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第二篇第一章第二節(jié)液體培養(yǎng)基制備及滅菌-資料下載頁

2025-08-07 10:58本頁面
  

【正文】 路及罐內(nèi)的蒸汽冷凝水。 ( 8) 保壓 :滅菌結(jié)束后, 先關(guān)閉 所有的排汽閥, 后關(guān) 蒸汽進口閥, 待罐內(nèi)壓力低于無菌空氣壓力后, 向罐內(nèi)通入無菌空氣 ,以防止物料倒流至過濾器,后果嚴(yán)重。 ( 9) 降溫 :在夾套或蛇管中通入冷卻水降溫,直至降到發(fā)酵溫度。 (二)連續(xù)滅菌 ——連消塔滅菌流程和設(shè)備 ? 連續(xù)滅菌優(yōu)點 (相對分批滅菌) : ( 1)提高產(chǎn)量,設(shè)備利用率高; ( 2)受熱時間短,營養(yǎng)成分破壞少; ( 3)質(zhì)量較易控制,蒸汽負(fù)荷均衡,操作方便; ( 4)降低勞動強度,適用于自動控制。 ? 料液罐 (預(yù)熱 27~30 ℃ ) 連消塔 20S 110~ 130℃ 維持罐 8~ 25 min 噴淋冷卻器 30 ℃ 流程 2. 連續(xù)滅菌設(shè)備 套管式連消塔 混合式連消塔 連消器 (1)套管式連消塔 套管:內(nèi)走蒸汽,外走培養(yǎng)液 內(nèi)管上設(shè)有蒸汽小孔,噴出速度為25~40m/s 蒸汽從內(nèi)管上口進入,培養(yǎng)液從外筒下口進入, 從外筒上口出去,停留15~20 s,被加熱 到383~403 K(110~130℃). 蒸汽壓力0 .5~0 .8MP a 。 蒸汽小孔的孔距 從上到下減少 ,使蒸汽均勻。 這種連消塔比較高大,3 m高,改革為連消器,為0 .5 m。 ( 2)混合式連消塔 ( 3)連消器 (三)噴射加熱 ——真空冷卻流程 (急速冷卻器) 培養(yǎng)基(生培養(yǎng)液)用泵打入噴射加熱器,以較高速度自噴嘴噴出,借高速流體的抽吸作用與蒸汽混合后進入管道維持器,經(jīng)一定維持時間后通過一膨脹閥進入真空閃急蒸發(fā)室,因真空作用使水分急驟蒸發(fā)而冷卻到 70~80℃ 左右,再進入發(fā)酵罐冷卻到接種溫度。 流程特點: 優(yōu)點: 加熱(可達 140℃ )與冷卻在 瞬間完成, 營養(yǎng)成分破壞最少。 設(shè)計得合適的管道維持器能能保 證培養(yǎng)液先進先出,避免過熱。 真空冷卻通過 膨脹閥 急速降溫; 缺點: 保溫時間由管道長度來保證;管道 長,不易安裝;因此多用維持罐代 替。 由于真空冷卻后需用泵出料,對 泵的 密閉性能要求很 高才能避重新污染 ?;?qū)⒄舭l(fā)室置于離發(fā)酵罐液面 10m以上的高處,否則物料就不能流進發(fā)酵罐而進入真空系統(tǒng)。為目前很多工廠不采用的原因之一。 ? 另:該流程滅菌溫度取決于噴射加熱器中加入蒸汽的壓力和流量,要保持 滅菌溫度恒定就 需要使蒸汽的壓力和流量以及培養(yǎng)基的流量穩(wěn)定 ,故宜設(shè)置自動控制裝置,如果自動控制的滯后較大,也會引起操作不穩(wěn)定而產(chǎn)生滅菌不透或過熱現(xiàn)象。 特點: 蒸汽和料液迅速接觸,充分混合; 加熱在瞬間完成。 構(gòu)造: 如圖 蒸汽、料液以 高速 從噴嘴噴出時,將蒸汽 由吸入口經(jīng)吸入室進入 混合噴嘴中混合。 混合段較長 ,有利 于氣液混合。 料液在擴大管中 速 度能變成壓力能 ,因此 料液被壓至與擴大管相連的管道中。 間歇滅菌和連續(xù)滅菌的比較 ? 培養(yǎng)基采用連續(xù)滅菌時,加熱器、維持罐(管)和冷卻器以及發(fā)酵罐等都應(yīng)先進行滅菌,然后才能進行培養(yǎng)基的連續(xù)滅菌。 ? 同時組成培養(yǎng)基的耐熱性物質(zhì)和不耐熱性物質(zhì)可在不同的溫度下分開滅菌,以減少物質(zhì)的受熱破壞程度,也可將碳源與氮源分開滅菌,以免醛基與氨基發(fā)生反應(yīng),防止有害物質(zhì)的生成。 (五)生 產(chǎn)發(fā)酵罐的無菌接種 ? 生產(chǎn)規(guī)模發(fā)酵罐的接種,包括兩個方面: ? 從實驗室搖瓶或孢子懸浮液容器中移種入一個種子罐, ? 