【正文】 分離能力強，質(zhì)譜定性、結(jié)構(gòu)分析能力強，兩者聯(lián)用，取長補短，更快、更高效。GCMS、HPLCMS、CEMS、GCFTIR、HPLCFTIR、HPLCNMR、HPLCNMRMS色譜聯(lián)用特點：；；；全掃描——對指定質(zhì)荷比范圍內(nèi)的離子全部掃描并記錄。色譜質(zhì)譜三維譜全離子（Total Ion）色譜圖或總離子流色譜圖——總離子強度隨時間變化的曲線。選擇離子（Select Ion）監(jiān)測圖——選擇一定m/z的離子進行掃描。掃描時對選定的離子進行檢測，其它離子不被記錄，能提高靈敏度，改善峰形和準確度，主要用于定量分析。選擇反應(yīng)監(jiān)測質(zhì)量色譜圖——又稱提取離子色譜圖，是由全掃描質(zhì)譜中提取一種質(zhì)荷比的離子得到的色譜圖。離子化方式：EI（電子轟擊離子源）、FAB（快原子轟擊離子源）、ESI、MALDI、API（大氣壓電離源）接口（1）要求：、方便、可靠（2）目的：GCMS：除載氣；降壓；富集（3）分類：GCMS：一般式（直接導(dǎo)入型、分流型、濃縮型）和特殊式HPLCMS：電噴霧離子化接口（ESI）、大氣壓電離源如大氣壓化學(xué)離子化接口（APCI）常見的離子化方式有兩種：一種是樣品在離子源中以氣體的形式被離子化，另一種為從固體表面或溶液中濺射出帶電離子。很多情況下進樣和離子化同時進行。質(zhì)量分析器：四極桿、離子阱、TOF，兩個主要技術(shù)參數(shù)是所能測定的質(zhì)荷比范圍（質(zhì)量范圍）和分辨率。MSMS串聯(lián)：時間串聯(lián)和空間串聯(lián)二、公式小結(jié)Nernest方程：Red Ox + eE=EOx/Red0+RTnFln[Ox][Red]課件給出數(shù)值：R=、F=96487，實際用下式即可：E=EOx/Red0+[Ox][Red]氣相色譜D=2N/S或者3N/SD——檢測限或敏感度，某組分峰高恰為噪音（N）的2或3倍時，單位時間內(nèi)載氣引入檢測器中的該組分質(zhì)量（g/s）或者單位體積載氣中所含該組分的量（mg/ml）。S——靈敏度或響應(yīng)值，1ml載氣攜帶1mg某組分通過檢測器所產(chǎn)生的電壓，或者每秒鐘1g組分被載氣攜帶通過檢測器所產(chǎn)生的電壓。朗伯比爾定律A=EbcA：吸光度，A=lgT（T=I/I0，稱為透光率）E：吸光系數(shù)，b：比色池厚度（cm），c：濃度（mol/L或者質(zhì)量百分數(shù)）E分為摩爾吸光系數(shù)ε和質(zhì)量吸光系數(shù)E1cm1%，兩者關(guān)系為： ε=M10E1cm1%，其中M為分子量。（1）條件：；；。（2）當T=，即A=。透光率20%~65%，~，濃度相對誤差在約3倍ΔT以內(nèi)。色譜基本公式（1）速率理論：H=A+B/u+Cu（Van Deemter方程）H：塔板高度，A：渦流擴散系數(shù)，B：縱向擴散系數(shù)，C：傳質(zhì)阻抗系數(shù)，u：流動相線速度；(u小)，B/u大，分子擴散占主導(dǎo)；(u大)，Cu大，傳質(zhì)阻力占主導(dǎo)；（2）塔板理論：H=L/nL：有效柱長，n：塔板數(shù)n=16tRW2或n=tR：保留時間，W：峰寬，W1/2：半峰寬。其中，W=4σ，W1/2=（σ：標準差），即W= W1/2色譜柱的長度一定時，理論板數(shù)目n越大，色譜峰越窄。（3）分配系數(shù)和保留因子分配系數(shù)：K=cscm，保留因子： k=msmm=KVsVms：固定相，m：流動相色譜基本保留方程（保留時間與保留因子的關(guān)系）：tR=t0(1+k)(a) 色譜條件一定時，K或k值越大，則組分的保留值也越大。(b) 兩個組分的K或k值差別越大，則相應(yīng)的兩色譜峰相距就越遠。（4）分離度（一般要求R≥）R=2tR2tR1W1+W2或色譜分離方程：R=n4?