分離工程第四章ppt課件-資料下載頁
2025-09-11 18:21本頁面
【正文】 對萃取率的影響 離子強(qiáng)度對萃取率的影響主要是由離子對表面電荷的屏蔽作用所決定的： ，反膠束內(nèi)表面的雙電層變薄，減弱了蛋白質(zhì)與反膠束內(nèi)表面之間的靜電吸引，從而減少蛋白質(zhì)的溶解度； 電層變薄后，也減弱了表面活性劑極性基團(tuán)之間的斥力，使反膠束變小，從而使蛋白質(zhì)不能進(jìn)入其中； 度增加時，增大了離子向反膠束內(nèi) “ 水池 ” 的遷移并取代其中蛋白質(zhì)的傾向，使蛋白質(zhì)從反膠束內(nèi)被鹽析出來；，可以改變?nèi)芙庑阅?，鹽的濃度越高，其影響就越大。如離子強(qiáng) (KCl 濃度 )對萃取核糖酸酶 a,細(xì)胞色素 c和溶菌酶的影響見圖 ,由圖可見，在較低的 KCl濃度下，蛋白質(zhì)幾乎全部被萃取，當(dāng) KCl濃度高于一定值時 ,萃取率就開始下降，直至幾乎為零。當(dāng)然，不同蛋白質(zhì)開始下降時的 KCl濃度 是不同的。 表面活性劑類型的影響 :前面已經(jīng)提到陰離子表面活性劑、陽離子表面活性劑和非離子表面活性劑都可用于形成反膠束，關(guān)鍵是應(yīng)從反膠束萃取蛋白質(zhì)的機(jī)理出發(fā)，選用有利于增強(qiáng)蛋白質(zhì)表面電荷與反膠束內(nèi)表面電荷間的靜電作用和增加反膠束大小的表面活性劑，除此以外，還應(yīng)考慮形成反膠束及使反膠束變大 (由于蛋白質(zhì)的進(jìn)入 )所需的能量的大小、反膠束內(nèi)表面的電荷密度等因素，這些都會對萃取產(chǎn)生影響。 目前研究中常用的 AOT反膠束體系和其他體系有許多不足，如不能用于分子量較大的蛋白質(zhì)的萃取和往往在兩相界面上形成不溶性的膜狀物等等，為克服這些不足 ,可通過在單一表面活性劑中加入具有親和作用的生物表面活性劑或另一種非離子型表面活性劑的方法來改善萃取性能。 表面活性劑濃度的影響 增大表面活性劑的濃度可增加反膠束的數(shù)量，從而增大對蛋白質(zhì)的溶解能力。但表面活性劑濃度過高時，有可能在溶液中形成比較復(fù)雜的聚集體，同時會增加反萃取過程的難度。因此，應(yīng)選擇蛋白質(zhì)萃取率最大時的表面活性劑濃度為最佳濃度。 總結(jié)反膠束體系對核糖核酸酶 a與伴刀豆球蛋白進(jìn)行萃取的結(jié)果，得到了分配系數(shù) K同表面活性劑濃度 [S]以及 pH值的關(guān)系式： 1nK＝ A十 B*pH十 (C十 D*pH)ln[S] 式中系數(shù) A、 B、 C、 D取決于蛋白質(zhì)的性質(zhì)，可通過實(shí)驗(yàn)測定。 10． 3． 5 離子種類對萃取的影響 陽離子的種類對萃取率的影響主要體現(xiàn)在改變反膠束內(nèi)表面的電荷密度上。通常反膠束中表面活性劑的極性基團(tuán)不是完全電離的，有很大一部分陽離子仍在膠團(tuán)的內(nèi)表面上 (相反離子締合 )。極性基團(tuán)的電離程度愈大，反膠束內(nèi)表面的電荷密度愈大，產(chǎn)生的反膠束也愈大。 10． 3． 6 影響反膠束結(jié)構(gòu)的其他因素 :有機(jī)溶劑的種類影響反膠束的大小，從而影響水增溶的能力，所以可以利用因溶劑作用引起的不同膠束結(jié)構(gòu)實(shí)現(xiàn)選擇性增溶生物分子的目的，如 α 胰凝乳蛋白酶隨溶劑的不同在反膠束中增溶的比率會出現(xiàn)顯著的差別。 :當(dāng)使用陽離子表面活性劑時，引入助表面活性劑，能夠增進(jìn)有機(jī)相的溶解容量，這多半是由于膠束尺寸增加而產(chǎn)生的。 :溫度的變化對反膠束系統(tǒng)中的物理化學(xué)性質(zhì)有激烈的影響，增加溫度能夠增加蛋白質(zhì)在有機(jī)相的溶解度，例如增加溫度可使 α胰凝乳蛋白酶進(jìn)入 NH4氯仿相并在轉(zhuǎn)移率上分別增加 50％ 。
公司管理相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1