【導(dǎo)讀】進入生物安全二級實驗室從事檢測工作的所有人員嚴格按照本規(guī)定執(zhí)行。在實驗室內(nèi)的一切活動，必須遵照生物安全手冊的規(guī)定進行。實驗室內(nèi)污染的空氣需通過高效過濾器后方能排出室外。實驗室內(nèi)產(chǎn)生的污水，必須經(jīng)過消毒后方可進入公共污水系統(tǒng)。實驗室的所有廢棄品，必須通過高壓滅菌后才能處理和清洗。實驗操作，置其內(nèi)進行，以保證實驗室內(nèi)空間的安全。數(shù)據(jù)，必須準確可靠：實驗室出具的檢驗報告，必須明確完整。開啟實驗室主電源，使實驗室及生物安全柜投入運行。污染材料飛濺的操作時，需加戴防護面罩。每一實驗步驟完成后，均應(yīng)清理臺面。放置污染物品的容器裝滿時，應(yīng)更換新的容器。放入高壓消毒袋內(nèi)，再次浸泡手套后除去手套，用75%酒精棉球擦面部裸露部位。記錄內(nèi)容應(yīng)簡明扼要，包括實驗日期，實驗?zāi)康暮?。跡應(yīng)清晰，數(shù)字成行成列，以避免錄入錯誤。將上述記錄在紙張上的實驗記錄應(yīng)用80福爾馬林，密閉熏蒸消毒6小時后方可帶出實驗室。

　　

【正文】 血清學(xué)試驗、樣品的處理和分裝應(yīng)在 BSL2 安全柜內(nèi)進行。 樣品離心使用密封的離心杯，以防濺出。 實驗過程中使 用的器材、實驗廢棄物均應(yīng)按廢棄物處理程序進行消毒處理。 當(dāng)傳染性標本溢出或濺出后，應(yīng)有專業(yè)人員立即消毒和清理。 實驗完畢，先消毒物體表面，再按規(guī)定程序脫下個人防護用品放入包裝袋內(nèi)就地高壓消毒，并進行空氣消毒。 離開實驗室前，必須按有關(guān)規(guī)定消毒雙手。 消毒方法 儀器等表面消毒：工作結(jié)束后，用含有效氯 1000 的消毒液或 75%乙醇溶液擦拭消毒，作用 20 分鐘以上。 實驗器材的分類消毒：將使用后的銳器方入防刺破、防滲漏的密閉專用銳器處置盒內(nèi)，121℃高壓消毒 30 分鐘。其他器材方入有效氯為 2020mg/L 的含氯消毒液內(nèi)浸泡 1 小時以上。處理時應(yīng)避免皮膚損傷。 工作臺等物體表面消毒：工作完畢，用含有效氯 2020mg/L 的消毒液或 75％乙醇溶液擦拭消毒，作用 20 分鐘以上。 個人防護用品消毒：實驗結(jié)束，將隔離衣、口罩、帽子、手套、鞋套等 121℃高壓消毒30 分鐘。防護鏡浸泡在 75％乙醇或有效氯為 1000mg/L 的含氯消毒劑中，作用 3060 分鐘。 手的消毒：用典伏或 75％的乙醇擦拭，作用 13 分鐘。 空氣消毒：每次實驗前后用紫外燈照 射消毒，每次不少于 1 小時，每立方米空間安裝紫外燈瓦數(shù)≥ ，距紫外燈 1 米處照射強度≥ 70W/㎡。 這張消毒：應(yīng)用 80ml/m3 福爾馬林，密閉熏蒸消毒 6 小時后方可帶出。 洛陽市澗西區(qū) 疾病預(yù)防控制中心 實驗室 生物安全管理手冊 文件代號 JXCDC/AQ0122020 第 1頁 共 2 頁 實驗室消毒隔離制度 第 2 版 第 0 次修訂 頒布日期 2020 年 2 月 1 日 21 地面消毒：工作結(jié)束，應(yīng)用含有有效 2020mg/L 的消毒液噴灑拖地。 廢棄物的 處理：實驗的廢棄物應(yīng)放入適當(dāng)?shù)娜萜鲀?nèi)，就地 121℃高壓消毒 30 分鐘，消毒后的廢棄物集中收集、焚燒處理。 