【正文】 1978. 單擊此處編輯母版文本樣式 76 Henan University of Technology 譜圖疊加比較 單擊此處編輯母版文本樣式 77 Henan University of Technology 定性分析 2 確定吸收峰的位置 當通過其它方法獲得一系列可能的分子結構式后，利用伍德沃德 （ WoodwardFieser ）和斯科特 （ Scott）經驗規(guī)則求最大吸收波長，并與實測值對比。 伍德沃德規(guī)則： 它是計算共軛二烯、多烯烴及共軛烯酮類化合物 π— π*躍遷最大吸收波長的經驗規(guī)則。 斯科特規(guī)則： 是計算芳香族羰基化合物衍生物的最大吸收波長的經驗規(guī)則。 單擊此處編輯母版文本樣式 78 Henan University of Technology 定性分析 3. 對比吸光度或吸光系數的比值： 例 :藥典規(guī)定 VB12定性鑒別 λ278,λ361,λ550三處最大吸收 ， ?? 5 5 03 6 12 7 83 6 1 ??AAAA ，單擊此處編輯母版文本樣式 79 Henan University of Technology 結構分析 確定一些化合物的構型和構象 （見 影響紫外 可見吸收光譜因素） 1. 某些特征基團的判別 2. 共軛體系的判斷 3. 異構體的判斷 順反異構體判別 互變異構體判別 單擊此處編輯母版文本樣式 80 Henan University of Technology 定量分析 定量分析 LambertBeer law 1. 單組份定量方法 1）標準曲線法 條件：濃度與吸光度關系符合 LambertBeer law 過程： 配制標準系列 →固定條件 →測定 A→繪 Ac曲線 樣品 →同樣條件 →測定 A →內插 c或代入方程 cAKcA ???單擊此處編輯母版文本樣式 81 Henan University of Technology 定量分析 【 例 】 : 蘆丁含量測定 : 分別移取 ~5mL→ 25mL, 樣品 → 25mL 解 : A = + A=, c=cx%=1 2 3 4 5 6 試樣 濃度 cx 吸光度 蘆丁標準溶液曲線010 1 c 濃度mg/ 25m LA單擊此處編輯母版文本樣式 82 Henan University of Technology 定量分析 2）標準對比法 ： 條件：未知液濃度與標液濃度相近； 符合朗伯比爾定律。 因使單個標準，誤差因素較多。 標標cAk ?xx kcA ?標樣標樣標樣標樣AAccAAcc ????單擊此處編輯母版文本樣式 83 Henan University of Technology 例：精密稱取 B12樣品 ，用水溶液配成 100ml。精密吸取 ，又置 100ml容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，于 361nm處測定吸光度為 ，求 B12的百分含量。 解 : mLgmLgc i /?? ??????mLgc i / 0 0101 0 0 52???????9 8 . 0 %%1 0 001. 5 02 102 . 4 51 0 0 %% 5512 ???????樣ccB i 定量分析 單擊此處編輯母版文本樣式 84 Henan University of Technology 定量分析 2. 多組分定量方法 （ 1） 解聯立方程組的方法 :吸光度具有加合性。 測定同一試樣中兩個組分的含量 兩組份 X 和 Y，（將其顯色后），分別繪制吸收光譜： 1） X,Y 組份最大吸收波長不重迭，相互不干擾，按兩個單一組份處理。 x 1x 11 ???? A、測定?y 2y 22 ???? A、測定?x1x1xxx1x1???? ??AccA ???? y2y2yyy2y2???? ??AccA ????單擊此處編輯母版文本樣式 85 Henan University of Technology 2） y對 X組分測定不影響 在 λ 1處求 cx 求 cy 3） x,y 相互干擾，可通過解聯立方程組求得 X和 Y的濃度。 yyxxyx lclcA 222 ??? ?? ??? 定量分析 yyxxyx lclcA 222 ??? ?? ???yyxxyx lclcA 111 ??? ?? ????解線性方程組法 ?等吸收雙波長法 ?系數倍率法 單擊此處編輯母版文本樣式 86 Henan University of Technology 定量分析 【 例 】 以分光光度法測定合金鋼中的錳和鉻。稱取 樣，溶解后稀釋至 ，將其中的 Cr氧化成 Cr2O72， Mn氧化成 MnO4，然后在 440nm和 545nm用 光度值分別為 。已知 ε440Mn = ，ε440Cr = ,ε545Mn = 103 ， ε545Cr = 。求此合金鋼中 Mn， Cr的質量分數。