α1α?k21+k2，其中α=k2/k1，分離因子電磁輻射基本公式（1）λ=c/νλ：波長，ν：頻率，c：波速（2）波數(shù)：σ=1/λ（3）E=hνE：光量子能量，h=1034：普朗克常數(shù)熒光分析熒光效率Φ=發(fā)射熒光的光子數(shù)吸收激發(fā)光的光子數(shù)NMR定量（1）峰面積：A=πγHMγ：旋磁比，H：外磁場強度，M：質(zhì)子數(shù)（2）信號強度（峰高）：υ=γHT2Mγ：旋磁比，H：外磁場強度，M：質(zhì)子數(shù)，T2：自旋自旋弛豫常數(shù)（與質(zhì)子具體環(huán)境有關(guān)）（3）內(nèi)外標測定法：Ws=AsAR?EqsEqR?WR，其中，Eq=Mn，M：分子量，n：質(zhì)子數(shù)（4）相對含量測定：W1W2=A1M1/n1A2M2/n2三、綜合解譜可能化合物（1）三聚氰胺（Mr=126）MS13CNMRIR（2）阿司匹林（Mr=180）MS13CNMR1HNMRIR（3）非那西?。∕r=179）MS13CNMR1HNMRIR（4）1,2二甲基苯（Mr=106）MS13CNMR1HNMRIR四、復(fù)習(xí)題（基本內(nèi)容以外的補充）為什么不用峰寬來計算理論塔板數(shù)？答：因為實際流出曲線圖上色譜峰并不規(guī)整，不便于求出峰寬，所以選用較易取得的半峰寬。 怎樣提高色譜柱的理論塔板數(shù)n，從而提高色譜柱的效率？答：根據(jù)塔板理論n=L/H，通過減少理論塔板高度和增大有效柱長可以提高色譜柱理論塔板數(shù)。（1）根據(jù)速率理論，減小固定相粒度，增大其均勻性，減小流動相粘度，以及控制合適的柱溫、選擇合適的流動相線速度，有助于理論塔板高度的減少；（2）加長色譜柱工作部分可以增加有效柱長。一般來說，由于色譜柱的強度限制、色譜儀本身的限制，常通過減少理論塔板高度來提高理論塔板數(shù)。怎樣裝柱才能提高色譜柱的效率？答：根據(jù)實際需要，一般固定相顆粒應(yīng)當小且均勻，選擇合適固定液加入，且應(yīng)當適量，既保證均勻完全的涂覆，又盡可能薄。此外，裝柱應(yīng)當均勻無氣泡，沉降充分不分層?？招闹欠衲軌蛴糜谏V分離？答：可以。只要在柱內(nèi)有合適的固定相與流動相中的被分離物結(jié)合，并能保證k值合適，就能選用空心柱進行色譜分離。例如，空心毛細管氣相色譜在毛細管內(nèi)壁涂覆固定液，既能保證合適的k，又能增大有效柱長、減弱渦流等影響，提高柱效。如何獲得色譜最佳流速？答：根據(jù)速率理論可知，H=A+B/u+Cu，故存在一個最佳流速u=BC。實際操作中，要根據(jù)所用色譜、固定相顆粒大小、流動相的性質(zhì)、柱溫等選擇合適的流速。對于HPLC，降低流速有利于減小H，提高柱效，但是流速過低，分離時間又太長，應(yīng)根據(jù)具體情況合理選擇。在AAS中，吸收度與原子濃度的關(guān)系如何？答：AAS也遵循朗伯比爾定律，積分吸收與待測元素原子的總數(shù)呈簡單的線性關(guān)系。一般情況下，常采用峰值吸收來進行定量分析。此時要求光源的吸收線與原子吸收線的中心頻率一致，所用光源為銳線光源，而吸光度與濃度的關(guān)系可簡化為：A=Kc。固定相粒度大小對速率理論中的哪些因素有影響？答：固定相粒度大小對于速率理論的渦流擴散項A和傳質(zhì)阻抗項C都有影響，粒度越小，A、C越小。毛細管電泳與高效液相色譜比較有哪些不同，毛細管電泳有哪些特點？答：相比HPLC，HPCE的特點可概括為：高效、快速、低耗、應(yīng)用廣泛。為什么毛細管電泳法有很高的理論塔板數(shù)？答：由n=μaV2DE可知，對于一定化合物，其μa、DE一定，在一定范圍內(nèi)提高電泳電壓V，可以有效提高CE的理論塔板數(shù)。熒光效率與分子結(jié)構(gòu)間關(guān)系？答：共軛體系增大，則熒光效率增大；剛性共平面，則熒光效率增大；吸電子則降低，給電子則增大。（類似對紅外吸光強度的影響）