使用前應(yīng)了解并掌握高壓鍋的原理及操作規(guī)則，以及不正確使用而導(dǎo)致的災(zāi)難性后果。 按照操作規(guī)程使用高壓鍋 接通電源，合上高壓滅菌器左側(cè)總電源開關(guān)。 注入加熱用水，注水至加熱器罩的水位水準器配件尖端浸入水中為止。 設(shè)定滅菌溫度，先按“編集”鍵，然后按上下鍵調(diào)節(jié)到滅菌所需溫度，然后按“實行”鍵，把所設(shè)溫度存進程序。 設(shè)定滅菌時間，先按 “編集”鍵，然后按上下鍵調(diào)節(jié)到滅菌所需時間，然后按“實行”鍵，把所設(shè)時間存進程序。 按“實行”鍵執(zhí)行滅菌程序，此時“滅菌”燈閃爍。 當(dāng)滅菌程序執(zhí)行完成，滅菌程序自動停止運行。 在確認壓力表的顯示壓力降到 0 刻度時，打開高壓滅菌器頂蓋，取出滅菌樣品。 高壓鍋操作人員在使用高壓鍋時不得離開崗位；在日常使用過程中，必須嚴格按照操作規(guī)程執(zhí)行，并按照規(guī)定進行設(shè)備的維護。每 1 年保養(yǎng)一次，每月檢測一次消毒效果。 高壓鍋的物品不得放的過滿，否則影響滅菌效果。放好被消毒滅菌的物品后，高 壓鍋的蓋子或門必須擰緊。 定期檢查高壓鍋，以確保其正常工作，防止意外事故發(fā)生，保證消毒滅局效果。 高壓滅菌安全操作步驟 在滅菌前將雙層的高壓滅菌帶包好，廢物在滅菌袋中的體積不能超過袋子體積的 3/4，滅菌袋用橡皮帶捆好，但不能扎得太死，否則蒸汽不能進入所料袋內(nèi)影響滅菌效果。 實驗產(chǎn)生的所有廢物應(yīng)該及時就地滅菌處理。如果滅菌器正在使用或優(yōu)于其它原因不能馬上使用，則廢物必須放在滅菌袋內(nèi)捆好并放在實驗室內(nèi)，在存放期間確保袋子無損壞。 當(dāng)高壓鍋消毒滅菌盜時間后，取出物品放在廢 物收集處。 當(dāng)開始滅菌時必須確信滅菌國內(nèi)水量合適，高壓溫度和時間設(shè)置正確。滅菌應(yīng)保持在121℃ 30 分鐘，時間和溫度不得超過設(shè)定值，否則滅菌袋會融化，清理困難。 洛陽市澗西區(qū) 疾病預(yù)防控制中心 實驗室 生物安全管理手冊 文件代號 JXCDC/AQ0122020 第 2頁 共 2 頁 實驗室消毒隔離制度 第 2 版 第 0 次修訂 頒布日期 2020 年 2 月 1 日 22 1．目的 規(guī)范緊急情況的處理工作。 2．適用范圍 微生物實驗室和微生物安全二級實驗室 。 3．職責(zé) 遇有緊急情況所有工作人員嚴格按此規(guī)程處理。 4．具體要求： 造成或可能造成實驗室污染，但未造成人身傷害的實驗室事故，由實驗室負責(zé)人處理。例如實驗過程中，由于標本、試劑溢出濺落造成操作臺或地面的污染等，應(yīng)立即噴灑消毒液并覆蓋浸透消毒液的紙巾，等消毒液徹底浸泡 30 分鐘后，對污染的物品進行處理。清理后的物品高壓滅菌。并填寫生物安全二級實驗室意外情況登記與處理記錄表，實驗室負責(zé)人應(yīng)指導(dǎo)這些處理行動，并檢查處理效果。 在沒有強毒微生物時，再實驗室內(nèi)受到意外傷害，例如割傷、燒傷、燙傷等，由實驗 室負責(zé)人處理。令受到傷害的人員立即停止工作，用消毒液清洗未破損的皮膚表面，傷口以碘伏消毒，眼睛用洗眼器反復(fù)沖洗。有在同一實驗室內(nèi)工作人員或派人迅速著裝進入實驗室，清除造成傷害的原因，清理實驗材料，幫助受傷人員緊急處理并撤離實驗室。