RNA從核運(yùn)輸至胞漿的運(yùn)輸?shù)恼{(diào)控機(jī)理目前還不清楚。四、翻譯水平的調(diào)控四、翻譯水平的調(diào)控 （一）翻譯起始的調(diào)控 5′ 帽子結(jié)構(gòu)（ m7GpppN）對(duì)翻譯的調(diào)控作用①m 7G帽有增強(qiáng)翻譯效率的作用② 5′ 帽子結(jié)構(gòu)有利于 mRNA從細(xì)胞核向細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)和增加其穩(wěn)定性③ 5′ 帽子結(jié)構(gòu)與 3′poly(A) 尾對(duì) mRNA的翻譯效率的調(diào)節(jié)有協(xié)同作用 5′AUG 對(duì)翻譯的調(diào)控作用 翻譯時(shí)， 90～ 95%的真核 mRNA符合第一 AUG規(guī)律 。某些 mRNA5′ 端非編碼區(qū)存在一個(gè)或數(shù)個(gè) AUG，存在起始位點(diǎn)上游的其它 AUG密碼或 5′AUG ，它抑制下游閱讀框的翻譯效率。 5′AUG 閱讀框與正常閱讀框不一致，從 5′AUG 翻譯很快遇到終止密碼子。 如酵母反式因子 GCN4mRNA，其 5′UTR 有 4個(gè)AUG，含 4個(gè)短的閱讀框，它們對(duì)正常閱讀框的翻譯有抑制作用。 TGF?3mRNA 5′UTR 含 11個(gè)AUG mRNA 5′ 端非編碼區(qū)長(zhǎng)度對(duì)翻譯的影響 5′UTR 長(zhǎng)度在 1780核苷酸之間，體外 翻譯效率與長(zhǎng)度呈正比，若第一個(gè) AUG與 5′ 帽結(jié)構(gòu)之間的距離在 12個(gè)核苷酸以內(nèi)時(shí)，則有一半以上的核糖體小亞基滑過(guò)第一個(gè) AUG 阻遏蛋白的調(diào)控作用 控制 mRNA的可翻譯性。阻遏蛋白與 mRNA 5′ 端結(jié)合，阻止 mRNA的翻譯，如鐵調(diào)節(jié)結(jié)合蛋白未與鐵結(jié)合時(shí)，可與鐵蛋白 mRNA的莖環(huán)結(jié)構(gòu)結(jié)合，而抑制其翻譯。有鐵時(shí)，該蛋白與鐵結(jié)合，從鐵蛋白 mRNA莖環(huán)結(jié)構(gòu)解離，鐵蛋白的翻譯效率提高 100多倍。 翻譯起始因子的功能調(diào)控⑴elF4F 因子的磷酸化對(duì)蛋白質(zhì)合成速率的激活作用 4F由 ?、 ?、 ?三個(gè)亞基組成，結(jié)合 mRNA 5′m7G,40s小亞基， elF2， GTP， MettRNA三元復(fù)合物才能與 mRNA相連，進(jìn)入翻譯的起始階段。 elF4F? PKC elF4F?p ?亞基磷酸化可促使 4F的三個(gè)亞單位復(fù)合物形成，這類復(fù)合物是起始因子識(shí)別 mRNA的活性形式，?亞基磷酸化的意義有待研究。 ⑵elF2 的磷酸化對(duì)翻譯的抑制作用 elF2是蛋白質(zhì)合成過(guò)程中重要的起始因子。其活性因磷酸化而降低。而磷酸化則由一種cAMP依賴性蛋白激酶所催化，由于血紅素能抑制 cAMP依賴性 蛋白激酶的活化，從而防止或減少 elF2失活，促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成。 （二） mRNA穩(wěn)定性的調(diào)節(jié) mRNA 3′ 端 poly(A)尾對(duì) mRNA穩(wěn)定性的影響 加上 poly(A)尾， mRNA就穩(wěn)定，削短或去除poly(A)尾， mRNA就降解。 半衰期：絲心蛋白 mRNA半衰期為幾天， ?珠蛋白 mRNA半衰期達(dá) 10小時(shí)，某些 mRNA僅 30分鐘或更短。 3′UTR 富含 AU序列對(duì) mRNA穩(wěn)定性的影響 如生長(zhǎng)因子 mRNA不穩(wěn)定，半衰期僅 30分鐘，其 3′UTR 存在 AU豐富區(qū)，它常由幾個(gè)相同分布的 UUAUUUAU8核苷酸序列組成。 3′UTR 的特殊結(jié)構(gòu)對(duì) mRNA穩(wěn)定性的影響 如組蛋白 mRNA3′UTR 有一莖環(huán)結(jié)構(gòu)，其穩(wěn)定性受 DNA合成的影響， DNA合成時(shí)，半衰期 1小時(shí)，無(wú) DNA合成時(shí)，半衰期 12分鐘。 又如轉(zhuǎn)鐵蛋白 mRNA3′UTR 的 AU豐富區(qū)，可形成 5個(gè)發(fā)夾結(jié)構(gòu)，有鐵時(shí)，鐵調(diào)節(jié)蛋白與鐵結(jié)合，而與 RNA解離， mRNA降解；無(wú)鐵時(shí)，調(diào)節(jié)蛋白與mRNA的莖環(huán)結(jié)構(gòu)結(jié)合，保護(hù) mRNA不被降解。 （三）微小 RNA對(duì)翻譯的影響 1993年和 2023年分別從線蟲中發(fā)現(xiàn)了 Lin4和Let7 miRNA。它們 呈生長(zhǎng)階段特異性表達(dá) ，通過(guò)對(duì) mRNA序列特異的反義抑制調(diào)控線蟲的不同發(fā)育階段的過(guò)渡?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)近 400個(gè)線蟲、人、水稻等真核生物 miRNA 如 Lin4 RNA通過(guò)與 Lin14 RNA的 3′ 端非翻譯區(qū)（ UTR）互補(bǔ)，短暫 下調(diào) Lin14蛋白質(zhì)的表達(dá) 水平，使線蟲由 L1期向 L2期轉(zhuǎn)化。 Lin4基因表達(dá)兩種 RNA，一個(gè)為 22個(gè)核苷酸，一個(gè)為 40個(gè)核苷酸，其序列高度保守。只要有一個(gè)堿基變化就失去了對(duì) Lin14蛋白質(zhì)合成的抑制作用。其抑制作用依賴 Lin14 mRNA終止密碼子與 poly(A）尾之間的 3′ 端非編碼區(qū)的一段序列，去除這個(gè)特殊序列， lin4 RNA則失去抑制作用。謝謝觀看 /歡迎下載BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. 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