從一個種子罐移入另一個生產(chǎn)發(fā)酵罐中 。 從實驗室搖瓶或孢子懸浮液容器接種 從種子罐移種 (六)空消加熱滅菌 : ? ① 進行:容器的氣密性試驗確證容器無滲漏,把所有冷凝水排除閥打開后開啟蒸汽閥,通氣升溫。 ? ②待有一定壓強后,打開排空氣閥,以便把容器中原有的空氣排除干凈。 ? ③在現(xiàn)代發(fā)酵罐設(shè)計中,排空氣(廢氣)閥上連接有空氣過濾器,以保證發(fā)酵系統(tǒng)不受外界雜菌的污染,同時也防止生物反應(yīng)系統(tǒng)內(nèi)的生產(chǎn)菌株進入環(huán)境。 ? ④對大型或結(jié)構(gòu)復(fù)雜的罐和容器,也可采用抽真空排除空氣的方法。 ? ⑤當(dāng)罐壓升至 121℃ ,就開始計算殺菌時間,注意在殺菌過程中,不斷排除蒸汽管路及罐內(nèi)的蒸汽冷凝水。 ? ⑥滅菌時間達到工藝規(guī)定后,就結(jié)束滅菌操作, 先關(guān)閉所有排污閥及排氣閥,然后關(guān)蒸汽進氣閥,并打開無菌空氣進口閥,以確保罐內(nèi)蒸汽冷凝后不至形成真空而導(dǎo)致雜菌污染。 通常用無菌空氣保壓控制罐內(nèi)的壓在 ~。 MRC——英國醫(yī)學(xué)研究理事會 :( p412) 為保證蒸汽加熱滅菌高效、安全,應(yīng)確保下述幾點: ⑴確信設(shè)備的所有部件均能耐受 130 ℃ 的高溫。 ⑵為減少死角,盡可能采用焊接并把焊縫打磨光滑。 ⑶要避免滅菌不到的縫隙。若管路死端無可避免,要保證死端的長度不大于管徑的 6倍,且應(yīng)裝置一蒸汽閥以用蒸汽滅菌。 ⑷盡量避免在滅菌和非滅菌的空間之間只裝設(shè)一個閥門,以安全保證。 ⑸所有閥門均應(yīng)利于清洗、維護和殺菌,最常用的是 隔膜閥 。 ⑹設(shè)備的各部分均可分開滅菌,且需有獨自的蒸汽進口閥。 ⑺要保證所提供的滅菌用蒸汽是飽和的且不帶冷凝水, 不含微粒 或其他氣體。 ⑻蒸汽進口應(yīng)裝設(shè)在設(shè)備的高位點,而在最低處裝排冷凝水閥。 ⑼管路配置應(yīng)能徹底排除冷凝水,故管路需有一定斜度和裝設(shè)排污閥門。 (七)發(fā) 酵罐輔助設(shè)施的蒸汽滅菌管路布置 ( 1)空氣分布器的蒸汽滅菌管路布置 空氣分布器管底部應(yīng)開有排除冷凝水的排污孔。 先開 B閥,讓蒸氣從空氣分布器噴入罐內(nèi),底部進氣 當(dāng)達到 時,同時開 A閥,此時蒸氣同時通過A、 B進入罐內(nèi),至 ,維持工藝設(shè)定時間。保壓過程均使 AB同時開啟。 B A ( 2) 浸沒管路與旁路進口管的滅菌布管 在蒸汽滅菌過程中, A、B閥需同時開啟。 旁路進口管的容器的蒸汽滅菌管道布置 : 向下進入: 裝有冷凝水閥 B A ( 3)排料管蒸汽滅菌配置: 排料口必須設(shè)在最低點,以便 清洗、排污及滅菌。 空罐滅菌時排出冷凝水 滅菌時 : A、 C、 F開啟 B、 D、 E關(guān)閉 清洗時 : A、 C、 E開啟 B、 D、 F關(guān)閉 本章小結(jié) ? 第一節(jié)培養(yǎng)基制備 ? 一、糖蜜原料的預(yù)處理 ? 二、淀粉質(zhì)原料水解 √ ? (一)淀粉質(zhì)原料水解過程 ? (二)酒精生產(chǎn)淀粉原料連續(xù)蒸煮流程和設(shè)備 √ ? (三)啤酒麥汁制備及設(shè)備 √ ? (四)谷氨酸生產(chǎn)淀粉水解流程和設(shè)備 ? 第二節(jié)液體培養(yǎng)基滅菌 ? 一、滅菌的目的、要求和方法 ? 二、濕熱滅菌的理論基礎(chǔ) √ ? 三、影響滅菌的因素 ? 四、培養(yǎng)基滅菌的流程和設(shè)備 √ 四、培養(yǎng)基滅菌的流程和設(shè)備 √ ? (一)間歇滅菌 ? (二)連消塔滅連續(xù)菌流程及設(shè)備 √ ? (三)噴射加熱連續(xù)滅菌流程及設(shè)備 √ ? (四) 薄板換熱器連續(xù)滅菌流程及設(shè)備 √ ? (五)空罐滅菌 ? (六)生產(chǎn)發(fā)酵罐的無菌接種 ? (七)管道滅菌 ? 。 ? 理 ?
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