受到傷害的人員應(yīng)立即就醫(yī)，并將受傷原因及接觸微生物的情況通報負責(zé)人。對其進行恰當(dāng)而完整的病史記錄。在其身體狀況未恢復(fù)之前，不得重新進入實驗室工作。實驗室在經(jīng)過整理，消除了造成傷害的故障之后，方可重新使用。 傷害事故可能導(dǎo)致被強毒微生物感染，例如針頭刺破、銳器割傷、粘膜暴露等途 徑接觸到感染性液體，首先進行局部處理，用肥皂和水清洗污染的皮膚，擠壓傷口盡可能擠出損傷處的血液，用肥皂或清水沖洗，用消毒液浸泡或涂抹消毒，并包扎傷口。在操作過程中發(fā)生培養(yǎng)物、污染材料濺落身體表面等情況，首先使用噴淋裝置，盡快將污染物沖洗掉，然后再進行局部處理。暴露的粘膜應(yīng)盡快用生理鹽水或清水沖洗干凈。實驗室負責(zé)人應(yīng)向上級部門報告，對受傷害者進行隔離觀察，同時根據(jù)情況預(yù)防性用藥，并寫出職業(yè)暴露后預(yù)防感染的評價和處理方案。 實驗室事故可能造成氣溶膠污染，如壓力容器或管道破裂等，立即關(guān)閉實驗室，疏散現(xiàn)場的所 有人員，對所有暴露人員提出相應(yīng)的醫(yī)學(xué)建議。立即通知實驗室負責(zé)人及生物安全員。至少在 1 小時內(nèi)，任何人員不得進入現(xiàn)場，以便氣溶膠的消散記空氣中較重微粒的沉降。張貼禁止入內(nèi)的警示標志。在生物安全員的監(jiān)督下進行消毒、凈化處理；執(zhí)行這項工作時應(yīng)當(dāng)穿戴合適的防護服及呼吸防護用具。實驗室負責(zé)人員除立即采取對應(yīng)措施外，應(yīng)向上級部門報告，填寫意外情況登記與處理記錄表。 培養(yǎng)物等傳染性物質(zhì)的破碎 被傳染性物質(zhì)物質(zhì)污染的小玻璃瓶及其他容器破碎時，用布或紙巾覆蓋，爾后將消毒劑傾倒其上，放置 30 分鐘。其后即可清除掉，玻璃碎片應(yīng) 當(dāng)用鑷子清理。污染區(qū)域應(yīng)當(dāng)用消毒劑清洗。破碎物品清理時如果使用了簸箕，應(yīng)將其進行高壓滅菌或用有效的消毒劑浸泡 24 小時。清理使用過的布、紙巾、抹布及拖把，放入污染廢棄物容器中。上述步驟均應(yīng)佩戴手套。 如果實驗室的紀錄表格、其他印刷品或書面材料遭到污染，在妥善轉(zhuǎn)抄后或烤后，應(yīng)當(dāng) 洛陽市澗西區(qū) 疾病預(yù)防控制中心 實驗室 生物安全管理手冊 文件代號 JXCDC/AQ0132020 第 1頁 共 2 頁 實驗室應(yīng)急處置預(yù)案 第 2 版 第 0 次修訂 頒布日期 2020 年 2 月 1 日 23 將其棄入污染廢棄物容器。 試管破碎于密閉式安全離心杯中 所有密閉式安全離心杯在生物安全過程中裝載和卸載。如果懷疑發(fā)生了破損，應(yīng)當(dāng)將其蓋子擰松；爾后，將整個離心杯高壓滅菌。 蓄意破壞 堅固、厚重的門、牢靠的鎖具以及限制出入，都是合適的防范措施。發(fā)現(xiàn)蓄意破壞情況后報告實驗室負責(zé)人及生物安全員，視破壞種類按照上述方法進行處理，并詳細填寫意外情況登記與處理記錄表。 洛陽市澗西區(qū) 疾病預(yù)防控制中心 實驗室 生物安全管理手冊 文件代號 JXCDC/AQ0132020 第 2頁 共 2 頁 實驗室應(yīng)急處置預(yù)案 第 2 版 第 0 次修訂 頒布日期 2020 年 2 月 1 日