(MMn= MCr= ) 單擊此處編輯母版文本樣式 87 Henan University of Technology 定量分析 根據吸光度的加合性列出聯立方程 A440=A440 Mn+A440Cr=ε440Mn l cMn++ε440Cr l c A545=A545Mn +A545Cr= ε 545Mn l cMn++ε545Cr l c = l cMn+ l cCr = x 103 l cMn+ l cCr cMn= 104 mol L1 cCr= 104 mol L1 單擊此處編輯母版文本樣式 88 Henan University of Technology 定量分析 （ 2） 雙波長法 定量測定兩混合物組分：等吸收波長法和系數倍率法。 *等吸收波長法 (等吸收點法） 等波長選擇的基本條件： 干擾組分在這兩個波長應具有相同的吸光度； 待測組分在這兩個波長處的吸光度差值應足夠大 A1=A1a+A1b+A1s A2=A2a+A2b+A2s ΔA= A2A1=(A2a A1a)+(A2bA1b)=(ε2bε1b)lcb λ2 λ1 a b 單擊此處編輯母版文本樣式 89 Henan University of Technology 定量分析 應用示例 : 雙波長法測定雙嘧啶片中甲氧芐啶 (TMP)的含量 雙嘧啶主要含 TMP和磺胺嘧啶（ SD） 選擇： λ2=274nm（為測定波長）， λ1=308nm（為參比波長）。 單擊此處編輯母版文本樣式 90 Henan University of Technology 定量分析 4. 導數光譜法 （ 1953年提出， 80年代起引人注目） 1）定義：將吸光度信號轉化為對波長的導數信號的方法。 導數光譜的波形特征： Gauss曲線表示光譜 2）目的：解決干擾物質與被測物質吸收光譜重疊， 消除膠體和懸浮物散射影響和背景吸收， 提高分辨率 3）原理： 將 A=εl c對波長進行 n次求導。 結論： 1階導數信號與濃度成正比。 2階、 3階 … .n 階導數信號亦與濃度成正比。 lcddd Ad nnnn????? ?單擊此處編輯母版文本樣式 91 Henan University of Technology cLdddAdcLdddAdcLdddAdcLddddAcLA444433332222?????????????????? 定量分析 3）特點： 隨導數階數的增加， 峰形越來越尖銳， 靈敏度提高 ,分辨率高。 同時把噪聲也放大了 吸收光譜曲線及其 1至 4階導數光譜 單擊此處編輯母版文本樣式 92 Henan University of Technology 應用示例 廢水中苯胺和苯酚的含量測定 圖中， Aλ C、 A λ D正比于苯酚的濃度， Aλ F 、 Aλ N 正比于苯胺濃度。利用標準曲線法，可分別測出廢水中苯酚和苯胺的濃度 。 單擊此處編輯母版文本樣式 93 Henan University of Technology 作業(yè) 思考題 1． 有機化合物的吸收光譜有哪些？各由什么（能級）躍遷產生？ 2．有機化合物紫外－可見吸收光譜是由哪些躍遷產生的？它們的能量次序如何？ 3．為什么化合物的紫外－可見光譜有峰和峰谷？在它們的分光光度法測定中，應選擇在何處進行測量，為什么？ 4．影響有機化合物紫外－可見光譜的因素有哪些？試舉例說明其影響情況。 5．影響吸收譜帶的因素有哪些？ 6．定性分析有哪些基本步驟？如何估計有機化合物的最大吸收波長？ 7．多組分定量方法以及雙波長法，導數法的特點 8. 紫外可見吸收光譜法的應用 9. 簡述紫外可見吸收光譜的產生。 10. 朗伯－比爾定律及其數學表達。 11. 光源的主要作用是什么？ 12. 各種類型紫外可見分光光度計的特點。 單擊此處編輯母版文本樣式 94 Henan University of Technology 5. 光導纖維探頭式分光光度計 （ optical fiber probetype spectrophotometer） 一種用光導纖維傳輸檢測光強的分光光度計（探測器） 特征：沿光線傳播的方向依次為入射狹縫、凹面光柵、光導纖維及探測器，光纖支架支承并固定光導纖維的入射端，光導纖維的出射端連接探測器。經過凹面光柵的衍射，各波長的出射光線由光導纖維傳輸到探測器上，再由探測器檢測出各個波長的光強度。經過凹面光柵的衍射，各波長的出射光線由光導纖維傳輸到探測器上，再由探測器檢測出各個波長的光強度。 優(yōu)點：免除陣列探測器的使用，節(jié)省費用，降低成本；省去探測器精確定位的麻煩，便于調試和維修；探測器的安裝位置可以不固定，為設計和安裝帶來很大的方便。 單擊此處編輯母版文本樣式 95 Henan University of Technology e e 吸收產生躍遷過程 分子中電子能級、 振動能級和轉動能級示意圖 電 子 能 級 振 動 能 級 轉 動 能 級 E1 E0 S1 S0 r r r’ r’